Визначення донормілу методом тонкошарової хроматографії Мала Академія Наук

Визначення донормілу методом тонкошарової хроматографії Мала Академія Наук Доповідач: Куценко О. Д. Науковий керівник: доц. Ткаченко В. Г.

Хронічне безсоння населення Землі 2 Мала Академія Наук

Мета роботи: 3 розробити чутливі методики ідентифікації донормілу за допомогою методу хроматографії в тонких шарах сорбенту (ТШХ). Мала Академія Наук

Для досягнення мети були поставлені наступні задачі: 4 ü Виявити препарати, які застосовуються разом з донормілом. ü Обрати препарати, які нагадують клінічну картину отруєння донормілом. ü Визначити найбільш чутливий проявник для ідентифікації препарата. ü Вивчити можливості використання ТШХ для виявлення донормілу в присутності інших лікарських препаратів. ü Обрати та запропонувати оптимальну систему розчинників. Мала Академія Наук

Наукова новизна одержаних результатів: 5 Вперше встановлено хроматографічну поведінку донормілу в умовах ТШХ-скринінгу органічних отрут та запропоновано доповнення з метою виявлення донормілу. Мала Академія Наук

Практичне значення одержаних результатів 6 Розроблені методики виявлення донормілу, можуть використовуватися в практиці судовохімічних досліджень для вирішення питань отруєнь донормілом, в клінічних лабораторіях з метою визначення донормілу в біологічних рідинах, а також у фармацевтичному та криміналістичному аналізі. Мала Академія Наук

Особистий внесок автора 7 Розроблено методичні підходи, згідно з якими підібрано методи виконання експериментальної частини. Особисто проведено огляд літератури, експериментальні дослідження, аналіз та систематизацію отриманих результатів, сформульовано висновки роботи. Мала Академія Наук

Об’єкт дослідження: лікарський препарат донорміл 8 Мала Академія Наук

9 Об’єкт дослідження Торгове найменування донорміл Міжнародне найменування доксиламін (Doxylamine) Діюча речовина доксиламін (Doxylamine) Мала Академія Наук

10 Доксиламіну сукцинат Порошок білого кольору або білого кольору з кремуватим відтінком. Таблетки білого кольору розчинні у воді. Мала Академія Наук

11 Разом з донормілом застосовуються переважно препарати на рослинній основі Мала Академія Наук

Токсичні ефекти препаратів Ефект 12 Препарати, які його проявляють нейротоксична дія: галюцинації, марення, страх або Атропін, Донорміл, Зопіклон, отупіння, втрата чутливості смаку, Димедрол слуху, зору, розширення зіниць психотропна, нейротоксична дія: міорелаксація, млявість, загальмованість, сонливість, розширення зіниць, гіперемія обличчя, сухість шкіри, тахікардія Феназепам, Атропін, Донорміл

13 Метаболізм доксиламіну сукцинат 60% Незмінний вигляд 25% N-десметилдоксиламін, N, N-дидесметилдоксиламін 8% O-глюкуроніди доксиламіна та його похідні 5% Некон'юговані метаболіти доксиламіна 2% Амонієві солі глюкуронової кислоти Мала Академія Наук

14 Ідентифікація доксиламіну Як видно з попереднього слайду близько 60 % препарату виводиться нирками у незмінному виді, тому ми вирішили ідентифікувати донорміл саме за доксиламіном, а не за продуктами метаболізму. Мала Академія Наук

Порівняльна характеристика методів, які застосовуються для ідентифікації донормілу 15 Використання Назва методу Час виконання, год дефіцитного обладнання та Чутливість, мкг Специфічність, так/ні реактивів, так/ні 1. Хромогенні реакції 0, 5 ні 0, 1 - 10, 0 ні 2. Іонометрія 1, 0 так ≈ 1, 0 так* 3. ТШХ 1, 0 ні ≤ 0, 1 так 1, 0 так ≤ 0, 1 так 2, 0 так < 0, 05 так 2, 0 так < 0, 01 так 3, 0 так < 0, 001 так 4. УФ спектрофотометрія 5. Газорідинна хроматографія 6. Високоефективна рідинна хроматографія 7. Імуноферментний метод аналізу

Результати проявлення плям донормілу Проявник 1) УФ-світло 2) витримують протягом 15 хв. в камері, насиченій парами кислоти хлористоводневої концентрованої, та проявляють в УФ-світлі 3) пари йоду 4) 1% розчин калію перманганату в 0, 25 М розчині кислоти сульфатної 5) 5% розчин феруму (ІІІ) хлориду 6) послідовно реактив Драгендорфа та кислота сульфатна 7) 50% розчин кислоти сульфатної в етанолі 8) послідовно 1, 6% розчин меркурію (ІІ) сульфату та 0, 2% розчин дифенілкарбазону в етанолі 9) 0, 5% розчин нінгідрину в суміші кислоти хлористоводневої розведеної та ацетону (1: 10) 16 Забарвлення / чутливість, мкг в пробі –– –– коричневе / 1, 0 –– –– червоно-коричневе / 0, 1 –– –– –– Мала Академія Наук

Результати реакцій донормілу з деякими реагентами Реагент Забарвлення / чутливість, мкг реактив Вагнера коричневе / 0, 1 реактив Бушарда коричневе / 0, 1 реактив Драгендорфа 17 жовтогаряче / 0, 1 реактив Драгендорфа, модифікований за Муньє жовтогаряче / 0, 1 реактив Маркі фіолетове / 1, 0 реактив Лібермана темно-жовте / 1, 0 Мала Академія Наук

18 Хроматографування Мала Академія Наук

19 Хроматограма доксиламіну лінія «фронту» лінія «старту» Мала Академія Наук

20 Системи розчинників № системи Склад системи 1 метанол – аміак (100: 1, 5) 2 хлороформ – метанол (90: 10) 3 хлороформ – гексан –етанол (1: 1: 1) 4 хлороформ – гексан – етанол (1: 2: 1) 5 хлороформ – метанол – кислота мурашина (50: 1); Мала Академія Наук

21 Хроматографічне дослідження (вибір системи розчинників) Система № Значення Rf (донормілу) в системі розчинників 1 0, 4 2 0, 1 3 0, 2 4 0, 3 5 0, 25 Мала Академія Наук

22 Значення Rf x 100 для донормілу та деяких інших препаратів у різних системах розчинників в різних тонких шарах Тонкі шари Препарат / Rf*100 Системи розчинників Донорміл Зопіклон Сорбфіл 1 40 10 2 10 3 Димедрол Феназепам Атропін 17 25 11 22 13 11 9 20 16 19 30 17 4 30 55 70 64 24 5 25 5 22 31 19 Силуфол 1 37 7 15 22 9 2 7 19 10 7 5 3 16 5 9 14 7 4 26 67 60 37 40 5 22 7 25 32 23 ВЕТСХ 1 35 12 14 33 21 2 5 7 16 12 6 3 13 7 12 22 11 4 23 54 27 59 16 5 15 4 19 27 16 Merck 1 44 15 23 27 17 2 13 27 19 16 10 3 22 20 23 34 21 4 34 59 74 63 29 5 27 9 17 27 18 Мала Академія Наук

23 Висновки 1. Виявлено препарати, які застосовуються разом з донормілом: Седасен, Трипсидан, Дорміплант, Новопасит, Персен, Нотта та Нейроплант. 2. Обрано препарати, які нагадують клінічну картину отруєння донормілом: Атропін, Феназепам, Зопіклон, Димедрол. 3. Найкращі результати щодо чутливості отримано для реакцій донормілу з реактивом Драгендорфа. 4. Знайдено систему розчинників для хроматографічного визначення донормілу. 5. Знайдені оптимальні умови для ідентифікації донормілу та деяких препаратів методом хроматографії у тонких шарах сорбенту. Мала Академія Наук

24