Я эндокринология Химические посредники В организме различают

Я эндокринология

Химические посредники В организме различают 3 системы регуляции функций: нервную, эндокринную и иммунную. Они тесно взаимодействуют, обеспечивая координацию функций. Типы систем химических посредников: Медиаторы – продукты секреции нейронов (в синапсах), оказывают местное действие; Нейрогормоны и гормоны – секретируются нейронами и эндокринными клетками в кровоток и воздействуют на клетки иной локализации (например, гормоны нейроэндокринных клеток гипоталамуса); Паракринные гормоны – действуют локально на соседние клетки; Аутокрины – секретируются в межклеточное пространство и действуют на рецепторы клеток, которыми выделяются; Цитокины – секретируются иммуноцитами и другими клетками местно и системно (например, Т – хелперы – ИЛ)

Эндокринная система – Представлена крупными железами и отдельными эндокриноцитами, локализованными в ЦНС и в стенках внутренних органов

Свойства гормонов Высокая биологическая активность (нг – пг) Специфичность (АКТГ – высоко специфичен, инсулин – регулирует более 20 различных процессов) Дистантность действия

Химическая структура и синтез гормонов Три класса гормонов Белки и полипептиды гормоны гипофиза, поджелудочной и , паращитовидными железами Стероиды гормоны коры надпочечника, половых желез и плаценты Производные аминокислоты тирозина гормоны щитовидной железы и мозгового вещества надпочечников

Гормоны полипептидной природы Гормоны полипептидной (менее 100 аминокислот) и Белковой (от 100 аминокислот) природы синтезируются в ЭПС и хранятся в секреторных пузырьках в цитоплазме. При действии стимула выделяются путем экзоцитоза. Стимулом будет деполяризация (и увеличение внутриклеточного Са 2+) или через внутриклеточных посредников (ц. АМФ и затем протеинкиназы). Пептидные гормоны – водорастворимы и переносятся в свободном состоянии током крови.

Стероидные гормоны Синтезируются из холестерола и не депонируются. Состоят из трех циклогексановых и одного циклопентанового колец Жирорастворимы Диффундируют через липиды плазматической мембраны и попадают в кровь

Гормоны – амины –производные аминокислоты тирозина Гормоны щитовидной железы (тироксин и трийотиронин) соединены с белком тиреоглобулином в фолликулах железы. Секреция (после отщепления от тиреоглобулина) и выделение в кровь, где они связываются с тирозинсвязывающим глобулином Гормоны мозгового вещества надпочечников (адреналин (в 4 раза больше) и норадреналин ) заключены в пузырьки и высвобождаются путем экзоцитоза. Транспортируются кровью в свободном и связанном виде.

Регуляция гормональной секреции Осуществляется за счет механизмов обратной связи (гормон- железа): 1. В большинстве случаев отрицательная обратная связь (периферический гормон – гипоталамо – гипофизарная система. 2. положительная обратная связь (гормон увеличивает собственную секрецию (например, система ЛГ – эстрогены перед овуляцией) Существуют сезонные, возрастные, суточные циклы синтеза гормона (например, продукция гормона роста увеличивается в ранние периоды сна) Очищение крови от гормона осуществляется путем: метаболического разрушения или связывания в тканях; экскреция печенью с желчью; экскреция почками с мочой. 1. Гипоталамо-гипофизарная система Регуляции деятельности периферических желез

Механизм действия гормонов Гормон взаимодействует с рецептором клетки мишени. По химической природе – это крупные белки. Локализация рецептора : Внутри клеточной мембраны или на ее поверхности (рецепторы к белковым , пептидным гормонам и катехоламинам) В цитоплазме (стероидные гормоны) В клеточном ядре (гормоны щитовидной железы, связанные с одной из хромосом) Количество и чувствительность рецепторов к гормону регулируется в зависимости от потребностей организма. Ответ клетки реализуется путем образования гормонрецепторного комплекса.

Механизм действия гормонов Различают ионотропные и метаботропные рецепторные взаимодействия. Ионотропные - обусловлены взаимодействием (нейромедиаторов) с рецепторами на постсинаптической мембране и открытием/закрытием ионных каналов (Na+, K+, Ca 2+ и др. ) 1. напрямую 1.

Механизм действия гормонов 2. Взаимодействуя с G- белком или фермент-сопряженными рецепторами и через внутриклеточных посредников (Са 2+, ц. АМФ, ИФ 3). Связанные с G- белком рецепторы гормонов (гетеротримерные – ГТФ –связанные белки). Известно около 1000 G- белоксопряженных рецепторов, все они имеют 7 трансмембранных сегмента рецептор G- белок

Связанные с G- белком рецепторы гормонов (гетеротримерные – ГТФ –связанные белки).

Пути влияния (стимулирующий и ингибирующий)

Пути влияния а) через ионные каналы б) через ферментные системы Ферментные системы действуют на ионные каналы и/или через вторичных посредников (ц. АМФ и др. ) на другие части клетки

Фермент –сопряженные рецепторы гормонов - Это белки, имеющие только 1 трансмембранную часть. На наружной их поверхности – место связывания с рецептором, а на внутри мембранной – каталитическая часть. Например, рецептор лептина – гормона клеток жировой ткани, влияющий на аппетит и энергетический баланс. Это цитокин-рецептор, меняющий активность сопряженных с ним ферментов (тирозинкиназа ) из семейства янускиназ (ЯК 2). Последние запускают фосфорилирование сигнального преобразователя и активатора транскрипции (СПАТ), влияя таким образом на генетический аппарат клетки.

Внутриклеточные рецепторы гормонов и активация генов Стероиды, ретиноидные гормоны и щитовидной железы, витамин Д связываются с белковым рецептором внутри клетки (цитоплазма, ядро). Они Жирорастворимы и проникают через мембрану. Активированный гормонрецепторный комплекс взаимодействует с промоутером (регулятором) последовательности ДНК - элементом гормонального ответа. Таким образом, он активирует (репрессирует) транскрипцию определенных генов и м РНК.

Механизм действия вторичных посредников внутри клетки Рецептор на мембране выполняет индуцирующую роль, а вторичный посредник – запускает метаболические процессы. Вторичным посредником может быть - ц. АМФ, - фосфолипиды клеточной мембраны, - система кальций- кальмодулин (для активации тропонина С, запускающего мышечное сокращение).

Вторичный посредник - ц. АМФ Внеклеточ ная жидкость

Вторичный посредник – фосфолипиды клеточных мембран

Метаболические гормоны щитовидной железы 2 Щитовидная железа состоит из замкнутых фолликулов заполненных коллоидом. Ограничен фолликул кубовидным эпителием, выделяющим секрет внутрь фолликула. Коллоид включает тиреоглобулин в соединении с гормонами. Гормоны попадают в кровь через фолликулярный эпителий. Кровоснабжение обильное. 1 Масса 15 -20 г. 1 –щитовидная железа- выделяет §Т 4 –тироксин (тетрайодтиронин) 93% активности. §Т 3 – трийодтиронин – 3% активности. §Тиреокальцитонин – регулирует обмен Са 2+ 2 – околощитовидные железы (4 -8 шт. ) выделяют паратгормон (влияет на обмен Са 2+).

Образование Т 3 и Т 4 Большая часть продуктов реакции превращается в тироксин. Запасы. Т 3 и Т 4 в составе тиреоглобулина могут обеспечить потребности организма в течении 2 -3 мес. Ферменты лизосом отщепляют гормоны, поступающие через базальную мембрану в кровоток, связываясь с тироксин-связывающими глобулином, преальбумином и альбумином. МИТ и ДИТ расщепляются дейодиназой и йод поступает для повторного синтеза. При отсутствии данного фермента наблюдается дефицит йода. Главный гормон плазмы Т 3, так как Т 4 быстро дейодируется до Т 3. Взаимодействие I 2 с тиреоглобулином называют органификацией тиреоглобулина. Этот процесс значительно ускоряется ферментом йодиназой.

Физиологические функции гормонов щитовидной железы Тиреоидные гормоны включаются в работу медленно, но действует длительно. Это обусловлено особенностями связывания с белками плазмы и влияний на метаболизм. Главный эффект – влияние на транскрипцию генов в ядре. Рецепторы гормонов образуют димер с ретиноидным Хрецептором на фрагменте ДНК (фрагмент реагирования тиреоидного гормона). Образуется множество различных и РНК. Результат – синтез ферментов, структурных и транспортных белков практически во всех клетках Йодиназа

Специфические эффекты тиреоидных гормонов 1. Влияние на рост. При гипотиреозе у плода и детей затормаживается рост, в том числе рост и развитие головного мозга. Без гормонозамещающей терапии - интеллект будет снижен на протяжении всей жизни. Доказана главная роль этих гормонов в метаморфозе головастиков.

Специфические эффекты тиреоидных гормонов 1. Увеличение в потребности витаминов. 2. Увеличение основного обмена и снижение массы тела. 3. Действие на сердечно-сосудистую систему ( увеличение ЧСС и силы сокращения при нормализации АД). 4. Стимуляция дыхания. 5. Стимуляция моторики ЖКТ (приводит к диарее, а гипотиреоз – к запорам) 6. Возбуждение ЦНС (психоневрологические тенденции). 7. Влияние на функции мышц (небольшое повышение гормонов – увеличение силы сокращения, значительное – снижение в связи с распадом белков мышц и тремор с высокой частотой , возможно из-за повышения активности нейрональных синапсов. Дефицит гормонов – мышечная вялость). 8. Влияние на сон (затруднение засыпания при гипервозбудимости и сонливость – при гипотиреозе). 9. Влияние на другие ЖВС ( увеличивает активность большинства желез, одновременно повышая метаболизм гормонов тканями. Например, увеличение обмена глюкозы вдет к возрастанию продукции инсулина. Возрастание метаболизма при росте скелета и увеличение затем уровня паратгормона и т. д. 10. Влияние на половые функции (гипотиреоз у мужчин – потеря либидо, у женщин аменорея, с обильными и частыми, а у некоторых – скудными менструациями. Гипертиреоз у мужчин – может быть причиной импотенции).

Регуляция секреции тиреоидных гормонов Основной регулятор – ТТГ передней доли гипофиза (Мм 28000), продукция которого в свою очередь определяется ТТГ-РГ клеток срединного возвышения гипоталамуса. Механизм действия ТТГ: 1. Стимуляция протеолиза тиреоглобулина. 2. Стимуляция активности йодного насоса; 3. Стимуляция йодизации тирозина; 4. Увеличение размеров, количества и размеров, Эффект ТТГ опосредуется ц. АМФ, запускающей протеинкиназу, влияющую формы (с кубической на цилиндрическую) и на ферментативные системы секреторной активности тироцитов;

гипертиреоз Гипертиреоидизм (токсический зоб, тиреотоксикоз, болезнь Грейвса) Симптомы (высокая возбудимость, непереносимость жары, увеличение потоотделения, потеря массы тела, диарея, мышечная слабость, тремор, утомляемость, бессонница. Экзофтальм (пучеглазие) вследствие отека тканей глазницы и дегенерация глазных мышц. Диагностика : определение концентрации ТТГ и ТСИ (тиреоид - стимулирующего иммуноглобулина радиоиммунологическим методом, низкий при аденоме) Определение основного обмена. (+3060%). Лечение радиоактивным йодом Хирургическое удаление

Гипотиреодизм. Причины проявления Возникает вследствие: Аутоиммунных процессов, а затем Фиброзных изменений. Хирургического вмешательства Облучения Проявления: Эндемический коллоидный зоб (Пермская область, Поволжье, швейцарские Альпы, Анды и др. ). Причина – снижение йода в воде, отсюда избыток ТТГ – увеличение коллоидного тиреоглобулина и рост фолликулов. Размеры фолликулов и железы увеличиваются в 10 -20 раз. Идиопатический неколлоидный зоб (при нормальном поступлении йода), после тиреоидида. Поэтому невоспаленные участки гипертрофируются, воспаленные уменьшаются. У некоторых больных с коллоидным зобом –нарушение ферментных систем, необходимых для синтеза гормонов (йодного захвата, пероксидазы, связывание йодированного тирозина в тиреоглобулине, дейодирования)

Гипотиреодизм. Физиологические проявления

Специфические эффекты тиреоидных гормонов 1. Влияние на рост. При гипотиреозе у плода и детей затормаживается рост, в том числе рост и развитие головного мозга. Без гормонозамещающей терапии - интеллект будет снижен на протяжении всей жизни. Доказана главная роль этих гормонов в метаморфозе головастиков.

Гипотиреодизм. Микседема Выпадение волос латеральной части бровей Лунообразное Большой Облысение Лицо язык До лечения после лечения

микседема Выпадение волос латеральной части бровей Лунообразное Лицо Большой язык Облысение

Надпочечник 2 надпочечные железы, каждая около 4 г. Состоят из 2 отдельных частей: коркового и мозгового вещества. Мозговое вещество (20%) вырабатывает адреналин и норадреналин (иннервируется симпатическим отделом ВНС). Кора секретирует кортикостероиды: Минералкортикоиды (Альдостерон и др. ) Глюкокортикоиды (кортизол и др. ) Половые гормоны (андрогены, эстрогены).

Гормоны надпочечников В коре 3 зоны: -Клубочковая - 15% коры – синтезируют альдостерон под влиянием фермента альдостерон синтетазы. Синтез контролируется концентрацией ангиотензина II и К+ во внеклеточной жидкости. -Пучковая – (75%) – глюкокортикоиды и в небольшом количестве половые гормоны. Секреция регулируется АКТГ -Сетчатая - андрогены (гидроэпиандростерон и андростерон) и небольшое количество – эстрогенов и глюкокортикоидов. Продукция альдостерона и кортизола регулируется независимо друг от друга.

Синтез стероидов Синтезируются из холестерола в основном из ЛПНП плазмы крови. Поступают ЛПНП путем эндоцитоза, в виде «окаймленных ямок» , соединяясь предварительно с мембранным рецептором. Лизосомы сливаются с везикулами и холестерол высвобождается. АКТГ увеличивает транспорт холестерола. В митохондриях холестерол расщепляется до прегненолона. Этот начальный этап в 3 -х зонах стимулируется по -разному, что определяет преобладание гормона в зоне. В пучковой – кортизол (под влиянием АКТГ) В клубочковой – альдостерон (под влиянием ангиотензина II) Окаймленные ямки

Стероиды взрослых Концентрация в плазме в нг/дл Средние значения секреции мг/сут Глюкокортико идная активность Минералокорт икоидная активность кортизол 12 15 1 1 кортикостерон 0, 4 3 0, 3 15, 0 альдостерон 0, 006 0, 15 0, 3 3000 деоксикортикостерон 0, 006 0, 2 100 дегидроэпиандростерон 175 20 - - кортизон - - 1, 0 преднизолон - - 4 0, 8 метилпреднизолон - - 5 - дексаметазон - - 30 - - - 10 125 стероиды кортикостероиды Синтетические стероиды

Стероидные гормоны 90 -95% кортизола связаны с белками плазмы-кортизол –связывающим глобулином (транскортином) и альбумином (в меньшей степени). Высокое время полувыведения (60 -90 мин). 60% альдостерона связана с белками, поэтому время полувыведения - только 20 мин. Связанные белки – резерв, препятствующий быстрому колебанию свободного гормона в крови. Что наблюдается, например, с кортизолом при стрессе. Кортикостероиды разрушаются в печени, связываясь с глюкуроновой кислотой и сульфатами. Затем выделяются желчью с калом или после фильтрации в почках с мочой. В норме концентрация альдостерона в крови – 6 нг на 100 мл, скорость секреции – 0, 15 мг/сут. Концентрация кортизола – 12 мкг/дл, а скорость секреции – 20 мг/сут.

Функции минералкортикоидов Альдостерон обеспечивает 90% минералкортикоидной активности. 1. Влияет на всасывание Na+ и секрецию К+ в почках (дистальный извитой каналец, корковый отдел собирательных трубочек). Избыток альдостерона увеличивает объем внеклеточной жидкости и АД, но не существенное увеличение концентрации натрия в плазме, так как Na+ «тянет» за собой воду по осмотическому градиенту. Повышение давления ведет к росту выведения соли и воды, т. е. натрийурезу и диурезу, опосредованному повышением давления. В итоге экскреция соли и воды возвращается к норме при избытке альдостерона. При недостатке гормона развивается громадная потеря воды и соли и уменьшение внеклеточной жидкости, что ведет к тяжелой дегидратации, уменьшению объема крови и циркуляторному шоку. 2. Стимулирует реабсорбцию Na+ и секрецию К+ в потовых, слюнных железах и эпителиоцитах кишечника. При недостатке альдостерона снижается реабсорбция Na+, что снижает всасывание хлоридов, других анионов и воды, вызывая диарею и их выведение из организма.

Функции минералкортикоидов Избыток альдостерона вызывает гипокалиемию, снижение К+ плазмы, мышечную слабость (связана с нарушением возбудимости мембран мышечных и нервных клеток, нарушению проведения возбуждения. Недостаток альдостерона вызывает гиперкалиемию и кардиотоксикоз (включая слабость сердечной мышцы и аритмию). Избыток альдостерона нарушает канальцевую секрецию Н+ в нефроне почки и легкий алкалоз.

пд

ПД различных отделов сердца I — ПД синусного узла, II — ПД миокарда желудочков, МДД — медленная диастолическая деполяризация

Механизм взаимодействия стероидов с рецептором путем активации генов Альдостерон связывается с белковым рецептором внутри клетки (цитоплазма, ядро). Он жирорастворим и проникает через мембрану. Активированный гормон-рецепторный комплекс взаимодействует с промоутером (регулятором) последовательности ДНК элементом гормонального ответа. Таким образом, он активирует (репрессирует) транскрипцию определенных генов и м РНК. Образованные белки представляют смесь ферментов и транспортных белков мембраны (натрий-калиевая АТФ-аза), необходимых для

Регуляция секреции альдостерона не зависит от o o регуляции продукции кортизола и половых гормонов Важную роль в регуляции секреции играют (по степени важности): Увеличение концентрации К+ во внеклеточной жидкости (усиливает); Увеличение активности ренин- ангиотензиновой системы (усиливает); Увеличение Nа+ во внеклеточной жидкости (снижает) АКТГ гипофиза необходим для синтеза, но не влияет существенно на скорость секреции

Функции глюкокортикоидов

Функции глюкокортикоидов При всех видах стресса резко возрастает уровень глюкокортикоидов (опосредованный АКТГ) Основные виды стресса: травма, инфекция, резкая жара или холод, введение норадреналина, хирургическое вмешательство, введение нейротоксинов под кожу, фиксация животных, заболевания, ведущие к ослаблению организма. Противовоспалительное действие в высокой концентрации. Кортизол блокирует ранние этапы воспаления и ограничивает воспаление и вызывает заживление, если воспаление началось за счет того, что : o o o o ограничивает выход гидролитических ферментов за счет стабилизации мембран лизосом, снижает проницаемость капилляров и выход плазмы в ткани, Снижает миграцию лейкоцитов в очаг воспаления и фагоцитоз поврежденных тканей, Подавление иммунной системы, в основном за счет образования лейкоцитов (Т-лимфоцитов), Снижает жар в основном за счет снижения выработки ИЛ-1, что подавляет активацию гипоталамического центра терморегуляции. Блокирует воспалительные компоненты аллергических реакций , так как снижает травматическое действие воспалительных компонентов аллергии. Влияет на клетки крови и иммунитет при инфекционных заболеваниях. Кортизол снижает число эозинофилов и лимфоцитов в крови, вызывает атрофию лимфоидной ткани (уменьшение Тлимфоцитов и антител), что может вызвать смерть. Напротив, применение кортикоидов предотвращает отторжение трансплантатов органов. o Механизм действия на рецептор клетки, находящимся в ядре , такой же как альдостерона.

Регуляция секреции кортизола АКТГ стимулирует продукцию кортизола. АКТГ – полипептид из 39 аминокислотных остатков. КРГ – полипептид из 41 аминокислоты. АКТГ действует на клетки коры надпочечника через вторичный посредник ц. АМФ. Стресс увеличивает эти процессы. Уровень КРГ и АКТГ высок ранним утром, снижается вечером. Синтез АКТГ осуществляется одновременно с МСГ , липотропином и эндорфином.

Процессинг пропиомеланокортина

Гипоадренализм (болезнь Аддисона) Первичная атрофия коры надпочечников в -80% - аутоиммунный процесс - Туберкулез или опухоль надпочечников. Нарушения: 1. дефицит минералкортикоидов (снижение реабсорбции Na+, как результат – громадная потеря Na+, Сl-, воды, уменьшения объема и давления крови, Гипокалиемия, ацидоз Циркуляторный шок и смерть в течении 4 суток – 2 недель 2. дефицит глюкокортикоидов Невозможность поддержания нормальной концентрации глюкозы между приемом пищи (нет глюконеогенеза), Мышечная слабость Восприимчивость к стрессам. 3. Пигментация кожи. Меланин распределяется неравномерно. Причина –значительное увеличение продукции наряду с АКТГ - МСГ (выделяются одновременно) Без лечения – Аддисонический криз.

Гиперадренализм (синдром Кушинга) Основные нарушения связаны с избытком кортизола, хотя есть и проявления гиперпродукции андрогенов. Причины: -Аденома аденогипофиза, -Усиления продукции КРГ и АКТГ (болезнь Кушинга) - «эктопическая секреция» АКТГ любыми опухолевыми клетками. -аденома коры надпочечника. 25% случаев болезни синдрома Кушинга – первичная гиперпродукция кортизола, что по механизму отрицательной обратной связи снижает выработку АКТГ. Для диагностики – дексаметазоновый тест. -проявляется синдром и при длительном лечении глюкокортикоидами (ревматоидный артрит). Внешние признаки: «бычий торс» , отечность на лице, акне (рост волос на лице, избыток андрогенов), гипертензия (минералокортикоидное действие кортизола). До лечения после адренэктомии 1. Влияние на углеводный и белковый обмен Увеличение уровня глюкозы в крови, уменьшения белка в тканях (мышцах, соединительной, лимфоидной и костной) и мышечная слабость, снижение иммунитета, остеопорозы, надрывы подкожной ткани. Лечение : адренэктомия, подавление стероидогенеза (метирапон, кетоконазол) секреции АКТГ (антагонисты серотонина, ингибиторы ГАМ-трансаминазы.

Первичный альдостеронизм (болезнь Конна) Возникает как маленькая опухоль клубочковой зоны и избытком секреции альдостерона (гипокалиемия, увеличение объема внеклеточной жидкости и крови, незначительное повышения натрия и гипертензия. Гипокалиемия ведет к временным параличам. Диагностический признак – снижение ренина в плазме. Лечение хирургическое удаление опухоли, при гиперплазии – части надпочечника.

Адреногенитальный синдром Возникает как результат гиперсекреции андрогенов при опухоли надпочечника. - У женщин – признаки вирилизации (борода, низкий голос, маскулинизация, увеличение клитора) - У мальчиков препубертатного возраста быстрое развитие мужских половых органов - У мужчин -маскировка тестостеронов. Диагностический признак – увеличение экскреции с мочой 17 -кетостероидов, производных андрогенов) в 10 -15 раз. Адреногенитальный синдром У мальчика 4 лет

Поджелудочная железа

инсулин

Механизм действия инсулина

Механизмы стимулации секреции инсулина глюкозой

«Сахарная» кривая уровня глюкозы в крови здорового и больного

Образование Т 3 и Т 4 Кровеносные сосуды коллоид эпителиоцит МИТ – монойодтирозин, ДИТ - дийодтирозин. Клетки секретируют белок – тиреоглобулин (Мм 335000). Базальная мембрана содержит йодные насосы ( «ловушки» ). Концентрация Iв клетке в 30 раз больше, чем в плазме. Увеличивает скорость захвата ТТГ.

Образование Т 3 и Т 4 Взаимодействие I 2 с тиреоглобулином называют органификацией тиреоглобулина. Этот процесс значительно ускоряется ферментом йодиназой. Большая часть продуктов реакции превращается в тироксин. Запасы. Т 3 и Т 4 в составе тиреоглобулина могут обеспечить потребности организма в течении 2 -3 мес. Ферменты лизосом отщепляют гормоны, поступающие через базальную мембрану в кровоток, связываясь с тироксинсвязывающими глобулином, преальбумином и альбумином. МИТ и ДИТ расщепляются дейодиназой и йод поступает для повторного синтеза. При отсутствии данного фермента наблюдается дефицит йода. Главный гормон плазмы Т 3, так как Т 4 быстро дейодируется до Т 3. I - йод

Болезни щитовидной железы

Определение концентрации гормона в крови Радиоиммунологическое исследование -получение высокоспецифических антител к гормону - добавление немного антител к раствору гормона и стандартного гормона с радиоактивной меткой (число антител должно быть недостаточным для полного связывания гормона, тогда будет конкуренция за связывание с антителами. Возможность конкуренции связано с концентрацией исследуемого и стандартного меченного гормонов. Затем опреде