Вирусы гепатита В В ЛЕОНОВ 2013 Ханты-Мансийская государственная

Вирусы гепатита В. В. ЛЕОНОВ, 2013 Ханты-Мансийская государственная медицинская академия Кафедра биологии с курсом микробиологии ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Распространенность вирусных гепатитов www. biolit. com. ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Немного истории … • 1963 г – B. Blumberg обнаружил антиген вируса гепатита B (австралийский антиген) • 1970 г – D. Dane и соавт. описал австралийский антиген и сам вирион, получивший название частиц Дейна • 1971 г – J. Almedia и соавт. расшифровали структуру частиц Дейна • 1973 г – S. Feinstone и соавт. открыли вирус гепатита А • 1977 г– M. Rizzetto с сотрудниками в биоптатах печени методом иммунофлюоресценции обнаружили вирус гепатита D • 1983 г- М. С. Балаяном с сотр. описан вирус гепатита Е • 1993 г – молекулярно-биологическими методами идентифицирован вирус гепатита G фирма Genelabs (G. B. -инициалы хирурга, заболевшего гепатитом ни А ни В; при инфицировании его кровью обезьян в биоптатах печени была обнаружена нк вируса ) • 1997 г – T. Nishizawa и соавт. обнаружили фрагменты ДНК ранее неизвестного вируса TTV - ” transfusion transmitted virus “ ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Известные вирусы гепатита человека ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Вирусы гепатита человека ВГ Парентеральные Энтеральные Парентеральные и энтеральные НBV, HCV, HDV, HGV НAV, HEV TTV 10 -20% случаев гепатитов в мире, инфекционная природа которых очевидна, остаются этиологически не распознанными ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Лабораторная диагностика ВГ Экспресс-метод (I принцип диагностики) Обязательно определение активности Ас. Т и Ал. Т на начальных этапах диагностики ИФА, РНГА, РИА Кровь ПЦР Серологический метод (II принцип диагностики) Сыворотка крови больного ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии РНГА, ИФА, РИА Гепатиты

Специфическая профилактика НАV и HBV HАV ПАССИВНАЯ АКТИВНАЯ Генно-инженерная вакцина, субъединичная вакцина ГЕП-А-ин-ВАК, Россия ИСГ – иммунный сывороточный глобулин донорский HBV ПАССИВНАЯ АКТИВНАЯ НВIg (доноров) Титр АТ = 1 : 100000, ГЕПАТЕКТ Генно-инженерная вакцина, субъединичная плазменная вакцина

Приложение № 1 к приказу Минздрава России от 27. 06. 01. № 229 Национальный календарь профилактических прививок Возраст Новорожденные (в первые 12 часов жизни) Новорожденные (3 -7 дней) Наименование прививки Первая вакцинация против вирусного гепатита В Вакцинация против туберкулеза 1 месяц Вторая вакцинация против вирусного гепатита В 3 месяца 18 месяцев Первая вакцинация против дифтерии, коклюша, столбняка, полиомиелита Вторая вакцинация против дифтерии, коклюша, столбняка, полиомиелита Третья вакцинация против дифтерии, коклюша, столбняка, полиомиелита. Третья вакцинация против вирусного гепатита В. Вакцинация против кори, краснухи эпидемического паротита Первая вакцинация против дифтерии, коклюша, столбняка, полиомиелита 20 месяцев Вторая ревакцинация против полиомиелита 6 лет Ревакцинация против кори, краснухи, эпидемического паротита Ревакцинация против туберкулеза. Вторая ревакцинация против дифтерии, столбняка Вакцинация против краснухи (девочки). Вакцинация против вирусного гепатита В (ранее не привитые). Третья ревакцинация против дифтерии, столбняка. Ревакцинация против туберкулеза. Третья ревакцинация против полиомиелита. Ревакцинация против дифтерии, столбняка – каждые 10 лет от момента последней ревакцинации 4, 5 месяца 6 месяцев 12 месяцев 7 лет 13 лет 14 лет Взрослые

Известные вирусы гепатита человека ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Вирус гепатита A (ВГA, HAV) Семейство: Picornaviridae Род: Вид: ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Hepatovirus Вирус гепатита А (HAV) Гепатиты

Морфология VP 1 – адсорбция Рецептор – α 2 -макроглобулин гепатоцитов Все капсидные белки объединяют в понятие: «антиген вируса гепатита А» (анти-НАV). В природе существует один серотип НАV. ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Репродукция ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

3 стадия – «раздевание» + НИТЬ 2 стадия – проникновение - НИТЬ Репродукция VPg VP 1, VP 2, VP 3, VP 4 ро полипротеин Яд 1 стадия – адсорбция К РН я ма за и а ис ер в за лим К о РН п 4 стадия – биосинтез компонентов 5 стадия – сборка вириона 6 стадия – выход вирусных час

Патогенез 1. Входные ворота – пищеварительный тракт 2. Вирус локализуется в цитоплазме гепатоцитов 3. Апоптоз в гепатоцитах 4. Как правило, течение гепатита А благоприятное, а организм проводит адекватное уничтожение инфицированных гепатоцитов. Специфического лечения не существует ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Клинические проявления Инкубационный период 15 -45 дней. 1. Клиническое течение легкое. У большинства заболевших имеются лишь неспецифические симптомы: незначительное повышение температуры тела, слабость, головная боль, боль в животе, диарея. 2. У детей до 5 лет (80%) – асимптоматическое. У взрослых клинические признаки наблюдаются у 50 -80% инфицированных. 3. Молниеносные формы составляют от 0, 04 до 0, 1%, среди пожилых на фоне предшествующих хронических заболеваний печени. 4. Персистенция вируса не встречается. ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

География НАV ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Эпидемиология Источник инфекции – больные острой формой (главным образом, с бесжелтушными вариантами болезни) Механизм передачи – фекально-оральный, главный фактор передачи – вода. Стерилизация: автоклавирование (120 о. С) 20 мин. , сухой жар – 1 час. ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Лабораторная диагностика 1. Обнаружение HAAg в фекалиях 2. Определение анти-HAV Ig. M в сыворотке 3. Определение анти-HAV Ig. G в сыворотке Анти-НАV Ig. G Титр Ig. I/Ig. G Инкубационный период HAAg анти-HAV Ig. M анти-HAV Ig. G + + - Клинически выраженный гепатит - + + Реконвалесценция - Постинфекционный период - 0 ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии 1 2 +/Анти-НАV Ig. M + 3 4 5 + 6 месяцы Гепатиты

Вирус гепатита Е (ВГЕ, HЕV) Семейство: ? Род: ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Hepavirus Вид: Вирус гепатита E (HEV) Гепатиты

География НEV ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Вирус гепатита Е (ВГЕ, HЕV) Источник инфекции – только человек, возбудитель выделяется с испражнениями (энтеральная инфекция) Распространение HЕV ограничено странами жаркого и тропического поясов Основной путь передачи – водный Инкубационный период – 2 -9 недель Клиника напоминает гепатита А. Течение в основном доброкачественное и заканчивается самоизлечением. У беременных отмечают тяжёлые формы со смертельным исходом до 15 -20% (особенно при инфицированности в третьем триместре беременности). Персистенция НЕV не встречается. Постинфекционный иммунитет стойкий и пожизненный. ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Известные вирусы гепатита человека ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Вирус гепатита B (ВГB, HBV) Семейство: Род: Orthohepadnavirus Вид: ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Hepadnaviridae Вирус гепатита В (HBV) Гепатиты

Морфология 40 -45 нм ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Антигенная структура Название Локализация в Химическая вирионе природа Нахождение Иммуногенность мембрана гепатоцита, кровь + HBs суперкапсид гликопротеин + липид HBc капсид нуклеопротеин мембрана гепатоцита + HBe – протеин кровь + HBx Мало изучен. Вероятно имеет отношение к раковой трансформации гепатоцитов – Электронограмма НВV в крови ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Репродукция ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Эпидемиология Источник инфекции – больные и здоровые носители (5% человеческой популяции) Механизм передачи – парентеральное инфицирование (проникновение в кровь через повреждения кожи и слизистых) Способы передачи: 1. Контакт с заражённой кровью (достаточно парентерального попадания 0, 0001 мл HBs-Ag позитивной плазмы в организм здорового человека) 2. Половой контакт 3. Трансплацентарное заражение плода 4. Инфицирование в неонатальном периоде (кормление ребенка, через слюну) ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Распределение гепатита В по возрастным группам в РФ ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Патогенез Место первичной репликации неизвестно Гепатоциты (ч/з 2 нед. после инфицирования) репликация Экспрессия вирусных антигенов на мембране гепатоцитов Иммунологические реакции Осложнения 1. Цирроз печени 2. Карцинома печени ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Симптомы гепатита В у взрослых и детей ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Лабораторная диагностика Серологические маркеры Клиническое значение HBs. Ag - поверхностный антиген вируса Указывает на инфицированность вирусом Анти-HBs антитела Указывают на защиту от инфекции HBe. Ag - оболочечный антиген Указывает на репликацию вируса в гепатоцитах и высокую контагиозность крови Анти-HBe антитела Указывают на начало стадии реконвалесценции HBc. Ag – ядерный антиген Указывает на репликацию вируса в гепатоцитах. Обнаруживается только при исследовании биоптатов и при аутопсии. В крови в свободном состоянии не выявляется Анти-HBc антитела Важный диагностический маркер, особенно при отрицательных результатах выявления HBs. Ag HBV (частицы Дейна) Указывают на репликацию вируса, обнаруживаются с помощью электронной микроскопии ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии

Лабораторная диагностика Антигены Антитела Варианты клинического течения инфекции HBs. Ag HBe. Ag HBs. Ig HBc. Ig. G HBc. Ig. M + + – – + Острая фаза гепатита В + ± – + – Хронический гепатит В + – – Носительство HBV (персистенция) – – + + – Наличие гепатита В в прошлом – – – Отсутствие гепатита В в прошлом ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Терапия ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ используют интерфероны и индукторы ИФ. 1. Ламивудин, аденовир (нуклеозидные аналоги, мишень обратная транскриптаза) подавляет HBV-репликацию. 2. Рибавирин (нуклеозидный аналог) обладает широким спектром активности: ингибирование ДНК- и РНК-полимераз, подавляет кэпирование вирусспецифических м-РНК и др. ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии

Известные вирусы гепатита человека ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Вирус гепатита D (ВГD, HDV) НDAg НBs -РНК Семейство: Togaviridae Род: ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Deltavirus Вид: Вирус гепатита D (HDV) Гепатиты

Особенности репродукции HDV «заставляет» ДНК зависимые РНК полимеразы хозяина работать как РНК зависимые РНК полимеразы РНК HDV выполняет аутокаталитическую функцию, расщепляя мультимерный предшественник генома на фрагменты ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Эпидемиология Дельта-вирусный гепатит встречается только у HBVинфицированных Источник инфекции – больной острой или хронической формой инфекции, протекающей как манифестантно, так и субклинически. Наибольшее число инфицированных – среди наркоманов, больных гемофилией. Высокий риск заражения при половых контактах. Гепатит D – это острая коинфекция или суперинфекция (наслоение острого гепатита Д на хроническую HBVинфекцию). Возможны печеночная недостаточность, хронический активный гепатит, цирроз. Летальность при суперинфекции достигает 5 -20 %. Возможно формирование хронического гепатита. ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии

Лабораторная диагностика Серологические маркеры: антитела класса Ig. M к HDV указывают на репродукцию вируса в организме. Серологическая диагностика: Выявление антител класса Ig. M к HDV, указывающих на репродукцию вируса в организме с использованием ИФА. Молекулярно-генетические методы: Выявление генома вируса с использованием ПЦР и молекулярной гибридизации. ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии

Известные вирусы гепатита человека ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Вирус гепатита C (ВГC, HCV) ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Вирус гепатита C (ВГC, HCV) Семейство: Flaviviridae Род: Вид: ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Hepacivirus Вирус гепатита С (HCV) Гепатиты

Морфология Е 1(gp 31) и Е 2(gp 70) гликопротеины обеспечивают связывание вируса с клеткой и проникновение в нее. С(core) белок капсида участвует в сборке вируса, регуляции синтеза вирусной РНК, возможно, в подавлении генной транскрипции в ядре. ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Морфология NS 2 и NS 3 – вирусные протеазы NS 5 – РНК-полимераза UTR – последовательность ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Репродукция 1. 2. 3. 4. Адсорбция (рецепторы CD 81). Проникновение в клетку посредством эндоцитоза. Выход –РНК и синтез м-РНК. Синтез полипротеина (3011 аминокислот), который расщепляется на 3 структурных и 7 неструктурных белков. 5. Репликация вирусного генома. Процесс репликации протекает с большим количеством «ошибок» Образуется большое число разных генотипов и субтипов в последствии формирующихся в квазивиды вируса Наиболее изменчивы области кодирующие оболочечные белки Е 1 и Е 2 (антигенный дрейф). Это определяет длительную персистенцию вируса в организме. Наиболее стабильны нетранслируемые 5' и 3’- участки 5'NTR и 3'NTR. 6. Морфогенез вириона и выход из клетки. ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Антигенная вариабельность Особенность НСV – его генетическая неоднородность, которая соответствует высокой частоте спонтанных мутаций. 1. На основании различий нуклеотидных последовательностей области NS 5 выделяют 76 различных штаммов вируса. 2. По различиям нуклеотидных последовательностей в области ядра вируса выделяют 6 основных генотипов и около 100 субтипов. Течение болезни, ее исходы, эффективность лечения, а также диагностика и (в будущем) вакцинопрофилактика зависят от генотипа HCV. В России чаще всего регистрируются генотипы 1 а, 1 b, 2 а, 3 а. ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Эпидемиология Источник инфекции – больные острыми и хроническими формами, носители (3% человеческой популяции) Механизм передачи – парентеральное инфицирование Главный фактор передачи – кровь (группа риска – медицинские работники, больные гемофилией и на гемодиализе) Правило трех: Риск шприцевого заражения определяется следующими цифрами: HBV 30% : НСV 3% : ВИЧ 0, 3% НСV неодинаково распространен даже в пределах одной страны (0, 6% - Северные регионы, 3% - Южная Сибирь, Дальний Восток) ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Патогенез гепатита С обусловлен прямым цитотоксическим эффектом НСV и иммунопатологическими механизмами. Белок капсида обнаруживается в ядре и способен угнетать генную транскрипцию. НСV обладает тропизмом к гепатоцитам, лимфоцитам периферической крови, эпителиальным клеткам ЖКТ, клеткам нервной системы. Гликопротеин Е 2 связывается с рецептором клеток СD 81. Отсюда наличие внепеченочных резервуаров вируса. ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Патогенез Механизмы персистенции HCV: Антигенная гипервариабельность HCV-вирионы ассоциированы с ЛПНП и ЛПОНП НСV также, как и HВV подавляет способность клеток к апоптозу, что препятствует выведению вируса из организма. Антиинтерфероновая активность Репродукция вируса в лимфоидной ткани. ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Статистика заболевания НСV Инфицированные вирусом гепатита С 85% Персистирующая инфекция Болезнь протекает бессимптомно и большинство не подозревает о заболевании 30% Развивается серьезное хроническое поражение печени 1 -5% Смерть от цирроза или рака печени ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии

Патогенез Инкубационный период при HCV-инфекции составляет 12 недель. Клиническая картина острой инфекции отличается малой выраженностью симптомов (у 85 -90% - без желтухи). Переход в хроническую форму имеет место у 50 -75% больных острым гепатитом. У 20 -25% больных с хроническим гепатитом отмечено формирование цирроза печени (особенно при генотипе возбудителя 1 b и 1 a). Клиническая картина хронического гепатита характеризуется как патологией печени, так и разнообразными внепеченочными поражениями (у 40% больных). Внепеченочные проявления: • эндокринные (гипер- и гипотиреоз), • гематологические (криоглобулинемия), • кожные (мультиформная и узловатая эритема, крапивница), • суставные (артриты, артралгии), • почечные (гломерулонефрит), • аутоиммунные. ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Лечение и профилактика ЛЕЧЕНИЕ: интерфероны, индукторы интерферонов, химиопрепараты, иммуномодуляторы. Индукторы интерферона: ЦИКЛОФЕРОН, НЕОВИР, АМИКСИН. Индукторы интерферона и иммуномодуляторы: ГЕПОН, ПОЛИОКСИДОНИЙ, ТИМОГЕН. Эффект терапии зависит от генотипа вируса: у больных со 2 и 3 генотипом HCV – легко лечится, 1 генотип – трудно поддается лечению. ВАКЦИНЫ против HCV не разработаны, ведется поиск эффективных специфических иммуноглобулинов. ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Лабораторная диагностика Серологический метод: Обнаружение антител против НСV методом ИФА. Молекулярно-генетический метод: Выявление РНК НСV в ПЦР в режиме реального времени с определением величины вирусной нагрузки и отдельных генотипов этого вируса. Вспомогательное значение имеет обнаружение повышения активности аминотрансфераз в 5 -10 раз в крови заболевших Важную роль в диагностике хронического НСV играет гистологическое исследование биоптатов печени. ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Известные вирусы гепатита человека ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Вирус гепатита G (ВГG, HGV) Семейство: Flaviviridae Род: Hepacivirus Вид: Вирус гепатита G (HGV) ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Вирус гепатита G (ВГG, HGV) Дефектный вирус (по капсидным белкам) для своего капсида использует белки ещё не открытых вирусов или клеточные белки Вирус способен к персистенции, но редко ведет к хронической патологии - здоровое носительство ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты

Спасибо за внимание! (при подготовке презентации лекции использованы материалы проф. Чайниковой И. Н. зав. каф. микробиологии, вирусологии и иммунологии Ор. ГМА) ХМГМА кафедра биологии с курсом микробиологии Гепатиты