ВИРУСНЫЕ ГЕПАТИТЫ С ПАРЕНТЕРАЛЬНЫМ МЕХАНИЗМОМ ПЕРЕДАЧИ ХРОНИЧЕСКИЕ ВИРУСНЫЕ

ВИРУСНЫЕ ГЕПАТИТЫ С ПАРЕНТЕРАЛЬНЫМ МЕХАНИЗМОМ ПЕРЕДАЧИ, ХРОНИЧЕСКИЕ ВИРУСНЫЕ ГЕПАТИТЫ ЖАВОРОНОК Сергей Владимирович Гомельский государственный медицинский институт

ВИРУСЫ ГЕПАТИТОВ и ВИРУСЫ, ПРЕТЕНДУЮЩИЕ НА ЭТУ РОЛЬ • ВИРУСЫ С ПАРЕНТЕРАЛЬНОЙ ПЕРЕДАЧЕЙ ГЕПАТИТА В ГЕПАТИТА D ГЕПАТИТА С ГЕПАТИТА G ( -A, B, C) TTV ( I – XVI) SEN (A, B, C, D, E, F, G, H) • ВИРУСЫ С ФЕКАЛЬНО- ОРАЛЬНОЙ ПЕРЕДАЧЕЙ ГЕПАТИТА А ГЕПАТИТА Е • ВИРУСЫ ГЕПАТИТОВ НИ А – НИ G

Заболеваемость гепатитом В и С в Российской Федерации в 1987 -2000 гг. (в показателях на 100 тыс. населения)

Этилогическая структура первичных гепатокарцином

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ГЕПАТИТА В • ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ НАБОРОВ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ HBs. Ag - 0, 5 -0, 1 нг/мл • СЛАБОПОЗИТИВНЫЙ КОНТРОЛЬ (1 нг/мл) в КАЖДОМ НАБОРЕ. • ВНЕДРЕНИЕ В СЛУЖБУ КРОВИ ДЕТЕКЦИИ ДНК HBV

Структурные элементы HCV Оболочка gp 70 (E 2) gp 31 (E 1) Клеточная мембрана Core (p 21) РНК

Организация HCV Генома Гипервариабельный регион Структурная Не структурная область 5’ NCR C E 1 Core белок E 2 NS 3 NS 4 металло-протеаза Оболочечные гликопротеины NS 5 A Неизвестно NS 5 B 3’ NCR Репликация Протеаза Хеликаза % нуклеотидной гомологии между изолятами 92 81 55 65 57 70 65 66 26

Острый гепатит С РНК ВГС ALT anti-core/NS 3 Ig. M anti-core anti-NS 4 6 3 дни недели 12 Острый гепатит 18 24 1 года 4 7 10 13

Хронический гепатит С РНК ВГС ALT anti-HCV-EIA // Ig. M 3 дни 6 недели 12 Острый гепатит 18 24 // 1 года Хронический гепатит 5 Хронический гепатит с малой активностью 10 Хронический гепатит с высокой активностью 15 20 Цирроз /ГКК

ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИ-HCV в ИФА

АЛГОРИТМ ОБСЛЕДОВАНИЯ ПАЦИЕНТОВ НА НАЛИЧИЕ HCV-ИНФЕКЦИИ ИФА на anti -HCV Цель-убрать эту линию Негативный результат ПОЗИТИВНЫЙ ИЛИ RIBA на НЕГАТИВНЫЙ anti-HCV НЕГАТИВНЫЙ СТОП НЕОПРЕДЕЛЕННЫЙ ИССЛЕДОВА НИЕ В динамике НЕГАТИВНЫЙ РЕЗУЛЬТАТ ПЦР и АЛТ СТОП ПОЗИТИВНЫЙ МЕДИЦИНСКОЕ НАБЛЮДЕНИЕ ПОЗИТИВНЫЙ РЕЗУЛЬТАТ ПЦР и АЛТ ПЦР на РНК HCV ПОЗИТИВНЫЙ СТОП

СХЕМА ВЫЯВЛЕНИЯ РНК ВГС в ПУЛАХ СЫВОРОТОК КРОВИ СОСТАВЛЕННЫХ ИЗ 336 ОБРАЗЦОВ ПРИ ПОМОЩИ ПЦР С ДИАГНОСТИЧЕСКИМ ПРЕПАРАТОМ КОМПАНИИ «ХОФФМАН ЛЯ РОШЬ» 6 9 1/1(6) 1 (24) 2 1+2 (48) 1+2+3+4+5 (96) 3 4 1 7 7 5 3/6 (6) 2 0 6 1/7 (6) 6 (24) 5+6 (48) 7 (24) 8 9 10 7+8 (48) 7+8+9+10 (96)

ПРИЧИНЫ ЛОЖНЫХ РЕАКЦИЙ ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ РНК-HCV В ПЦР • • • ЛОЖНООТРИЦАТЕЛЬНЫЕ РЕАКЦИИ потеря или разрушение РНК HCV в ходе подготовки к реакции клинического материала. наличие в образце ингибиторов ПЦР некомплементарность 3 области праймера с матрицей генома вследствии вариабельности РНК HCV несоблюдение режима хранения и транспортировки клинического материала ЛОЖНОПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ РЕАКЦИИ контаминации материала продуктами амплификации загрязнение отдельных образцов при проведении реакции

КАЧЕСТВЕННОЕ И КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ РНК HCV КАЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ РНК HCV УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ: - ВИЗУАЛЬНО ПО ЛИНИИ ПРИ ЭЛЕКТРОФОРЕЗЕ - ПО ВЕЛИЧЕНЕ OD ФЕРМЕНТАТИВНОЙ РЕАКЦИИ КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ РНК HCV • ПОРЯДКОВЫЕ ДАННЫЕ: ОЦЕНКА ОТ + ДО ++++ • РАЗВЕДЕНИЕ (ТИТР): ОТ 1: 10 ДО 1: 10. 000 • КОЛИЧЕСТВЕННЫЕ ДАННЫЕ: ГРАММ/ЭКВИВАЛЕНТ МЕЖДУНАРОДНЫЕ ЕДИНИЦЫ

Посттрансфузионный гепатит у японского пациента Т. Т. (по T. Nishizawa, 1997 г. )

Генотипы TTV • Идентифицировано – 16 генотипов ТТV ( TTV- I; TTV-II …. . TTV-XVI) • Четкой корреляции выявления генотипа и географического района не выявлено • Возможно множественное инфицирование несколькими генотипами TTV одновременно

Три поколения ПЦР-систем для выявления ДНК ТТV I-поколение: клон N 22 (T. Nishizawa, 1997) II-поколение: ORF I (H. Okamoto, 1998) III-поколение: НКО (M. Takahashi, 1999) Чувствительность систем

ЧАСТОТА ВЫЯВЛЕНИЯ ДНК HBV, РНК HCV, РНК HGV и ДНК TTV в СЫВОРОТКАХ КРОВИ ДОНОРОВ с НОРМАЛЬНЫМИ (n=68) и ПОВЫШЕННЫМИ (n=68)ПОКАЗАТЕЛЯМИ АКТИВНОСТИ АЛТ

НАПРАВЛЕНИЯ ДАЛЬНЕЙШИХ ИССЛЕДОВАНИЙ • ИЗУЧЕНИЕ СЕРОНЕГАТИВНОГО ГЕПАТИТА В • ПОЛНОЕ СЕКВЕНИРОВАНИЕ ДНК ВГВ и РНК ВГС РАЗЛИЧНЫХ ИЗОЛЯТОВ • ПОИСК НОВЫХ ВИРУСОВ ГЕПАТИТОВ “НИ А, НИ Е” • ВНЕДРЕНИЕ ПЦР в СЛУЖБУ КРОВИ • ПОИСК СЕРОЛОГИЧЕСКИХ МАРКЕРОВ РАЗГРАНИЧЕНИЯ ОСТРОГО и ХРОНИЧЕСКОГО ГЕПАТИТОВ С и В