Возбудители шигеллезов и холеры Доц Ткачук Н И

Возбудители шигеллезов и холеры Доц. Ткачук Н. И.

План лекции Вступление • Возбудители бактериальной дизентерии. Биологические свойства и методы лабораторной диагностики • Общая характеристика возбудителей холеры

Семейство Enterobacteriaceae • Бактерии семейства Enterobacteriaceae включает более чем 20 родов, что объеденяет около 100 видов бактерий. Заболевания у человека вызывают бактерии родов Escherichia, Shigella, Salmonella, Klebsiella, Proteus, Citrobacter, Serracia, Yersinia и др. • На данное время большое значение приобретает роль условно-патогенной флоры, которая часто вызывает оппортунистичные инфекции, при этом вызывают около 50 % всех септицемий, до 70 % всех гастроэнтеритов, и более чем 70 % инфекций мочевыделительных путей.

Классификация семейства Enterobacteriaceae Escherichia Shigella Edwardsiella Salmonella Citrobacter Enterobacter Serratia Providencia Yersinia Klebsiella Hafnia Proteus Morganella Erwinia

Шигеллы (Shigella) • Бактерии получили название в честь японского бактериолога Кийоси Шига, который впервые описал возбудителя бактериальной дизентерии (шигеллеза). В соответствии с антигенной структурой О-Аг и биохимическими свойствами известно 39 сероваров шигелл, которые разделяют на 4 вида: Shigella dysenteriae (серогруппа А), Shigella flexneri (серогруппа В), Shigella boydii (серогруппа С) и Shigella sonnei (серогруппа D). Род образуют прямые неподвижные палочки, хеморганотрофы, оксидазонегативные, каталазопозитивные. Оптимальная t˚ для культивирования составляет 37 ˚ С.

Классификация шигелл Подгруппы Виды и серотипы Подсеротипы A. Манитнегативные S. Dysenteria 1 -12 B. Манитпозитивные S. flexneri 1, 2, 3, 4, 5, 6, X variant Y variant C. Манитпозитивные S. Boydii, 1 -18 D. Ферментируют манит, медленно сахарозу и лактозу S. sonnei 1 a, 1 b, 2 a, 2 b, 3 a, 3 b, 4 a, 4 b

Морфология шигелл по Грамму

Рост S. Zonnei на среде Эндо

Патогенез заболевания Важнейшей особенностью шигелл, которая обусловливает их патогенность есть способность проникать в эпителий слизистой оболочки толстой кишки и размножаться в ней. Также она обусловлена факторами адгезии, инвазии, и стойкостью к действию защитных механизмов, а также способностью к токсинообразованию. Гены, которые кодируют комплекс вирулентности расположенные в хромосоме и плазмидах.

Микробиологическая диагностика • Материалом для исследований являются испражнения. Целью исследования является определение биохимических признаков и антигенной структуры возбудителя. • Сеют материал на среду Эндо и Плоскирева или на жидкие питательные среды накопления. После выделения чистых культур определяют их видовую принадлежность. • Определения антигенной структуры проводят по способности моно- и поливалентных антисывороток агглютинировать бактерии. • Для выявления Аг шигелл в крови, моче и испражнениях используют РЗК, ИФА, реакцию коагглютинации.

Особенности забора материала при подозрении на дизентерию: • Бактериологическое исследование по возможности нужно начинать до начала этиотропной терапии, забор проводят натощак; • Посуду для материала ошпаривают кипятком и ни в коем случае не обрабатывают дезрастворами; • Исследуемый материал быстро высевают на среду обогащения и параллельно на селективный агар.

Возбудитель холеры (Vibrio cholerae) • Холера - острая, карантинная, особо опасная инфекционная болезнь с фекально-оральным механизмом передачи, характеризуется обильным поносом, рвотой, сильной интоксикацией и обезвоживанием организма. • Холерный вибрион впервые описал итальянский ученый Ф. Пачини в 1854 г. , детально изучил его свойства и выделил в чистой культуре Р. Кох в 1883 г. , Ф. Готшлих в 1906 г. выделил из кишечника паломника вибрион Эль-Тор, который отличается от холерного гемолитическими свойствами, но также вызывает холеру.

Морфология и физиология. • V. cholerae, V. eltor имеют форму изогнутых (напоминают запятую) или прямых полиморфных палочек длиной 1, 5 -3 мкм, шириной 0, 3 -0, 6 мкм, спор и капсул не образуют, имеют один, полярно расположенный жгутик (монотрих), благодаря которому очень активно двигаются. В мазках из чистых культур располагаются поодиночно, а в свежих препаратах из фекалий больного имеют вид стаек рыб.

Vibrio cholerae: 1 -pure culture; 2 - flagellate

Vibrio cholerae

Vibrio cholerae (електронная микроскопия)

Мазок Vibrio cholerae (чистая культура)

Культуральные свойства • Холерные вибрионы - факультативные анаэробы, легко культивируются в аеробних условиях при 37 °С. К питательным средам нетребовательны, но требуют щелочной реакции (р. Н 8, 5 -9, 5). Очень хорошо и быстро растут в 1 % щелочной пептонной воде (ПВ), опережая рост других бактерий. Уже через 5 -6 год на ее поверхности возникает нежная пленка голубого цвета. На щелочном МПА через 10 -12 год образуют средних размеров гладкие и блестящие круглые прозрачные колонии с голубым оттенком и четко очерченным краем.

Колонии Vibrio cholerae на щелочном агаре

Колонии Vibrio cholerae на среде Аронсона

Антигенная структура • Холерные вибрионы имеют термостабильные специфические О-антигены и термолабильные жгутиковые Н-антигены. По О-антигену все вибрионы разделены на многие серогруппы О 1, О 2, О 3. . . О 80. Холерный вибрион относится до 01 серогруппе. В свою очередь 01 -антиген состоит из отдельных антигенных фракций А, В, С. Ризные комбинации их свойственные трем сероварам: Oгава (АВ), Инаба (АС) и Гикошима (АВС). Все три серовара аглютинируються 01 сывороткой. V. eltor принадлежит к серогруппе О 1. Кроме того, есть еще серогруппы RO и О 139.

Агглютинация О 1 холерной сывороткой Чувствительность к полимиксину В Лизис арабиноза A A – – + + + Vibrio cholerae biovar El Tor A A – + + + – Vibrio cholerae biovar Proteus A A – + – – – Vibrio cholerae biovar albensis А – – – Vibrio специфическим О 1 манноза фагом Гемолиз эритроцитов барана сахароза Vibrio cholerae biovar cholerae Ферментация через 24 ч.

Токсинообразование • Холерные вибрионы выделяют два типа токсинов: 1) белковый экзотоксин (холероген), который действует на энтероциты тонкого кишечника, вызывая энтерит с водянистыми испражнениями и обезвоживание организма; 2) эндотоксин - липополисахаридний комплекс, который освобождается только при разрушении вибрионов, он также принимает участие в механизме развития болезни. Токсигенные штаммы О 1, О 139 имеют ген холерного токсина (vct+) и вызывают холеру, склонную к широкому эпидемическому распространению

Патогенез холеры

Лабораторная диагностика • Основным и решающим в лабораторной диагностике холеры есть бактериологическое исследование. От больных берут испражнения, рвотные массы, кусочки загрязненного белья, от трупов - отрезки тонкого кишечника и желчный пузырь. Исследуют также пищевые продукты, воду, ил, рыб, лягушек и др. Широко практикуют прямокишечный забор. Стерильные ватный тампон или алюминиевую петлю вводят в прямую кишку на глубину 5 -10 см, забирают содержимое и вносят в флакон (пробирку) с 1 % щелочной ПВ.

• Микробиологические исследования проводят круглосуточно. В соответствии с инструкцией МОЗ Украины от 30. 05. 1997 г. они включают несколько этапов. • 1 -й этап - материал засевают в 10 -50 мл 1 % ПВ; применяют также экспресс-методы: иммунофлуоресцентный и РНГА. • 2 -й этап – посев со 1 -ой среды обогащения на ЩМПА (щелочной МПА) или селективные среды и у 5 мл 2 -ой среды обогащения. Пересев в жидкие и на плотные среды проводят с поверхности ПВ большой бактериологической петлей диаметром 5 мм • 3 -й этап – посев со 2 -ой среды обогащения на ЩМПА (или селективные среды) через 5 -6 ч. культивирования. • 4 -й этап - проводят отбор подозрительных колоний из плотных сред через 16 -24 год инкубации. • 5 -й этап - идентификация. • 6 -й этап - учитывают результаты идентификации и выдают окончательный ответ о выделенной культуре холерного вибриона соответствующей серогруппы: О 1, RO (Инаба, Огава, Гикошима) или О 139 с указанием гемолитической активности, чувствительности к антибиотикам.

Профилактика и лечение • Основным в профилактике холеры является раннее выявление больных и вибрионосителей, их госпитализация, выявление и обсервация всех контактных лиц. Необходимо провести профилактическую и заключительную дезинфекцию в очаге заболевания. Важное значение имеют карантинные мероприятия, включая охрану государственных границ от заноса инфекции. Локализацию и ликвидацию очага холеры проводят чрезвычайные противоэпидемические комиссии области, города, района. • Лица, которые были в тесном контакте с больными холерой, подлежат экстренной профилактике тетрациклином. С этой целью им дают по 0, 3 г препарата 3 раза в день на протяжении 4 суток. Проводится также широкая санитарно-просвитительная работа среди населения.

• Специфическая профилактика не проводится, поскольку все три типа вакцин (живая, убитая, холерогенанатоксин) оказались малоэффективными. • Лечат больных эритромицином, тетрациклином, метациклином, доксациклином или левомицетином на протяжении не меньше 5 дней. Восполняют дефицит жидкости в органирзме.