Вирус гепатита B Классификация Семейство Hepadnaviridae

Вирус гепатита B

Классификация Семейство – Hepadnaviridae Род - Orthohepadnavirus

Морфология Вирионы гепатита В (частицы Дейна) сферической формы с диаметром 42— 45 нм. Они состоят из сердцевины диаметром 27 нм, содержащей вирусную двунитчатую кольцевую ДНК, окруженную мембраной толщиной 2 нм; сердцевина окружена внешней липопротеидной оболочкой толщиной 7 нм

Наряду с полноценными вирионами встречаются частицы, состоящие лишь из фрагментов наружной оболочки. Сферические d = 16— 25 дм Нитевидные d = 10— 20 нм длина до 700 нм. агрегаты сферических частиц Частицы содержат поверхностный антиген вируса — HBs-антиген и накапливаются в результате избыточной продукции поверхностного компонента частиц Дейна. Частицы HBs антигена не обладают инфекционной активностью, однако, они являются маркером на возможное присутствие частиц Дейна в исследуемом материале.

Химический состав и физикохимические свойства. Вирионы, кроме ДНК, содержат белки, включая гликопро-теиды, липиды, углеводы (в составе гликопротеидов). Частицы HBs-антигена являются липопротеидами. Плавучая плотность вирионов в хлориде цезия 1, 24— 1, 26 г/см 3, плотность сердцевины 1, 37— 1, 36 г/см 3, плотность частиц HBsантигена 1, 20— 1, 22 г/см 3.

Геном вируса гепатита В является уникальной структурой, представляющей двунитчатую кольцевую ДНК с однонитчатым участком. «Минус-нить» полная, с короткими перекрывающимися участками на 5'-концах. «Плюснить» неполная, ее З'-конец имеет разную длину, разрыв достигает 30 — 40% длины ДНК. Дефект заполняется in vivo и in vitro благодаря активности вирусной эндогенной ДНК-полимеразы. Молекулярная масса ДНК 2, 1 • 106. ДНК имеет длину 1, 06 мкм и содержит 3150 пар нуклеотидов.

Антигены Антигенные детерминанты оболочки вируса гепатита В – НВs. Ag; антигенные детерминанты сердцевины НВc. Ag, HBe. Ag.

HBs. Ag - поверхностный антиген Антиген наружной оболочки ВГВ. Ранее HBs. Ag был известен как "австралийский антиген". HBs. Ag обладает повышенной устойчивостью к физикохимическим воздействиям. Он не разрушается при прогревании в течение 21 часа при 60 о. С; многократном замораживании и оттаивании; обработке 1 -2% хлорамином, 0, 1% формалином. Потеря антигенной активности наблюдается лишь в случае прогревания при 85 о. С в течение часа, при 100 о. С - в течение 5 минут. Вирус гепатита В обладает способностью встраиваться в геном печеночных клеток. При этом гепатоцит начинает интенсивно продуцировать HBs. Ag способен активизировать клеточные протоонкогены.

Антиген «e» , HBc. Ag HBe. Ag появляется в сыворотке крови в преджелтушный период. Его обнаружение указывает на размножение вирусных частиц и свидетельствует об активном процессе. Этот антиген циркулирует только в присутствии HBs. Ag (у 5% зараженных мутантной формой вируса HBe. Ag присутствует без HBs. Ag, что является прогностически неблагоприятным признаком). HBc. Ag выявляется в ядрах пораженных гепатоцитов гистохимическими методами при биопсии печени. В сывороке, плазме крови HBc. Ag в свободном виде не определяется.

Устойчивость к физическим и химическим факторам. Чувствительны к эфиру и детергентам; устойчивость к высокой температуре: они выдерживают нагревание до 100° С в течение 1— 2 мин, при этом устойчивость к температуре повышается, если они находятся в сыворотке крови. После 10 -минутного кипячения инфекционная активность вируса утрачивается, но антигенность сохраняется. Антигенность сохраняется при низких значениях р. Н(2, 4). Инфекционная активность и антигенность не утрачиваются при ультрафиолетовом облучении плазмы крови, хранении при температуре — 20° С в течение многих лет, повторном замораживании и оттаивании.

Репродукция. Вирус гепатита В не культивируется в лабораторных условиях, что является препятствием для его накопления и изучения. Единственным восприимчивым животным является обезьяна шимпанзе. Получены перевиваемые культуры первичного рака печени, в которых геном вируса находится в интегрированном состоянии; культуры продуцируют HBs-антиген.

Эпидемиология Источником заражения - больной на всех этапах острого инфекционного процесса, носители HBs. Ag. Пути передачи - парентеральный, половой, трансплацентарный. Заражение ребенка может произойти прохождении через родовой канал или при грудном вскармливании. Все секреты, которые образуются у больного, являются потенциально заразными.

Группа высокого риска инфицирования гепатитом В • хронические больные, подвергающиеся частым парентеральным манипуляциям (диабет, ХПН, болезни крови и т. д. ); • медицинский персонал службы крови, отделение гемодиализа, хирурги, • стоматологи, лабораторные работники; • новорожденные от матерей-носителей ВГВ; • члены семей носителей ВГВ;

Ежегодно в мире регистрируется около 50 млн. больных только с острой ВГВ-инфекцией. Из них до 600 тыс. больных гепатитом В умирает.

Патогенез и клиника Определяются возможностью протекания заболевания в виде продуктивной и интегративной инфекции. Вирус попадает в кровь парентеральным путем и с током крови транспортируется в печень. Заболевание развивается после продолжительного (3— 6 мес) инкубационного периода и сопровождается симптомами, связанными с поражением и гибелью гепатоцитов. Цитолиз осуществляется иммунокомпетентными клетками, распознающими вирусные антигены на клеточной поверхности. Гибель гепатоцитов обусловливает выход из них вируса и повторную волну вирусемии, приводящую к вторичной генерализации инфекции. Заболевание протекает тяжело, с высокой летальностью в результате острой дистрофии печени и имеет тенденцию к переходу в хроническую форму (в 6— 15% случаев). Хронический гепатит является одним из факторов, приводящих к первичному раку печени.

При интегративной инфекции цитолиз гепатоцитов не наступает и клетки длительное время продуцируют HBs-антиген, который секретируется в плазму крови. Носительство HBs-антигена может возникнуть и в результате перенесенной инаппарантной (бессимптомной) инфекции, и может продолжаться многие годы и даже пожизненно.

Лабораторная диагностика Материал для исследований - кровь больного. Для ранней диагностики широко используют биохимические показатели сыворотки больных, отражающие функциональное состояние печени. Специфическими тестами для индикации HBs-антигена в сыворотках больных: • диагностические методы первого поколения - метод иммунодиффузии в агаре и встречный иммуноэлектрофорез, • второго поколения - РОПГА, Наиболее чувствительны • третьего поколения - Иф. А и РИА.

Маркеры вирусного гепатита В в стадии развития инфекции.

HBs-антиген выявляется через 1— 4 нед после заражения и за несколько недель до повышения уровня ферментов в сыворотке, которое опережает развитие клинических симптомов заболевания на 1— 2 нед. Максимальный уровень HBs-антигена - в разгар заболевания; в последующие 3 месяца его количество либо снижается, либо циркуляция HBs-антигена продолжается. Если количество HBs-антигена в динамике не изменяется, то это свидетельствует о бессимптомном носительстве.

Анти-НВе-антитела можно обнаружить через 1— 3 мес после исчезновения HBs -антигена, они присутствуют в крови в течение 3— 4 лет. Они имеют особую диагностическую ценность, поскольку в течение 1— 2 мес заболевания могут быть серологическим маркером. НВеантиген обнаруживается в крови в инкубационном периоде, вскоре после появление HBs-антигена, и снижается при появлении желтухи

Диагноз Основан на обнаружении HBs- и НВе-антигенов, анти. НВс- и анти-НВе-антител классов Ig. M и Ig. G. Вначале кровь повторно обследуется на HBs-антиген. При его отсутствии (что случается примерно в 10% случаев) сыворотки исследуют на наличие анти-НВс и анти. НВе. Присутствие анти-НВс-антител класса Ig. M достоверно свидетельствует об остром гепатите В. Высокие и стабильные титры анти-НВс свидетельствуют о наличии хронического процесса. Антитела к HBs- и НВе-антигенам выявляются с помощью методов ВИЭФ, РИГА, ИФА и РИА.

Экспресс тест Иммунохроматографический экспресс-тест, определяющий наличие антигена вируса гепатита В (HBs. Ag) , — надежное и безопасное средство, способное за 10 -15 минут диагностировать наличие или отсутствие заболевания. Материал для исследования - кровь из пальца руки. В случае определения заболевания на индикаторе теста появляется 2 фиолетовые полоски. Отрицательный результат — одна полоска в контрольной зоне. Одна полоска в тестовой зоне или их полное отсутствие говорит о том, что анализ необходимо сделать повторно и с новым индикатором.

Профилактика. Неспецифическая: предупреждение заражения при парентеральных процедурах. С этой целью устраивают центральные стерилизационные для шприцев и игл, применяют шприцы и иглы одноразового пользования, используют безыгольные инъекторы для массовых прививок и т. п. Важнейшим противоэпидемическим мероприятием является отстранение носителей HBs-антигена от донорства. В нашей стране имеется около 3 млн. носителей HBsантигена, а по оценке ВОЗ во всем мире их больше 200 млн.

Специфическая: экспериментальные и производственные серии убитой вакцины из HBs-антигена, полученного из плазмы носителей. Массовое производство вакцины осложняется необходимостью использования для ее контроля дорогостоящих пород обезьян — шимпанзе.

В настоящее время осуществляется профилактика с использованием рекомбинантных вакцин ("Энжерикс В", "Рекомбивакс В" и др. ), полученных методами генной инженерии на культурах дрожжей Saccharomyces cerevisae. Рекомбинантный клон дрожжей вырабатывает поверхностный антиген HBV. Эффективность - 95% , продолжительность - не менее 5 - 6 лет. Предусмотрена трехкратная иммунизация сразу после рождения, через 1 - 2 месяца, до конца первого года жизни ребенка. Для экстренной профилактики контактным может применяться донорский иммуноглобулин, содержащий антитела к HBV

Лечение Направлено на создание условий для ликвидации воспаления в поврежденных вирусом клетках печени и активации репаративных процессов. Исключаются физические нагрузки, назначается диета, запрещается употребление алкоголя и гепатотоксических лекарств. Используются препараты альфа-интерферона, различные гепатопротекторы, противовирусные средства.

Вирус гепатита D

Классификация Новейшие данные по молекулярной биологии HDV подтверждают его место среди так называемых «сателлитов» (спутников) — в семействе (family) субвирусных агентов. HDV — единственный известный представитель семейства сателлитов, заражающий ряд видов животных и человека.

Морфология Частица вируса имеет сферическую форму диаметром около 36 нм. Ее сердцевина содержит РНК и внутренний белок (Dантиген), представляющий собой единственный вирусоспецифический продукт генома дельтавируса. Внешняя оболочка последнего содержит HBs-антиген.

Геном Однонитевая циркулярная молекула РНК (примерно 1700 нуклеотидов)

Репродукция Вирус дефектен. Это проявляется в неспособности к самостоятельной репликации в гепатоцитах хозяина. Для репродукции данного вируса необходимо участие вируса- «помощника» , роль которого играет вирус гепатита В (HBV). Репродукция осуществляется за счет покровных белков, кодируемых HBV. Облигатная связь обоих вирусов определяет возможность возникновения инфекции, которая проявляется либо при одновременном заражении этими вирусами, либо при суперинфицировании дельта-вирусом больного гепатитом В.

Эпидемиология Антропонозная инфекция Источник - больные острой или хронической инфекцией дельта. Заболеть может человек любого возраста, не имеющий антител против HBs. Ag. Механизм передачи — контактный. Пути передачи – половой трансплацентарный парентеральный Доказано наличие семейных очагов дельтаинфекции. При этом распространение вируса происходит при перкутанных бытовых (микротравмы) и сексуальных контактах.

Распространенность

Патогенез и клиника Механизм повреждающего действия дельта-вируса на гепатоциты связан с прямым цитопатическим действием в отличие от HBV. При этом сочетанное действие обоих вирусов приводит к развитию более тяжелых форм патологического процесса. Дельта-инфекция существует в нескольких формах, отличающихся по клинике, частоте, исходам. Вирус может вызывать как состояния, неотличимые от острого вирусного гепатита (ОВГ), так и типичные формы хронического гепатита (ХГ) и цирроза печени (ЦП). Имеются указания и на возможность бессимптомного носительства HDV.

Особенностью гепатита D является «циррозогенность» : цирроз печени развивается в более ранние сроки, чем при HBV. Дельта-инфекция длительное время (5— 6 лет и более) протекает как чрезвычайно активный процесс и характеризуется частым развитием цирроза печени: у 60 -80% взрослых больных и у более чем 40% детей.

Диагностика Выявление дельта-антигена может быть проведено в ткани печени при помощи различных вариантов иммунофлюоресцентного и иммуно-пероксидазного методов. Учитывая, что в ходе инфекции HDAg в сыворотке может быть выявлен лишь в течение ограниченного времени, методы его прямого обнаружения в клинике применяются редко. Для этой цели при помощи детергентов разрушается наружная оболочка HDV с последующим обнаружением HDAg в твердофазном варианте иммуноферментного анализа.

Для выявления антител к HDAg (анти. HDV) классов Ig. G и Ig. M разработаны диагностические препараты для иммуноферментного и радиоиммунного анализа. Схемы проведения реакции для выявления этих серологических маркеров аналогичны тест-системам выявления анти-НВс классов Ig. G и Ig. M.

Для постановки диагноза гепатита D и суждения о вирусной репликации применяют методы обнаружения РНК HDV, основным из которых является полимеразная цепная реакция.

Постановка лабораторного диагноза гепатита D возможна только на основе данных выявления дельта-антигена, анти-HDV классов Ig. G и Ig. M и РНК HDV. При оценке результатов выявления Ig. G и Ig. M анти-HDV важно учитывать не только их присутствие, но и концентрацию. Обычно при HDV концентрация этих антител находится на более высоком уровне по сравнению с другими формами дельта-гепатита.

Профилактика Неспецифическая: профилактика вируcа гепатиты B. Специфическая: конкретно для гепатита D не разработана, вакцинация против гепатита В - основное мероприятие профилактики гепатита Д.

Спасибо за внимание!