Вирус гриппа
• Грипп – острое респираторное заболевание вирусной этиологии с явлениями общей интоксикации и поражением респираторного тракта. • В 1933 г. Смит, Эндрюс и Лейдлоу установили вирусную природу гриппа
Классификация • РНК-содержащие вирусы • Группа Myxoviruses • Семейство Orthomyxoviridae • Род Influenzavirus • Вид Grippus • Серотипы A, B и С • Подтипы и штаммы (только для Influenzavirus A) по гемагглютинину – 13 подтипов (Н 1 -16) по нейраминидазе – 10 (N 1 -10) Наибольшую эпидемическую опасность представляют вирусы гриппа А, вирус гриппа В вызывает локальные вспышки и эпидемии, вирус гриппа С – спорадические случаи гриппа.
МОРФОЛОГИЯ v. Вирион имеет сферическую форму, реже овальную или форму сперматозоида v 80 -120 нм в диаметре
• Содержит однонитевую «минус-РНК» , разделенную на 8 сегментов, каждый из которых кодирует один или два вирусных белка. • Все сегменты РНК упакованы в белок нуклеокапсида, и к каждому из сегментов присоединяется комплекс полимеразных белков (PB 1, PB 2, PA). Нуклеокапсид организован по типу спиральной симетрии.
• В таком виде сегменты упаковываются в липопротеидную оболочку, выстланную изнутри матриксным белком, на внешней поверхности которой экспонированы два антигена (шипа) – гемагглютинин (HA), нейраминидаза (NA) и М 2 белок. • Репликация ортомиксовирусов первично реализуется в цитоплазме инфицированной клетки; синтез вирусной РНК происходт в ядре
• Гемагглютинины (НА) распознают чувствительные клетки и прикрепляются к их поверхности. АТ к нему обеспечивают защитный эффект • Нейраминидаза (NА) отщепляет сиаловую (нейраминовую) кислоту, обеспечивая проникновение вируса в клетку и выход из нее размножившихся вирионов. • Семь сегментов вирусного генома кодируют структурные белки, восьмой – неструктурные белки NS 1 и NS 2, существующие только в инфицированных клетках. Основные из них – матриксный (М) и нуклеопротеидный (NP) белки. • Белок М (матриксный белок) – окружает нуклеокапсид, связывает его с суперкапсидом. Белок M 1 образует внутренний слой оболочки вириона • Белок M 2 – ионный канал, необходим для отделения нуклеокапсида от белка M 1 при проникновении в клетку, встроен в суперкапсид, иммуногенен • Белок NP выполняет регуляторные и структурные функции. Внутренние белки являются ферментами: Р 1 – транскриптаза, Р 2 – эндонуклеаза, Р 3 - репликаза
Антигенные свойства • • S-антиген ( «solution» растворимый) Внутренний Нуклеокапсид: РНК + белок 40% массы вириона Высокая стабильность Типовая специфичность Неинфекционный Неиммуногенный
Антигенные свойства • • V-антиген ( «viral» – вирусный) Поверхностный В наружной оболочке (суперкапсиде) Гемагглютинин + нейраминидаза Высокая вариабельность Подтипо- и штаммоспецифичность Инфекционный Иммуногенный
• Для вирусов гриппа специфическими рецепторами являются разнообразные сиалоолигосахариды. Кроме того, нейраминидаза препятствует агрегации новообразованных вирионов. • Антитела к HA и NA обладают протективными свойствами. • Серогруппы вируса гриппа имеют различную антигенную стабильность: наиболее изменчивы вирусы гриппа A, за ними следуют вирусы группы B и С. • Высокая антигенная лабильность вируса гриппа A обусловлена антигенным дрейфом и антигенным шифтом.
Электронная микрофотография вируса гриппа А Электронная микрофотография вируса гриппа С
Точечные мутации в сайтах вирусного генома, отвечающих за синтез и структуру антигенных детерминант Н и N ↓ Появление небольших изменений в структуре H и N ↓ Появление новых штаммов внутри одного подтипа Как правило такие изменения происходят каждый год. В результате возникают эпидемии , т. к. иммунитет против вируса гриппа «устаревает» .
Циркуляция вируса А в межэпидемический период в организме птиц/животных ↓ Реассортация (рекомбинация) вирусов гриппа птиц/животных и человека ↓ Грубые изменения в геноме вируса с полной заменой гена ↓ Появление новых H и N ↓ Появление новых подтипов
КУЛЬТИВИРОВАНИЕ • 5 -7 -дневный куриный эмбрион • Клеточные культуры (В первичной культуре клеток почек эмбриона человека, некоторых животных и в перевиваемых клетках) • Организмы новорожденных мышат и хомячков
РЕЗИСТЕНТНОСТЬ • Слабая устойчивость к действию физических и химических факторов • Разрушаются при комнатной температуре в течение нескольких часов • Быстро погибают при нагревании и высушивании • Погибают при воздействии хлора, озона, УФО • Устойчив к низким температурам • От -25°С до -70°С – несколько лет
Источник инфекции: больной человек, птицы. Пути передачи: воздушно- капельный, контактно-бытовой. Восприимчивый коллектив: любой человек без специфического иммунитета. Группы риска: дети, пожилые люди, больные с хроническими заболеваниями органов дыхания и ССС, лица с ослабленной резистентностью Больной становится заразным за 24 ч до появления основных симптомов и представляет эпидемическую опасность в течение 48 ч после их исчезновения. Грипп регистрируют повсеместно, рост заболеваемости наблюдается в холодные месяцы. Эпидемии гриппа развиваются с интервалом 2 -3 года
Грипп А • • Эпидемии каждые 2 -3 года Взрывной характер В течение 1 -1, 5 мес. заболевает 20 - 50% населения. Вирус гриппа А поражает как человека, так и животных. Ответственен за появление пандемий и тяжелых эпидемий Грипп В • • Эпидемии каждые 3 -6 лет Распространяются медленнее Длятся 2 -3 месяца Поражают не более 25% населения. Циркулируют только в человеческой популяции.
Грипп С • Не дает эпидемических вспышек • Заболевание носит спорадический характер. Инфицирует только человека. • Связано это с тем, что для него характерна меньшая изменчивость поверхностных белков, низкая репродукция в чувствительных системах, рецептордеструктирующая активность, связанная не с нейраминидазой, а с поверхностным гликопротеидом HEF (белок гемагглютининэстераза).
Патогенез Прикрепление гемагглютининов к рецепторам а 2, 6 эпителиальных клеток респираторного тракта и эритроцитов Разрушение нейраминидазой сиалосодержащих белков мембран клеток, формирование отверстий Проникновение вируса в клетку Слияние оболочки вируса с мембраной эндосомы, частичная депротеинизация вируса Нуклеокапсид выходит в цитоплазму, затем транспортируется в ядро клетки
Синтез и процессинг м. РНК транспортируется в цитоплазму, где кодирует синтез соответствующего белка на рибосомах В ядре идет репликация генома вируса, образуется минус-нить РНК для дочерних вирусов Сборка нуклеокапсида происходит в ядре, куда транспортируются синтезированные капсидные белки Гемагглютинин, нейраминидаза, М-белки встраиваются в мембрану клетки-хозяина, выходя из клетки путем почкования, вирусы покрываются оболочкой, уже содержащей НА-, NA- и Мбелки
Вирус, размножаясь в клетках цилиндрического эпителия, вызывает их дегенеративные изменения Разрушение естественного защитного барьера Вирусемия Токсическое действие продуктов распада клеток на органы и системы Подавление иммунитета Присоединение эндогенной бактериальной микрофлоры (пневмококки, стафилококки и др. ) Развитие вторичных бактериальных осложнений
v. Наиболее частое — острая пневмония v. Комбинированная инфекция (вирусная и бактериальная пневмония) v. Другие вторичные бактериальные инфекции (пневмококковая, гемофильная, стафилококковая) v. После гриппа часто наблюдаются обострения хронических заболеваний, таких как: бронхиальная астма и хронический бронхит, сердечно-сосудистые заболевания, нарушения обмена веществ, заболевания почек и др.
Эндогенная интоксикация продуктами распада Нарушение тонуса, эластичности, проницаемости сосудистой стенки Нарушение микроциркуляции Геморрагический синдром
Геморрагический синдром v. Носовые кровотечения v. Кровохарканья v. При тяжелом течении — кровоизлияния в вещество и оболочки головного мозга, в альвеолы, что проявляется синдромом инфекционно-токсической энцефалопатии или геморрагическим токсическим отеком легких
Клинические проявления Различают следующие клинические формы болезни: Типичный грипп Атипичный (афебрильный, акатаральный, молниеносный). Во время эпидемических вспышек грипп протекает более тяжело с преобладанием типичных форм заболевания. В межэпидемическое время чаще наблюдаются легкие и атипичные формы гриппа. • В зависимости от уровня интоксикации и выраженности катарального синдрома грипп может протекать в легкой, среднетяжелой, и очень тяжелой - молниеносной (гипертоксической) форме. • •
Легкая: температура тела может оставаться нормальной или повышаться не выше 38°С, симптомы инфекционного токсикоза слабо выражены или отсутствуют. Среднетяжелая: температура повышается до 38, 5 -39, 5°С и отмечаются классические симптомы заболевания: • Интоксикация: обильное потоотделение, слабость, светобоязнь, суставные и мышечные боли, головная боль; • Катаральные симптомы: гиперемия мягкого неба и задней стенки глотки, гиперемия конъюнктив; • Респираторные симптомы: поражение гортани и трахеи, сухой (в ряде случаев - влажный) болезненный кашель, нарушение фонации, боли за грудиной, ринит (насморк), гиперемия, цианотичность, сухость слизистой оболочки полости носа и глотки. • Абдоминальный синдром: боли в животе, редко - диарея. • Синдром сегментарного поражения легких - динамично нарастающая (в течение нескольких часов) легочно-сердечная недостаточность с типичной сегментарной тенью в одном из легких
Тяжелая форма гриппа температура тела поднимается до 40 -40, 5°С. В дополнение к симптомам, характерным для среднетяжелой формы гриппа появляются признаки энцефалопатии (психотические состояния, судорожные припадки, галлюцинации), сосудистые расстройства (носовые кровотечения, точечные геморрагии на мягком небе) и рвота. Гипертоксическая форма гриппа: возникает серьезная опасность летального исхода, особенно для больных из группы риска. Эта форма гриппа включает в себя (помимо вышеперечисленных): гипертермический синдром, энцефалопатию в сочетании с гемодинамическим расстройствами у детей (объединяют термином нейротоксикоз), отечный геморрагический синдром, дыхательную недостаточность, вплоть до отека легких (геморрагическая пневмония), а также отек мозга у отдельных больных.
. . 1. Метод обнаружения вируса гриппа с помощью флюоресцирующих антител в мазках из полости носа в первые дни болезни. Мазки обрабатывают специфическими гриппозными флюоресцирующими сыворотками. Образовавшийся комплекс антиген-антитело ярко светится в ядре и цитоплазме клеток цилиндрического эпителия и отчетливо виден в люминесцентном микроскопе. Ответ можно получить через 2 -3 ч. 2. РИФ (прямой и непрямой варианты); 3. ИФА. 4. Обнаружение в носовых смывах вирусную РНК с помощью ПЦР.
а) клеточные культуры (первичные культуры почечных клеток обезьян, человека и телят, He. La, KB, клетки сердца, кишечника и другие первичные диплоидные и гетероплоидные клетки к гриппу нечувствительны). б) куриный эмбрион в) организмы новорожденных мышат и хомячков
проводится через 3 -4 дня культура, зараженная вирусом эритроциты адсорбция на пораженных клетках учет с помощью световой микроскопии ВСЖ (в лунку планшета) эритроциты агглютинация осадок в виде ЗОНТИКА
инкубация Агглютинации нет Осадок ПУГОВКА ВСЖ Специфическая противогриппозная диагностическая сыворотка взвесь эритроцитов РТГА со специфическими противогриппозными диагностическими сыворотками
Исследуемый материал: парные сыворотки, взятые в острый период(до 5 го дня от начала болезни) и в период реконвалесценции (через 12 -14 дней) Используемые реакции: РСК и РТГА с гриппозными АГ Диагностическое значение: для ретроспективной диагностики гриппа; нарастание титра АТ в 4 раза и более
Специфическая профилактика Вакцинация. Существует 12 вакцин, содержащих антигены вирусов H 1 N 1, H 3 N 2 и В. — российского производства. Интраназальные. Не применяются. интраназальные или инъекционные. — гриппол (с иммуномодулятором полиоксидонием), аггрипак, ваксигрипп, инфлювак, флюорикс и др. Прививки против гриппа проводят в осенне-зимний период. Вакцинация в первую очередь необходима: а) лицам старше 65 лет; б) страдающим хроническими заболеваниями ССС и легких; в) людям, которые по роду деятельности подвержены высокому риску заражения (учителя, врачи)
В России производят следующие инактивированные гриппозные вакцины: вакцина гриппозная инактивированная элюатно центрифужная жидкая; вакцина гриппозная инактивированная жидкая центрифужная A/H 1 N 1/, A/H 3 N 2/ и B. При получении вакцины выращивают на 10 -11 дневных куриных эмбрионах, инактивируют формалином и ультрафиолетом, концентрируют и очищают методом ультрацентрифугирования.
Содержит только поверхностные антигены вируса гриппа (гемагглютинин и нейраминидазу) трех подтипов. Формирует специфический иммунитет против гриппа, а также повышает неспецифическую резистентность организма к другим инфекциям. Является расщепленной вирусной вакциной, т. е. содержит лишь поверхностные антигены вируса гриппа.
Содержит антитела против вируса гриппа
Интерферон лейкоцитарный человеческий Представляет собой группу белков, синтезируемых лейкоцитами донорской
ЛЕЧЕНИЕ ГРИППА • Этиотропные (противовирусные) средства • Патогенетические средства • Симптоматические
• Противовирусная Ремантадин: блокирование ионных каналов М-2 вируса гриппа А => нарушение способности проникать в клетки и высвобождать рибонуклеопротеид; эффективен в первые сутки Озельтамивир (тамифлю): ингибирование нейраминидазы вирусов гриппа А и В, H 1 N 1 Занамивир (реленца): структурный аналог
• Симптоматическая и патогенетическая Комфортные условия (постельный режим, обильное горячее питье и т. д. ) Уменьшение головной и мышечной боли (антигриппин, аспирин UPSA, колдрекс и т. д. ) Жаропонижающие средства при температуре тела выше 39 С у взрослых и 38 С – у детей Назначение комплекса витаминов ( «Ревит» , «Гексавит» , рутин (до 150300 мг/сут), аскорбиновая кислота (до 600 -800 мг/сут)) Влажные теплые ингалации, содержащие соду и бронходилататоры (эуфиллин, эфедрин)
Показания: üПожилым людям üЛюдям с повышенным АД • Зеленый чай • Варенье или сок черноплодной рябины • Грейпфруты • Аскорутин
Показания: • Температура тела у взрослых выше 38, 5°С • Температура тела у детей и пожилых лиц выше 38°С