вирусологии и иммунологии Каз. НМУ Cтоматологический факультет

вирусологии и иммунологии Каз. НМУ Cтоматологический факультет Лекция 11 Роль кокковой микрофлоры в этиологии гнойно-воспалительных и инфекционно-аллергических заболеваний. Значение кокков в развитии микробных поражений зубов и слизистой оболочки полости рта.

КОККИ- шаровидной формы бактерии (стафилококки, стрептококки, сарцины, тетракокки, микрококки- по расположению после деления) -широко распространены в окр. среде -населяют тело человека -большинство сапрофиты , но есть патогенные и УП

ПАТОГЕННЫЕ И УП ДЕЛЯТСЯ НА 4 СЕМ: o MICROCOCCACEAE o -STREPTOCOCCACEAE o -NEISSERIACEAE o -PEPTOCOCCACEAE o САМАЯ ГЛАВНАЯ ОСОБЕННОСТЬ – способность вызывать гнойные процессы в виде самостоятельных инфекционных заболеваний, а также осложнения при соматических, хирургических болезнях.

o В зависимости от условий выращивания и тинкториальных свойств кокки делятся на 3 группы: o - Грам (+) факультативные анаэробы (стафилококк, стрептококк) o - Грам(-) аэробные и факультативно анаэробные (нейссерии - менингококк, гонококк) o -Грам (+) анаэробы (пептококки, пептострептококки)

КЛАССИФИКАЦИЯ СТАФИЛОКОККОВ: o Сем. - MICROCOCCACEAE o Род – STAPHYLOCOCCUS o Виды: S. AUREUS –распространен повсеместно и часто входит в состав нормальной микрофлоры человека (носители), колонизирует носовые ходы, брюшную полость и подмышечные области ). o Хр. носительство типично для мед. персонала, пациентов с атопическими дерматитами, наркоманов, больных сахарным диабетом, лиц на гемодиализе и т. д.

o S. EPIDERMIDIS –(колонизирует гладкую кожу и поверхность слизистых оболочек)- слабовирулентный, большинство инфекций - нозокомиальные ( у больных с пониженной резистентностью). o S. SAPROPHYTICUS -(колонизирует кожные покровы гениталий и слизистую оболочку уретры)-может вызывать циститы и дизурические расстройства у женщин, ведущих активную половую жизнь; реже пиелонефриты и эндокардиты.

o 14 из 27 видов обнаружены на коже и слизистых оболочках человека. o БИОВАРЫ: o А- человек o В- куры, свиньи o С- коровы, овцы o Д- зайцы o Е- собаки, лошади, o F- голуби, лисы

МОРФОЛОГИЯ стафилококков: o -КОККИ (ОДИНОЧНО, ПАРАМИ ИЛИ ГРОЗДЬЯМИ) o -НЕПОДВИЖНЫ o -ФАКУЛЬТАТИВНЫЕ АНАЭРОБЫ o -КАТАЛАЗОПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ, o -СОДЕРЖАТ ЦИТОХРОМЫ, НО ОБЫЧНО ОКСИДАЗООТРИЦАТЕЛЬНЫ o -СПОР НЕ ОБРАЗУЕТ o - S. AUREUS ОБРАЗУЕТ НЕЖНУЮ КАПСУЛУ

КУЛЬТИВИРОВАНИЕ стафилококков: o Растут на средах с 5 -10% Na. Сl o -температура 30 -37 о С o -р. Н 7, 2 -7, 4 o -на плотных средах: мутные, круглые ровные колонии блестящие или матовые с белым, кремовым, желтым или золотистым пигментом. o Цвет - наличие липохромного пигмента; его образование происходит только в присутствии кислорода, особенно на средах, содержащих кровь, углеводы, молоко. o -на жидких средах- интенсивное помутнение

ФЕРМЕНТАТИВНЫЕ СВОЙСТВА: o Вызывают характерное разжижение желатина в виде воронки (4 -5 сут) o - восстанавливают нитраты, образуют H 2 S o -разлагают глюкозу, ксилозу, сахарозу, мальтозу, глицерин, маннит с выделением кислоты o -уреазоположительны o -индол не образуют

ТЕСТЫ ВИДЫ СТАФИЛОКОККОВ S. sapro S. aureus S. epidermidis phyticus Каталаза + Оксидаза - Лецитиназа + - Коагулаза + - Гемолизин + - ДНК-аза + - Фосфатаза + - + Маннит: + - + Аэробно- + - Анаэробно- золотистый белый Пигмент белый желтый ДИФФЕРЕНЦИАЦИЯ СТАФИЛОКОККОВ

АНТИГЕНЫ СТАФИЛОКОККОВ (в клеточной стенке): o -ПЕПТИДОГЛИКАН o -ТЕЙХОЕВЫЕ КИСЛОТЫ (видоспецифический Аг): o рибиттейхоевые - S. aureus ; глицеринтейхоевые - S. epidermidis ; оба типа - S. saprophyticus. o -БЕЛОК А o -ТИПОСПЕЦИФИЧЕСКИЕ АГГЛЮТИНОГЕНЫ o -ХЛОПЬЕОБРАЗУЮЩИЙ ФАКТОР o -КАПСУЛЬНЫЙ АНТИГЕН

ПРОФИЛАКТИКА стафилококковых инфекций: o -санация бактерионосителей o -профилактика ВБИ o -выявление источников инфекции, устранение путей и факторов передачи

ФАКТОРЫ ПАТОГЕННОСТИ СТАФИЛОКОККОВ: o МИКРОКАПСУЛА (подавление взаимодействия с фагоцитами, способствует адгезии и распространению) o -КОМПОНЕНТЫ КЛЕТОЧНОЙ СТЕНКИ- пептидогликан, тейхоевые кислоты, белок А (стимулируют развитие воспалительных реакций, усиливают синтез ИЛ-1 макрофагами, активируют систему комплемента, являются мощными хемоаттрактантами для нейтрофилов). o Белок А (агглютиноген А) неспецифически связывает Fc - фрагменты молекул Ig. G (что активирует компоненты комплемента во классическому и альтернативному пути) и усиливает активность естественных киллеров.

o КАРАТИНОИДНЫЕ ПИГМЕНТЫ- инактивация бактерицидных форм кислорода o -УСТОЙЧИВОСТЬ к Na. CL, жирным кислотам - размножение в потовых и сальных железах o -ЭКЗОТОКСИНЫ : o - 4 гемолизина (альфа-, бета-, гамма-, дельта - токсины): o ГЕМОЛИЗИН ( -ТОКСИН) – порообразующий токсин; при введении животным –кожные некротические реакции и гибель при в/в. o ГЕМОЛИЗИН (СФИНГОМИЕЛИНАЗА) – оказывает умеренное действие на эритроциты- выраженные свойства холодового гемолиза (выраженный эффект при низких температурах)

o -ГЕМОЛИЗИН –двухкомпонентный, с умеренной активностью на эритроциты человека. Эффект гемолиза на средах обычно не проявляется, так как один из компонентов инактивирует полимеры, содержащие серу. o -ГЕМОЛИЗИН – проявляет детергентные свойства, которые обуславливают цитотоксичность широкого свойства

o 2. - лейкоцидин o (ингибирует всасывание воды и активирует образование ц. АМФ - диарея и цитотокическое действие на полиморфноядерные лейкоциты) o 3. - -ЭКСФОЛИАТИНЫ А и В – (отслоение эпидермиса) пузырчатка или « синдром ошпаренной кожи» у новорожденных (болезнь Риттера фон Риттерштайна) – заболевание начинается бурно; характерно формирование больших очагов эритемы на коже с образованием (ч/з 2 -3 сут) больших пузырей (как при термических ожогах) и обнажением мокнущих эрозированных участков.

o ЭНТЕРОТОКСИНЫ: o A, B, C, D, E, F- пищевые токсикоинфекции ( рвота , абдоминальные боли, водянистая диарея уже после 2 -6 часов после употребления инфицированной пищи - кремы, консервы, мясные и овощные салаты, молочные продукты). Через 24 часа могут исчезнуть и без лечения. o TSST -токсин синдрома токсического шока, связанный с менструациями (впервые с тампоном «Тампакс» , возможно развитие после родов, после хирургических операций (особенно на носовой полости и пазух носа).

Клиника: высок. температура, рвота, диарея, скарлатиноподобная сыпь на ладонях и подошвах, снижение АД, возможен летальный исход. С появлением тампоном с пониженными сорбирующими свойствами и без полиакриловых наполнителей частота случаев развития шока резко сократилась. В, С- синдром токсического шока, не связанный с менструациями

ФЕРМЕНТЫ ПАТОГЕННОСТИ: o плазмокоагулаза (коагулаза)-(фибриноген в фибрин) o -гиалуронидаза (разрушение соединительной ткани) o -фибринолизин o -дезкосирибонуклеаза (расщепление ДНК, разжижение гноя) o -протеиназа o -желатиназа o -каталаза (защищает микробы от О 2 -зависимых микробоцидных механизмов фагоцитоза) o - -лактамаза-(разрушает молекулы -лактамных А/Б) o -липаза- гидролиз липидов (облегчают адгезию и проникновение в ткани)

РЕЗИСТЕНТНОСТЬ: o -ХОРОШО ПЕРЕНОСЯТ ВЫСУШИВАНИЕ, СОХРАНЯЯ ВИРУЛЕНТНОСТЬ o -ПОГИБАЮТ ПРИ ПРЯМОМ ВОЗДЕЙСТВИИ СОЛНЕЧНОГО СВЕТА В ТЕЧЕНИИ 10 -12 ЧАС. o -ДОВОЛЬНО УСТОЙЧИВЫ К НАГРЕВАНИЮ (при темп 70 -80 о. С погибают ч/з 20 -30 мин, при 150 о С- 10 мин; сухой жар- 2 час) o -РЕЗИСТЕНТНЫ К ДЕЙСТВИЮ ЭТАНОЛА

ОСОБЕННОСТИ СТАФИЛОКОККОВЫХ ИНФЕКЦИЙ: o Увеличение числа заболевших o -Внутрибольничное распространение (роддом, детские стационары, хир. стац. ) o -Высокий процент носителей , в том числе среди мед. работников o -Полиантибиотикорезистентность o -Циркуляция в стационарах высоковирулентных штаммов o -Значительная устойчивость стафилококков во внешней среде

ОСНОВНЫЕ ИНФЕКЦИИ ЧЕЛОВЕКА , ВЫЗЫВАЕМЫЕ ПАТОГЕННЫМИ СТАФИЛОКОККАМИ: o кожные гнойничковые заболевания o -раневые инфекции o -эндокардиты o -пневмонии o -артриты o -остеомиелиты

перитониты -глазные инфекции, инфекции мочевыводящих путей, -синдром «ошпаренной кожи» (пузырчатка) -синдром тоскического шока -пищевые токсикоинфекции.

ИММУНИТЕТ o отличается слабой напряженностью и непродолжительностью (выработка антител, антитоксинов, прицепитинов, опсонинов, аглютининов). Играет роль фагоцитоз, особенно в очаге воспаления.

КЛАССИФИКАЦИЯ СТРЕПТОКОККОВ: o. По биохимическим свойствам. o. Сем. STREPTOCOCCACEAE o. Род STREPTOCOCCUS o. Виды: Str. pyogenes o Str. pneumoniae o Str. faecalis o Str. agalactiae

Str. anginosus Str. bovis Str. mutans Str. salivarius Str. sanguis Str. milleri

o По биохимическим свойствам. o Сем. STREPTOCOCCACEAE o Род STREPTOCOCCUS o Виды: Str. pyogenes o Str. pnеumoniae o Str. faecalis o Str. agalactiae

Str. anginosus Str. bovis Str. mutans Str. salivarius Str. sanguis Str. milleri

По классификации Ленсфильд (по антигенным свойствам ) o ДЕЛЯТСЯ НА 20 СЕРОГРУПП ОТ А ДО V o А- ( «убиквитарные» -встречающиеся везде, патогенны для человека (70 типов) - Str. pyogenes С- патогенны для человека и животных o В- УП o Д- непатогенны o Серогруппы состоят из сероваров: o М-белок, Т-белок, F-белок

АНТИГЕНЫ СТРЕПТОКОККОВ: o М-протеин o Т-протеин o С- протеин o Р- нуклеопротеид и др. o Типовые Аг- М, Т o Групповой Аг- С o Видовой Аг- Р o Из-за перекрестнореагирующих антигенов (ПРА) , (антитела к ним реагируют с мышечными волокнами миокарда, тканью почки и др) могут вызывать иммунопатологические состояния - ревматизм, гломерулонефрит и т. д.

ПО ГЕМОЛИТИЧЕСКИМ СВОЙСТВАМ: o -АЛЬФА-ГЕМОЛИТИЧЕСКИЕ стрептококки –неполный гемолиз o -БЕТА-ГЕМОЛИТИЧЕСКИЕ стрептококки – o полный гемолиз o -НЕГЕМОЛИТИЧЕСКИЕ

МОРФОЛОГИЯ СТРЕПТОКОККОВ: o грам(+) кокки (цепочки, попарно) o -неподвижны , кроме некоторых энтерококков , имеющих 1 -4 жгутика o -спор не имеют o -некоторые образуют капсулу (пневмококк)

КУЛЬТИВИРОВАНИЕ СТРЕПТОКОККОВ: o -факультативные анаэробы, отдельные - облигатные анаэробы o -требовательны к питательным средам (КА, сахарные среды) o -на поверхности твердых сред – мелкие колонии; o на жидких - придонный рост

ФЕРМЕНТАТИВНАЯ АКТИВНОСТЬ: o Ферментация углеводов нестабильна и не используется для дифференцировки и идентификации o -не образуют каталазы в отличии от стафилококка o -для дифференциации используют другие тесты

Виды Рост при 10% Чувствительност Гр. по Ленсфильд желчь Метиленовая синь+ молоко ь к оптохину 45 о. С 6, 5% р. Н 40% растворе гемолиз Nacl 9, 6 желчь рост + ние кровь S. pylgones А - - - - S. agalactiae В , - - - + + - - S. equsimilis С - - + - - S. faecakis Д , + + + - + - S, pneumoniae - зеле - - - + + S. salivarius + - - - + - - ня щие ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНЫЕ ПРИЗНАКИ СТРЕПТОКОККОВ

ФАКТОРЫ ПАТОГЕННОСТИ СТРЕПТОКОККОВ: o АДГЕЗИЯ (пили, фибриллярный слой) - за счет М- и F- белков, капсульных полисахаридов o -ТОКСИНЫ: o эритрогенный (скарлатинозный) o стрептолизины О и S o О-стрептолизин (кардиотоксин) нарушает мембраны клеток o S-стрептолизин ( гемолизин) продуцируется в среде, содержащей сыворотку, вызывает лизис Er, разрушает лизосомы, мембраны митохондрий клеток человека, при этом ферменты лизосом вызывают деструкцию тканей.

o лейкоцидин o цитотоксин (нефротоксин)-прямое действие на почечные клубочки o КАРДИОГЕПАТИЧЕСКИЙ ТОКСИН- поражение миокарда и образование гранулем в печени o ЭРИТРОГЕННЫЕ ТОКСИНЫ (ЭРИТРОГЕНИНЫ)-продуцируются лизогенными штаммами трех групп (А, В, С)- нарушение контактов между отдельными клетками и межклеточным в-вом, действие на гипоталамус (пирогенная активность), ГЗТ и ГЗНТ иммунокомплексного типа.

o -КАПСУЛА o -ФЕРМЕНТЫ ПАТОГЕННОСТИ: o Стрептокиназа (фибринолизин)- растворение фибрина o гиалуронидаза o фибринолизин o ДНК-аза o РНК-аза o АТФ- аза o Нейраминидаза

РЕЗИСТЕНТНОСТЬ: o -довольно устойчивы во внешней среде (воздухе) o -в гною, пыли сохраняются месяцами o -под действием дезинфектантов – погибают ч/з 15 -20 мин o -от кипячения -моментально

ЗАБОЛЕВАНИЯ СТРЕПТОКОККОВОЙ ЭТИОЛОГИИ: o А- S. pyogenes –скарлатина, ангина, рожа, ревматизм, отит, острый гломерулонефрит, фарингит, импетиго, пневмонию) o В-S. agalactiae- находятся на слизистых влагалища, но могут вызывать послеродовые осложнения: сепсис, менингит у новорожденных o Д- S. faecalis –перитонит, сепсис, эндокардит, цистит

o S. pneumoniae—пневмония, бронхит, сепсис, менингит o S. viridans (зеленящие) –находятся на слизистой ротовой полости, но могут вызывать ангины, отит, эндокардит, сепсис o -особая роль отводится токсинам, ферментам патогенности, которые оказывают специфическое действие o -большое значение имеет высокая степень аллергизации токсинами (рецидивам и повторным инфекциям)

o ИММУНИТЕТ – малонапряженный. o После скарлатины - стойкий. o Развивается аллергизация организма. o o ПРОФИЛАКТИКА: неспецифическая. o ЛЕЧЕНИЕ: этиотропное а/б

Грамотрицательные кокки (менингококки, гонококки) o К этой группе относят микроорганизмы семейства Neisseriaceae, рода Neisseria, включающего в себя 6 видов. Из них два – патогенных и 4 вида – непатогенных.

Классификация менингококков o Сем. Neisseriaceae o Род Neisseria o Вид – N. meningitidis o Менингит – воспаление мягких мозговых оболочек. o Морфология o Грамотрицательные, диплококки, бобовидная форма, имеют нежную капсулу. o Спор, жгутиков не имеют.

Культивирование: o Требовательны к питательным средам. Так как не утилизируют цельные белки в среды вводят аминокислоты, а в качестве источника ростовых факторов - сыворотку крови или кровь. Колонии – нежные, непрозрачные, бесцветные, вязкие, с блестящей поверхностью. o Колонии непатогенных нейссерий мельче, иногда имеют желтоватый пигмент.

Антигены o 1. Капсульный полисахарид. Делит менингококков на 9 сероваров. o А – дает эпидвспышки с интервалом в 20 -30 лет o В, С – спорадические случаи. o 2. Белковые АГ КС, Обозначаются цифрами.

Факторы патогенности менингококков o Капсула, защищающая от фагоцитоза o Пили, способность к АД o Эндотоксин o Ферменты патогенности – гиаларонидаза, нейраминидаза

Патогенез менингококковой инфекции o Источник инфекции – больной или носитель, путь передачи воздушно-капельный (тесный контакт). o Различают три клинические формы –назофарингит, менингит, менингококкемия. o Возбудитель локализуется на слизистых носоглотки, выделяет ферменты гиалуронидазу и нейраминидазу –назофарингит – кровь и лимфа – мозговые оболочки – менингит – бактериемия – o Гибель микробов – бактериальный или эндотоксический шок (поражение сосудов, нарушение свертывания крови, гипоксия, ацидоз).

Лабораторная диагностика o Исследуемый материал – спинномозговая жидкость, слизь из носоглотки, кровь. Т. к. менигококк может быстро погибнуть, материал должен быть доставлен в лабораторию не позднее двух часов с момента взятия.

Методы диагностики o 1. Бактериоскопический o Из осадка спинномозговой жидкости делают мазок, красят по Граму – диплококки, грамотрицательные и лейкоциты. o 2. Бактериологический –исследуемый материал засевают на плотные среды - КА, сывороточный агар, агар с ристомицином.

o Выделяют чистую культуру, идентифицируют ее, с помощью иммунных сывороток определяют серогруппу. o Кровь засевают во флаконы с 0, 1% сахарным бульоном. o 3. Серологический метод o Сыворотку больного и бактерионосителя исследуют в РНГА с менингококковым эритроцитарным диагностикумом.

Профилактика o Специфическая профилактика - Менингококковая химическая вакцина o Неспецифическая профилактика – выявление и лечение носителей. o Лечение o Пенициллин, ампициллин

Классификация гонококков o Сем. Neisseriaceae o Род Neisseria o Вид – N. gonorrhoeae o Гонорея – инфекционное заболевание, передающееся половым путем, характеризующееся воспалением слизистых оболочек мочеполовых путей. o Gone – семя, rhoia – истечение (Гален)

Морфология o Грамотрицательный диплококк, имеет пили, капсулу, полиморфен, в гною располагается внутри и вне лейкоцитов. o Имеются пили. o У больных, применявших АБ, гонококк может менять свою форму – размером от эритроцита до очень мелких пылевидных форм. o L-формы ( у 25% больных)

Культивирование o Требователен к питательным средам – нуждается в человеческих белках. Требует присутствия углекислоты в воздухе. o Асцитный агар, среда Стюарта o Мелкие, бесцветные, прозрачные колонии. o Непатогенные нейссерии растут на простом агаре o Б/х мало активен o Каталазо-, оксидазоактивен, расщепляет Гл

Иммунитет o Гонорея не оставляет после себя иммунитета. У больных может быть реинфекция, суперинфекция, редидив.

патогенез o Болеют только люди. Источник – больной или носитель. Путь передачи – половой. o Гонококк паразитирует на слизистых, покрытых цилиндрическим эпителием. (уретра, цервикальный канал, нижний отдел прямой кишки, конъюнктива). o После заражения гонококк прикрепляется к клеткам слизистой, через 3 -4 дня – соединительная ткань – воспаление. o От первичного очага воспаления лимфогенно гонококк попадает на заднюю уретру, яичники у женщин.

Вызываемые заболевания o Поражение верхних и нижних отделов мочеполового тракта, поражение глаз, суставов, глотки, заднего прохода и прямой кишки, гонококкемия, гонококковый эндокардит, кератоз, менингит, перитонит. o Атипичное, малосимптомное, бессимптомное течение болезни.

Лабораторная диагностика o Исследуемый материал o Отделяемое слизистой уретры, прямой кишки, выделения из шейки матки, влагалища.

o 1. Бактериоскопический метод – мазок, окраска по Граму и метиленовым синим. o В мазках – грамотр. диплококки, бобовидной формы, незавершенный фагоцитоз. o РИФ o 2. Бактериологический метод. o 3. Серологический метод – реакция Борде-Жангу (РСК) o Специфической профилактики нет. o Лечение o АБ o Для специфической иммунотерапии – гонококковая вакцина