Задаксин Задаксин thymalfasin Тимальфазин в естественном

Задаксин

Задаксин® (thymalfasin) § Тимальфазин в естественном виде первоначально был выделен из тканей тимуса. В норме может быть обнаружен в сыворотке в пределах 0. 1 – 1 нг / мл. § Тимальфазин, находящийся в максимально высоких концентрациях в тимусе, был найден в селезенке, легких, почках, мозге, крови и ряде других тканей. § Последовательность аминокислот тимальфазина гомологична последовательностям членов семейства секретина - глюкагон-вазоактивного кишечного пептида (VIP) - и альфа-интерферона (IFNα).

Задаксин® (thymalfasin) 1 10 5 Ac - Ser Asp Ala Val Asp Thr Ser Glu Ile Thr Lys thymosin alfa 1 § Международное название: § Чистый синтетический пептид с ацетилированной Leu конечной аминогруппой, состоящий из 28 аминокислот. Asp 15 Lys § Произведен методом твёрдофазного пептидного синтеза по технологии GMP. § Конечный продукт является лиофилизированной формой для подкожного введения. Glu Lys Glu Asn Glu Ala Glu Val 28 25 20

Органы иммунной системы Центральные: Периферические: тимус § костный мозг § § иммунные клетки § селезёнка § л/узлы § эктопическая лимфоидная ткань

Иммунные клетки. § § § Лимфоциты Макрофаги Полиморфные нуклеары Дендритные клетки Эозинофилы

Дифференцировка Т и В лимфоцитов Стволовая клетка. ↓ Появление незрелых предшественников Т и В лимфоцитов ↓ Появление на мембране АГ - распознающих рецепторов ↓ Развитие толерантности по отношению к ауто-АГ ↓ Дозревание лимфатических клеток и превращение их в зрелые Т и В лимфоциты

Дифференцировка Т-лимфоцитов Происходит в вилочковой железе. Ранний предшественник Т-лимфоцита ↓ ИЛ-7 Незрелый Т-лимфоцит ↓ Миграция в мозговое вещество тимуса ↓ Созревание Т-лимфоцита Т-h T-c ↓ Миграция в периферические органы.

Т-лимфоциты Функции CD 4 : хелперная функция § § Помогают В-клетке превращаться в антитело-продуцирующую плазматическую клетку § § Помогают CD 8 превращаться в зрелую цитотоксическую Т-клетку. § Помогают осуществлять макрофагам эффект гиперчувствительности замедленного типа Функции CD 8 : киллерная функция Th 1 - продуцируют g-интерферон, ИЛ-2, a-опухоленекротический фактор Th 2 - продуцируют ИЛ-4, ИЛ 5, ИЛ 10, ИЛ-13, которые отвечают за развитие гуморального ответа и продукцию Jg. Е. o ИЛ-12 поддерживает баланс между Th 1 и Th 2, повышая к-во Th 1. o g-интерферон подавляет o функции Th 2 ИЛ-10 ингибирует Th 1

Дифференцировка В-лимфоцитов Дифференцируются в плазматические клетки и продуцируют АТ В костном мозге § Стволовая клетка дифференцируется в ранний предшественник В-лимфоцита § Затем в незрелый предшественник В-лимфоцита § Формируется зрелый покоящийся лимфоцит с АГраспознающим рецептором на поверхности. Антиген - зависимая фаза § Т - независимый иммунный ответ (без участия CD 4) – продуцируют только Jg. M , нет имунной памяти. § Т - зависимый иммунный ответ – В-лимфоцит продуцирует Jg. M, Jg. G, Jg. A, Jg. E, есть имунная память (В-клетки памяти с рецептором к Jg. G и Jg. M)

Апоптоз - программированная (физиологическая ) гибель клетки. 1 путь индукции апоптоза Ø После распознавания CD 8 в клетке - мишени чужеродного пептида в CD 8 образуется белок перфорин, который формирует поры в мембране клетки-мишени. В CD 8 образуются гранзимы, которые активируют протеазы в повреждённой клетке – в результате включается апоптоз, который приводит к фрагментации ядра и активации эндонуклеаз. 2 путь индукции апоптоза Ø Связывание Fas-лиганда на поверхности CD 8 + Fas-рецептором на поверхности клетки-мишени запускает механизм апоптоза.

Иммуноглобулины Jg. M – живёт 4 -5 дней, слабоспецифичный. § Активирует комплемент § Усиливает фагоцитоз § Выработка ранних АТ против вирусов и бактерий. Jg. G – живёт 21 день, тимусзависимый (вырабатывается при участии Тлимфоцитов) § Активирует комплемент § Усиливает фагоцитоз § Проникает ч-з плаценту § Нейтрализует токсины Jg. A – живет 5 -6 дней, тимуснезависимый. § Защита слизистых (секреторный) – связывает м/о, предотвращая адгезию к слизистой ЖКТ. § Нейтрализация сывороточных бактерий и токсинов (сывороточный). Jg. E – живёт 2 -3 дня § Активация тканевых базофилов – активация хемотаксиса § Индуцирует аллергию (анафилаксию) § Реализация защиты от паразитов § Участие в иммунитете против гельминтов Jg. D – живёт 2 -3 дня § Помогает дифференцировке лимфоцитов

Цитокины Ø Ø Ø Интерлейкины Интерфероны Опухоле-некротизирующие факторы Трансформированные факторы роста Хемокины Собственно ростовые факторы

Интерлейкины ИЛ 1 – продуцируется макрофагами, глией, эндотелиоцитами, фибробластами (эндогенный пироген). Ø Индуцирует продукцию ИЛ 2, 3, 6, 8 ИЛ 2 – Продуцируется Th 1 Ø Индуцирует пролиферацию Т-клеток, созревание цитотоксических Тлимфоцитов, пролиферацию и дифференцировка В-лимфоцитов и усиление функции NK (естественных киллеров) ИЛ 3 – Продуцируется Th, тучными клетками Ø Индуцирует пролиферацию стволовых клеток, клеток для всех ростков кроветворения ИЛ 4 – Продуцируется Th 2 Ø Индуцирует пролиферацию В-клеток, секрецию Jg. G, Jg. E. Антагонист gинтерферона

Интерлейкины ИЛ 5 – Продуцируется Th 2 Ø Индуцирует пролиферацию и дифференцировку В-клеток, активацию и хемотаксис эозинофилов. ИЛ 6 - продуцируется макрофагами, лимфоцитами, фибробластами Ø Индуцирует продукцию белков острой фазы, дифференцировку клеток и продукцию АТ ИЛ 8 – продуцируется моноцитами, лимфоцитами, гранулоцитами. Ø Повышает хемотаксис нейтрофилов, прилипание к эндотелию, проницаемость сосудов. ИЛ 10 – (супресорный фактор) Продуцируется Th 2. Ø Подавляет функцию Th 1, повышает продукцию NK , моноцитов, снижает продукцию имуноцитокинов ИЛ 12 – продуцируется В-клетками, моноцитами, макрофагами Индуцирует дифференцировка Т 0 и Т 1 -клеток, повышает генерацию NK, цитотоксических Т- лимфоцитов и продукцию g-интерферона

Интерфероны a- интерфероны (лейкоцитарный) Продуцируется лимфоцитами и макрофагами b- интерфероны (фибробластный) b-1 и b-2 g- интерфероны Продуцируются активными Th 1 и NK клетками

Задаксин® Уникальный двойной механизм действия Иммуномодулирующий Прямой противовирусный Стволовая клетка Продукции Т- клеток IL-2, IFN- g IL-4, IL-10 Апоптоз T- клеток Инфицированная вирусом клетка Tхелперы CD 4 Цитотоксические Т-лимфоциты CD 8 Цитокины: IL-2, IFN-g NKклетки Инфицированная вирусом клетка экспрессию HLA-1 Репликация вируса

Задаксин® (thymalfasin) Иммуномодулирующее действие § § § Стимулирует стволовые клетки и увеличивает выработку NK, CD 4, CD 8 Задаксин увеличивает выработку Th 1 цитокинов Уменьшает апоптоз Т клеток Прямое антивирусное действие § увеличивает экспрессию HLA класса 1 § Ингибирует репликацию вирусов § Уменьшает окислительный стресс

ГЕПАТИТ B

Вирусный гепатит В § В 100 раз более контагиозный по сравнению с ВИЧ § 350 миллионов инфицированных в мире § Вирус ДНК - содержащий § Возможна вакцинация § Основа иммунного ответа - вирусологический клиренс.

Вирусный гепатит В Применяемые препараты Интерферон IFNa § Нуклеозидные аналоги (3 TC, FTC) § Задаксин® §

Аналоги нуклеотидов, Интерфероны и ЗАДАКСИН® Сравнительная таблица Ламивудин Интерфероны Механизм действия ингибирует ДНК, РНК синтез увеличивает адгезию и экспрессию молекул. HLA 1 и 2 и повышает функцию Точка действия рибосомы ядро Дни От дней до недель Токсичность Специфическая чувствит. ; От мягкой до летальной ввыработку T функции T + прямой эффект предш. Т-лимф, тимоциты Время ЗАДАКСИН инфицированные клетки От недель до месяцев Гематологич. , ЦНС; От мягкой до летальной Побочный эффект Невропатии, дисфункции печени: мягкий – серьезный Головокружение, тошнота Мягкий – серьезный Эффективность Вариация клиренса HBV ДНК и HBe. Ag; Стойкий эффект Быстрое снижение уровня циркулирующих HBV ДНК Не стойкий эффект Нет Фактически нет Вариация клиренса HBV ДНК и HBe. Ag; Стойкий эффект

Сравнение эффективности терапии HBV Терапия IFN a Ламивудин Задаксин Нет или плацебо длительность 4 месяца 6 - 12 месяцев 6 месяцев эффективность * 15% - 40%† 8% - 16%‡ 25% - 41% (37%**) 10% - 15%† * Loss of HBV DNA and HBe. Ag ** Meta-analysis. Data on file. † Schiff. Diseases of the Liver, 1999. ‡ Dienstag. Clinics in Liver Diseases, 1999.

Сравнение частоты возникновения побочных эффектов

ГЕПАТИТ B HBV МОНОТЕРАПИЯ ЗАДАКСИНОМ

HBV Монотерапия Задаксином. Зависимость ответа от дозы. 45. 5% § § 8. 3% Полнота ответа (%) ZDX dose (BIW) 6 месяцев терапии § 6 месяцев контроля § 21. 4% фаза 2 РКИ (Japan) Контрольные показатели l HBV ДНК l АЛТ

ГЕПАТИТ B HBV ЗАДАКСИН + ЛАМИВУДИН

Задаксин® Комбинированная терапия HBV с нуклеозидными аналогами Рациональность применения: l Уменьшение HBV ДНК l Уменьшение иммунной толерантности l Индуцирование имунного клиренса HBV ДНК l Уменьшение HBV мутаций l Увеличение срока поддержания эффекта

HBV Комбинированная терапия Задаксином с Ламивудином (pilot study) Anti Hbe позтивны HBV-ДНК негативны Souglu et al 2001) Gut 49 supp 3: 1639

ГЕПАТИТ B ЗАДАКСИН + IFNa

HBV Терапия Задаксином в комбинации с IFN Задаксин + IFN При терапии 6 месяцев после терапии 12 месяцев после терапии Эффективность (HBV ДНК негативность) Saruc et al (2001) DDW, (2002) WCOG

HBV Сравнение различных схем терапии (показатели ответа на терапию) 70% Полнота ответа (%) 15 - 40% * 10 - 15% * 8 - 16% ** * Schiff, Diseases of the Liver, 1999 ** Dienstag, Clinics in Liver Diseases, 1999 *** Meta analysis, data on file Chan et al, Data on file, 1999 Saruk Hepatogastroenterology, in press, 2001 25 - 41% *** 70%

ГЕПАТИТ C HCV Return to table of contents

Вирусный гепатит C § Хроническая вирусная РНК инфекция наиболее часто передающаяся парентеральным путём. l выявлено 6 разных типов (генотипов) l 4 миллиона инфицированных в США • только 5% пациентов обратившихся (200, 000) • 36, 000 новых пациентов ежегодно l 5 миллионов инфицированных в европе l 3 -5 миллионов инфицированных в Японии § До 72% пациентов не реагируют на текущие стандарты лечения. § Не создана вакцина § Immune response fundamental to viral clearance

Гепатит С и ВИЧ у детей. Ø Ø Ø Ø Ø Распространение вирусного гепатиту С среди ВИЧ+ дітей в розвитых странахє выше, чем в общей популяції Самый частый путь инфицирования - вертикальная трансмиссия Риск повышается при высокой вирусной нагрузке уматери Частота инфицирования геп. С среди ВИЧ+ женщин в 2, 8 развыше, чем среди ВІЛ(-) Риск передачи ВИЧ ребенку у женщин с ВИЧ+геп С в 1, 7 раза чему неинфицированных гепатитом С Кесарево сечение не влияет на риск перередачи от матери к ребенку. Грудное вскармливание не влияет на риск вертикальной трансмисии Применение в/в наркотиков мамой во время беременности потенцирует риск перекдачи ВИЧ и геп. С генотип гепатита С не влияет на риск вертикальной трансмисии.

HCV ZDX + IFN Конечный результат терапии (Вирусная РНК) 37% § § § Конечный ответ (%) 19% 3% n = 37 Sherman et al (1998) Hepatology 27: 1128– 1135 n = 37 n = 35 PCR ответ 6 месяцев терапии 75% genotype 1

HCV ZDX + IFN. Гистологический ответ Placebo IFN ZDX + IFN § § § n = 101 Слепая биопсия Два независимых гистолога * Sherman et al (1998) Hepatology 27: 1128– 1135 * P < 0. 05 compared to placebo

HCV Сравнение эффективности * ** ** Уровень Ответа (%) * # * *** Впервые лечённые * Mc. Hutchison et al (1998) ** Rasi et al (1996) *** Schalm et al (1999) # Data on file Впервые лечённые (генотип 1) Не ответившие на прежнее лечение (генотип 1)

Перспективы применения у пациентов с ВИЧ. Ø Низкая токсичность Ø Возможность длительного применения Ø Возможность комбинации с НИОТ (AZT) Ø Убедительное увеличение уровня CD 4+

Опыт лечения первичной иммунопатологии. Синдром Ди-Джорджи: q Возможность применения в детском возрасте q Через 3 недели приема – увеличение уровня Т-лимфоцитов q Снижение тяжести и частоты течения инфекций q Улучшение общего состояния

Опыт потенцирования формирования поствакцинального иммунитета Ø У пожилых людей( после 80 лет) Ø У больных, находящихся на хроническом гемодиализе Ø При вакцинации от гриппа, гепатита В

Задаксин® Форма выпуска § Флаконы по 1, 6 мг сухого вещества № 2 § флаконы растворителя № 2

Рекомендуемые схемы дозирования Задаксина ® § по 1, 6 мг (900 мг/м 2) 2 раза в неделю § или 40 мкг /кг при массе тела менее 40 кг два раза в неделю (3 -4 дневный перерыв)