Холера Кампилобактериоз Отравления бактериальной этиологии Занятие 4 СЗГМУ

Холера. Кампилобактериоз. Отравления бактериальной этиологии Занятие 4 СЗГМУ, 2012

Холера. Возбудители, патогенез инфекции, диагностика.

Холера представляет собой особо опасную инфекционную болезнь с диарейным синдромом, фекально-оральным механизмом передачи возбудителя инфекции, водным (наиболее частым), пищевым и контактным путями распространения. Характеризуется различной тяжестью клинического течения заболевания, нарушением водносолевого обмена, обезвоживанием, токсикозом и гастроэнтеритом. Инкубационный период - один - пять дней. Холера входит в перечень болезней, требующих проведения мероприятий по санитарной охране территории Российской Федерации. В соответствии с Международными медикосанитарными правилами (2005 г. ) холера относится к болезням, которые могут оказывать серьезное влияние на здоровье населения, вызывать события, которые могут представлять собой чрезвычайную ситуацию в области санитарно-эпидемиологического благополучия населения, имеющую международное значение.

Первая пандемия

7 пандемия

ПОСТАНОВЛЕНИЕ от 18 апреля 2011 г. N 32 О ПРОТИВОЭПИДЕМИЧЕСКИХ МЕРАХ И ПРОФИЛАКТИКЕ ХОЛЕРЫ В РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ По данным Всемирной Организации Здравоохранения (ВОЗ) ежегодно в мире регистрируется 3 - 5 миллионов случаев холеры, из которых 100 - 120 тысяч заканчиваются летальными исходами. В последние годы ВОЗ о холере информируют до 58 -ми стран, из которых более половины приходится на Африканский континент. На острове Гаити наблюдается эпидемия холеры, которая имеет потенциал для пандемического распространения. С октября 2010 года по состоянию на середину марта 2011 года в Республике Гаити с симптомами этой опасной болезни обратилось более 260 тысяч человек, из них более 140 тысяч было госпитализировано. Летальными исходами завершилось около пяти тысяч случаев заболеваний.

Семейство Vibrionaceae Enhydrobacter Photobacterium Aeromonas Plesiomonas Vibrio

Род Vibrio V. cholerae V. parahaemolyticus V. alginolyticus V. vulnificus V. fluvialis

V. cholerae

Антигены О –антиген (полисахаридная часть ЛПС), термостабильный; возбудителями холеры являются представители серогрупп О 1 (V. cholerae и V. cholerae eltor) и О 139 (V. cholerae Bengal) О- антиген состоит А, В, С компонентов, по сочетанию которых выделяют серотипы Огава(А, В), Инаба (А, С), Гикошима (А, В, С) Н –антиген – жгутиковый белок флагеллин, термолабильный, общий у всех возбудителей холеры Капсульный антиген только у V. cholerae Bengal

Факторы патогенности 1. Подвижность. 2. Хемотаксис. 3. Факторы адгезии и колонизации 4. Ферменты: муциназа, протеазы, нейраминидаза, лецитиназа 5. Экзотоксин-холероген 6. Эндотоксин

Холероген

Электронная фотография (биопсия слизистой кишечника)

Палаты для больных холерой

Холерный алгид

Рост в пептонной воде Холерные вибрионы быстро размножаются в 1%-й пептонной воде, образуя через 6 - 8 ч на поверхности среды нежную пленку. Через 24 ч роста пленка становится грубой, среда слабо мутнеет.

II этап исследования (через 6 - 8 ч от начала исследования) Высев с первой среды накопления на щелочной агар, элективную среду и во вторую среду накопления (1%-ю пептонную воду). Постановка ускоренных методов исследования с материалом из I среды накопления при отрицательных результатах в МФА и РИФ на I этапе исследования.

DFA staining of V. cholerae O 1 using the Cholera DFA Kit (New Horizon Diagnostics). (A) Fresh culture; (B) VBNC cells; (C) and (D), DVC-incubated cells.

III этап исследования (через 12 - 16 ч от начала исследования) • Высев из второй среды накопления на щелочной агар. • Просмотр посевов на щелочном агаре, засеянных на I • • • этапе исследования, в косо проходящем свете стереоскопического микроскопа. Производят отбор подозрительных колоний на полиуглеводную среду и щелочной или другой питательный агар для накопления культур. При наличии достаточного количества подозрительных колоний ставят следующие тесты: - микроскопия мазка, окрашенного по Граму; - слайд-агглютинация с сыворотками холерными O 1 серогруппы (при положительном результате - с Инаба, Огава), RO, при отрицательном результате - с сывороткой O 139 серогруппы; - постановка МФА, РИФ.

Рост на МПА На поверхности плотного питательного агара (щелочной агар, p. H 8, 0) через 18 - 24 ч инкубации рост холерных вибрионов проявляется в формировании крупных (2 - 3 мм), гладких, прозрачных колоний с ровным краем, которые легко эмульгируются в физиологическом растворе. В косо проходящем свете они отсвечивают голубоватым цветом.

Колонии Vibrio cholerae на чашке с щелочным агаром

V. сholerae (окраска по Граму) К виду Vibrio cholerae отнесены грамотрицательные, аспорогенные, полиморфные, слегка изогнутые или прямые палочки длиной 1, 5 - 3, 0 мкм и шириной 0, 2 - 0, 6 мкм.

V. cholerae по наличию специфического O-антигена распределяются на серологические группы. В настоящее время известно 206 серологических O групп холерных вибрионов. Возбудителями холеры являются холерные вибрионы O 1 и O 139 серологических групп. Холерные вибрионы других не O 1/не O 139 серологических групп могут вызывать спорадические или групповые случаи диарей, не склонные к эпидемическому распространению.

Холерные вибрионы O 1 и O 139 серогрупп, как правило, чувствительны к набору антибактериальных препаратов. Однако широкое применение антибактериальных препаратов в очагах холеры способствовало увеличению резистентности холерных вибрионов к ним.

Холерные вибрионы являются носителями умеренных фагов с низкой литической активностью. Известны фаги, активные в отношении холерных вибрионов O 1 и не O 1, включая O 139 серологическую группу, а также с более узким спектром литического действия, в пределах отдельных групп штаммов. Набор холерных фагов

Понятие эпидемической значимости базируется на определении комплекса показателей: - прямые - выявление гена холерного токсина в ПЦР и определение активности его продукции на кроликах-сосунках; - косвенные - отсутствие гемолитической, липазной активности, поздняя ферментация маннита, высокая адгезивная активность in vitro (на модели эритроцитов).

Профилактика холеры v Специфическая: вакцинация по эпидемическим показаниям вакцина холерная бивалентная химическая таблетированная – содержит холероген-анатоксин и О-антиген сероваров Инаба и Огава -вакцина холерная (холероген-анатоксин + О-антиген) жидкая v Неспецифическая: повышенные санитарногигиенические требования; употребление кислых продуктов (лимоны, уксус и т. д. )

Кампилобактериоз

Кампилобактериоз (вибриоз) Острое инфекционное заболевание, вызываемое микроорганизмами рода Campylobacter, характеризующееся ост-рым началом, лихорадкой, интоксикаци-ей и преимущественным поражением ЖКТ.

Наименование вида Источники выделения Патогенность для человека Патогенность для животных C. fetus Крупный рогатый скот, овцы Сепсис, гастроэнтерит, сальпингит, инфекции плода, аборт, менингит Спонтанные аборты у овец и крупного рогатого скота C. lari Домашние и дикие птицы, собаки, кошки, обезьяны, лошади, мидии, моллюски, пресная и морская вода Гастроэнтерит, сепсис Гастроэнтерит птиц C. jejuni subsp. jejuni Домашние и дикие птицы, свиньи, быки, собаки, кошки, кролики, норки, насекомые, вода Гастроэнтерит, сепсис, проктит, менингит, аборт, синдром Гийена-Барре[1] Гастроэнтерит, гепатит Человек Гастрит, сепсис Не выявлена Свиньи, домашняя птица, быки, овцы, дикие птицы Гастроэнтерит, сепсис C. jejuni doylei C. coli subsp. гастро-энтерит, Гастроэнтерит у

Биологические свойства К роду Campylobacter отнесены тонкие вибриоидные клетки длиной 0, 5 -8 мкм и имеющие один или более завитков спирали (по гречески «campylos» - изогнутый). Для кампилобактеров характерны S-образная форма, а также форма в виде «крыльев летящей чайки» , которые возникают при соединении двух клеток. Грамотрицательные, подвижные, спор и капсул не образуют. Характерное «мечущееся» и винтообразное движение обусловлено наличием одиночных жгутиков, расположенных на одном или обоих концах клетки.

C. jejuni (электронная микроскопия)

Campylobacter jejuni (электронная микроскопия)

Campylobacter jejuni (чистая культура): типичные тонкие палочки в виде запятой, S-образные и в виде «крыльев летящей чайки» .

Биологические свойства Микроаэрофилы. Растут при концентрации кислорода 3 -15 % и двуокиси углерода 3 -5 %. Некоторые штаммы дают слабый рост в аэробных условиях. Основные возбудители кишечного кампилобактериоза – термофилы (растут при температуре 420 С.

Создание оптимальной атмосферы для культивирования кампилобактеров

Колонии C. jejuni

Положительная и отрицательная реакции на оксидазу (по Эрлиху с альфа-нафтолом)

Положительная каталазная реакция

Гидролиз гиппурата натрия (темно-фиолетовое окрашивание)

Чувствительность к налидиксовой кислоте и устойчивость к цефалотину (C. jejuni subsp. jejuni)

Пищевые отравления бактериальной природы

Пищевые отравления Бактериальной природы Не микробной природы (до 530 различные м/о) -отравления ядовитыми растениями и тканями животных ; -отравления продуктами растительного или животного происхождения (ядовитые при определенных условиях- скомбротоксикозы) -отравления химическими веществами; Неустановленной этиологии До 22 -60% всех отравлений

Пищевые отравления – острые, реже хронические неконтагиозные заболевания, возникающие в результате употребления пищи массивно обсемененной определенными видами микроорганизмов или содержащей токсические для организма вещества микробной или не микробной этиологии. Пищевые инфекции Пищевые отравления Инфекционность + - Пути инфицирования Пищевой Контактно-бытовой Пищевой Интенсивность размножения микроорганизма и выработки им токсина в продуктах - + инфицирующая доза Может быть невелика Значительна Инкубационный период Несколько дней. Несколько недель и более Как правило Несколько часов Основные заболевания Холера, брюшной тиф, Паратифы, шигеллез и др. Пищевые токсикоинфекции и интоксикации

Пищевые отравления бактериальной природы Пищевые токсикоинфекции Пищевые токсикозы (+микотоксикозы)

Пищевые токсикоинфекции - обширная группа острых кишечных инфекций, развивающихся после употребления в пищу продуктов, инфицированных патогенными или условно-патогенными микроорганизмами. К токсикоинфекциям относятся острые заболевания, возникающие при употреблении пищи, содержащей массивное количество живых клеток специфического возбудителя (105 -106 и более КОЕ в 1 г или мл продукта).

К возбудителям пищевых токсикоинфекции относятся: Ø представители семейства Enterobacteriaceae: представители родов Proteus, Citrobacter, Hafnia, Klebsiella и др. ; Ø семейства Vibrionaceae — V. parahaemolyticus; Ø семейства Bacillaceae — В. сеreus, С. реfringens; Ø семейства Pseudomonadaceae — Р. аеruginosa.

Материал для исследования От больного (рвотные массы, промывные воды желудка, моча, кровь, Испражнения, Слизь из зева, носа Гной из очагов Трупный материал остатки пищи исходные продукты Смывы и соскобы С окружающих предметов (пищеблоков)

Посев пищевых продуктов Твердый продукт Жидкий продукт 25 г 25 мл магн. ср. 5 г 100 мл 5 мл одинарной магн. ср. 10 мл + 90 мл или 25 мл 15 г + 135 мл 0, 1% ПВ или 25 мл 10% двойной 0, 1% ПВ или физ. р-ра желч. б-на По физ. р-ра 0, 1 мл 25 мл 10% 0, 1 мл по 0, 1 мл желч. б-на 0, 1 мл Эндо П-ва ВСА Эндо 9, 9 мл -3 По 0, 1 мл разв. 10 -5 Эндо ЖСА ВСА Эндо ЖАМПФ П-ва КА МИС

Посев испражнений и рвотных масс По 0, 3 -1, 0 мл По 0, 1 мл Эндо П-ва Эндо ВСА 10 мл 0, 1% ПВ или физ. р-ра магн. ср. 2, 5 -5 мл 0, 1 мл По 0, 1 мл Эндо ЖСА ВСА Эндо ЖАМПФ П-ва КА МИС 0, 1 мл селен. ср. 2, 5 -5 мл

ПИЩЕВЫЕ ТОКСИКОЗЫ БАКТЕРИАЛЬНОЙ ПРИРОДЫ -S. aureus -C. botulinum МИКОТОКСИКОЗЫ - грибы рода Aspergillus - грибы рода Fusarium - Claviceps purpurea

Ботулизм [от лат. botulus, кoлбaca — тяжёлая пищевая токсикоинфекция. Под названиями аллантиазис [от греч. allantiksa, колбаса], ихтиоизм [от греч. ichtis, рыба] заболевание известно с XVIII в. , когда были зарегистрированы случаи отравления рыбой и кровяной колбасой. С. botulinum обитают в кишечнике человека, животных, птиц, рыб, жуков, мух, червей и с их испражнениями попадают в окружающую среду, в основном в почву, где продолжается активная жизнь палочки ботулизма. Источник - мясо (при неправильной разделке туш), продукты домашнего приготовления - грибы соленые и маринованные, окорока, колбасы, рыба вяленая и копченая, балык, огурцы (до 90% случае заболеваний). Консервные банки, в которых происходит размножение С. botulinum и накопление токсина, имеют характерный внешний вид — Вздутие «бомбаж» металлической тары , при этом не наблюдается органолептических изменений продукта.

Строгий анаэроб, грам(+) палочки, перитрихи (4 – 35 жгутиков), капсула(-), образуют субтерминально расположенные споры чрезвычайно устойчивые: в земле сохраняются 1 год, 100ºС (споры А и В) – 5 часов, 105ºС-1 – 2 часа, 120ºС – 20 -30 мин, в высушенном состоянии сохраняются десятилетиями, причем наиболее резистентны споры сероваров А, В, F. Вегетативные формы С. botulinum погибают быстро — при температуре 80 °С в течение 15 мин. Возможно транзиторное выделение спор у маленьких детей (через соски, бутылочки), если споры успели прорасти – клиника ботулизма.

ü Определяется тип токсина (серологическое типирование), выделение культуры (посев на твердые питательные среды с последующим исследованием культур и морфологическими признаками С. botulinum. ü Серологические типирование – тест на белых мышах (защитный тест) и реакция нейтрализации с диагностическими противоботулинистическими типоспецифическими антитоксическими сыворотками – но необходимо помнить о возможных неспецифических реакциях; ü Материал – 23 –исследуется на токсин, 13 –на выделение культуры; ü Присутствие токсина определяют в биологической пробе — на белых мышах. Предварительно ставят опыт на двух парах мышей. Первой паре вводят 0, 7— 1 мл только исследуемой суспензии внутривенно или внутримышечно. Двум другим мышам вводят исследуемый материал со смесью специфических антитоксических сывороток сероваров А, В, С, Е, F. Если погибают первые две мыши (наблюдение ведется до 4 сут), то сразу ставят развернутый опыт на 5 парах белых мышей для определения серовара токсина клостридий ботулизма.

Биологический метод (реакция нейтрализации токсина in vivo) Контрольная группа (Вводят исслед. мат. ) Исслед. материа л+ ат против токсина А Исслед. материа л+ ат против токсина В Исслед. материа л+ ат против токсина Е

Стафилококковое пищевое отравление — типичный бактериальный токсикоз, занимающий по распространенности второе место после сальмонеллезной инфекции. Симптомы развития токсикоза обусловлены действием энтеротоксина, выделяемого стафилококками и накапливающегося в продуктах. Стафилококки широко распространены в окружающей среде, поэтому пути обсеменения ими продуктов самые разнообразные.

ь Источником инфицирования пищевых продуктов стафилококками является человек, реже — животные (коровы, козы и др. ). ь В связи с разнообразными возможностями локализации стафилококков у людей различны и механизмы передачи — обсеменения пищевых продуктов: контактный, фекальноалиментарный, воздушно-капельный. ь Чаще всего причиной стафилококковых токсикозов является употребление молока и молочных продуктов, кондитерских изделий с заварным кремом, мяса и мясных продуктов. ь Молоко, которое может быть загрязнено человеком или и обсеменено больным животным (мастит коров, коз) является благоприятной питательной средой. При хранении такого молока при комнатной t энтеротоксин накапливается за 8 ч, в то время как в условиях холодильника образование токсина идет очень медленно - в незначительных дозах к 18 -му дню.

В кисломолочных продуктах стафилококки не размножаются и не вырабатывается энтеротоксин из -за губительного действия молочной кислоты. В последние годы причиной стафилококковых токсикозов чаще всего являются пищевые изделия, приготовленные из мяса: котлеты, особенно с добавлением в фарш белого хлеба, блинчики с мясом, макароны по-флотски, печеночный паштет, студень и др. Органолептические свойства продуктов, в которых размножаются стафилококки и накапливаются энтеротоксины, не изменяются.

В исследуемом пищевом продукте и выделенных культурах стафилококков определяют энтеротоксины – с помощью антитоксических иммунных сывороток к энтеротоксинам А, В, С, D, Е, F. Применяют метод преципитации в агаре. Антигеном служат экстракты пищевых продуктов и фильтраты бульонных культур стафилококков. При постановке реакции непрямой гемагглютинации используют диагностические сыворотки, содержащие антитела к энтеротоксинам, адсорбированные на эритроцитах. Реакция ИФА

Эрготизм (клавицепсотоксикоз, отравление токсином, вырабатываемым C. purpurea) ü Claviceps рurpurea поражает многие дикорастущие и культурные злаковые растения, в том числе рожь, ячмень и пшеницу. ü При содержании склероциев в зерне более 2% по массе возможно развитие массовых заболеваний эрготизмом, ü допускается содержание в муке – не более 0, 05% склероциев ü Токсин не разрушается при выпекании хлеба из зараженной муки

Эрготизм (отравления спорыньей) Микотоксикозы, вызываемые микотоксинами Claviceps рurpurea поражает многие дикорастущие и культурные злаковые растения, в том числе рожь, ячмень и пшеницу. При содержании склероциев в зерне более 2% по массе возможно развитие массовых заболеваний эрготизмом. Клинические формы: Ø гангренозная форма – основные симптомы - острые боли, чувство жжения в конечностях, развитие сухой гангрены на фоне общей слабости и сонливости. В тяжелых случаях происходит отторжение мягких тканей, а нередко и целых конечностей (чаще нижних) в местах суставных сочленений. Ø конвульсивная форма характеризуется судорожным синдромом с развитием спастических контрактур конечностей. Заболевание начинается с потери аппетита, ломотой во всем теле, во многих случаях наблюдаются гастроэнтериты. Симптомы отравления носят приступообразный характер.

Больной «антониевым огнём» — деталь нижней части правой створки Изенгеймского алтаря, художник Маттиас Грюневальд, предположительно 1506— 1515 годы, ныне в музее Унтерлинден, Кольмар (Франция).

Эрготизм (клинические проявления)

Фузариотоксикоз

Отравление афлотоксином «чёрный» язык

Профилактика отравлений Мойте руки должным образом с мылом, полощите тщательно и вытрите сухим (одноразовым) полотенцем (желательно при 60 °C): - перед приготовлением, сервировкой или употреблением пищи; - после пользования туалетом или замены подгузников; - после приготовления овощей, корнеплодов, мяса; - после контакта с животными на ферме или посещения фермы; - после любого контакта с фекалиями домашних животных. Приготовление пищи - любой человек с диареей или рвотой должен быть отстранен от обработки продуктов; - мясо, включая рубленое мясо, должно быть полностью приготовлено; - все фрукты с кожей должны быть очищены и затем ополоснуты проточной питьевой водой; - все овощи должны быть вымыты должным образом проточной питьевой водой, особенно те, которые не будут приготовлены перед потреблением; - удаляют все корни овощей и ополаскивают их проточной питьевой водой; - полная кулинарная обработка овощей и мяса уничтожает болезнь, причиняемую бактериями и вирусами; - избегают взаимного загрязнения распространяющихся бактерий от сырого продовольствия до "готового к употреблению", например, используя отдельные доски для нарезки сырого мяса и готового мяса или свежих овощей, и мыть разделочные доски с мылом между обработкой сырых и готовых продуктов.