VIRUS DE LA INMUNODEFICIENCIA HUMANA VIH Bioq Gerardo

VIRUS DE LA INMUNODEFICIENCIA HUMANA VIH Bioq. Gerardo Ford Servicio de Inmunología- Virología. Hospital “Dr. Julio C. Perrando” Cátedra de Virología Clínica UNNE AÑO 2013

Familia Retroviridae n Subfamilia Lentivirinae n Partícula esférica de 100 – 110 nm n Envoltura de doble capa lipídica n Posee 2 cadenas de ARN monocatenario. n

CICLO REPLICATIVO n n n ADSORCIÓN y FUSIÓN (Mediada por gp 120 y gp 41) RETROTRANSCRIPCIÓN (Transcriptasa reversa) INTEGRACIÓN (Integrasa viral) TRANSCRIPCIÓN (Activación celular) TRADUCCIÓN ENSAMBLAJE

TRANSMISION El riesgo de contagio de un paciente que se encuentra en la fase aguda (primeros 6 meses luego del contagio) o en el período de SIDA, parece ser mucho mayor que aquellos que tienen la enfermedad establecida y esta directamente relacionada con la carga viral (> 1500 copias de RNA/ml) del caso índice. Vías principales: 1. Contacto sexual 2. Vertical 3. Transfusión de hemoderivados

FISIOPATOGENIA n n 1. 2. 3. El virus infecta a los LTh (CXCR 4), macrófagos (CCR 5) y células presentadoras de antígeno (CD 4) La infección puede dividirse en tres etapas: Primoinfección Período asintomático Período sintomático

PRIMOINFECCIÓN n n Luego de la transmisión el virus replica en la mucosa, la submucosa y es drenado a los tejidos linfoides cercanos al sitio de entrada. En este período no puede ser detectado en el plasma, esta fase puede durar de 7 -21 días y es llamada comúnmente “fase de eclipse”. Provoca una respuesta inmune común a otros virus, dependiendo de las características inmunitarias del individuo infectado (ningún síntoma, linfoadenopatía generalizada persistente o enfermedad aguda)

PERÍODO ASINTOMÁTICO n n n Las células T CD 4(+) decrecen lenta y paulatinamente. Se identifican anticuerpos séricos (principalmente de clase Ig. G, con ausencia de anti Ig. M) contra las proteínas virales. La presencia de complejos circulantes Ig. Gvirus, favorece la infección a macrófagos por fagocitosis mediada por el receptor Fc. (Anticuerpos facilitadores)

SINDROME DE INMUNODEFICIENCIA HUMANA ADQUIRIDA (SIDA) Es el conjunto de signos y síntomas de inmunodeficiencia secundaria que caracterizan al estadio final de la infección por el virus del HIV: n n n INFECCIONES OPORTUNISTAS REACTIVACIÓN DE INFECCIONES LATENTES NEOPLASIAS Disminución del recuento de LT CD 4+ en sangre periférica Aumento de la viremia; con progresión hacia la muerte.

EPIDEMIOLOGÍA n n n En el mundo 40 millones de prs. viven con el virus del SIDA (2011) 1, 6 millones en América Latina (2007) 110. 000 infectados en la Argentina (2012) 40% de ellos desconoce su condición. Se diagnostican anualmente alrededor de 5. 500 nuevos casos 90% de las nuevas infecciones se deben a relaciones sexuales desprotegidas. Ministerio de Salud de la Nación n 1481 casos diagnosticados en la provincia del Chaco desde el año 1985. Servicio de Inmunología “Hospital Perrando”

Boletín sobre VIH-SIDA N° 29. Diciembre 2012. Ministerio de Salud de la Nación Argentina

METODOLOGIA DIAGNOSTICA n 1. 2. 3. n 1. 2. Metodos Directos (Detección del Ag): Biología molecular (PCR y Carga Viral) Ag p 24 Cultivo celular Métodos Indirectos (Detección de Ac): Serología Método complementario

BIOLOGIA MOLECULAR En casos de hipogammaglobulinemia, infección perinatal, infección silente o infección por variantes del virus que pueden escapar a la detección con las técnicas habituales serológicas. Técnicas utilizadas: n PCR n Carga Viral

SEROLOGIA n n n MEIA (Ag/Ac) ELISA (Ag/Ac) AGLUTINACIÓN DE PARTICULAS (Ac) ELECTROQUIMIOLUMINISCENCIA (Ag/Ac) INMUNOCROMATOGRAFÍA (Ac)

ELISA DE 4º GENERACIÓN Detectan tanto los anticuerpos generados contra el virus como así también las partículas virales (Ag p 24) que se puedan encontrar en la muestra. n Reducen el período de ventana, comprendido entre la aparición de ARN en el plasma y la detección de los anticuerpos, de 5, 4 – 22, 5 días (4 días antes de lo detectado por los ELISAS DE 3º GENERACIÓN). n

METODO COMPLEMENTARIO WESTERN BLOT

ALGORITMO DIAGNÓSTICO LABORATORIO DE REFERENCIA PARA EL DIAGNÓSTICO DEL VIRUS DEL HIV n n n Paciente adultos y pediatrico > 18 meses Pediátrico < 18 meses (niños recién nacidos, hijos de madres seropositivas) Pacientes derivados con screening reactivo en banco de sangre o en otro laboratorio.

ALGORITMO DIAGNOSTICO EN Paciente adulto y en pediátrico > 18 meses PRIMERA MUESTRA (ELISA, MEIA, AP) INDETERMINADO NR (Se informa) (SE SOLICITA SEGUNDA MUESTRA) R (SE SOLICITA SEGUNDA MUESTRA) SEGUNDA MUESTRA (ELISA, MEIA, AP) NR (SE SOLICITO TERCER MUESTRA) INDETERMINADO R TERCER MUESTRA (ELISA, MEIA, AP) NR (SE INFORMA) INDETERMINADO R WESTERN BLOT

PEDIÁTRICO < 18 Meses 1 -MUESTRA (PCR, NASBA REAL TIME, Ag p 24 o cultivo celular) POSITIVO NO Detectable (Se repite la prueba a los 15 dias) (se solicita nueva Muestra) 2 -SEGUNDA MUESTRA (PCR, NASBA REAL TIME, Ag p 24 o cultivo celular) NO DETECTABLE (se repite la prueba a los 6 meses) ALTA CON SEROLOGÍA NEGATIVA POSITIVO (SE SOLICITA TERCER MUESTRA) TERCER MUESTRA (PCR, NASBA REAL TIME, Ag p 24 o cultivo celular) POSITIVO (Confirma el diagnóstico de infección por VIH)

WESTERN BLOT WB NEGATIVO (Ausencia de bandas) INDETERMINADO (cualquier patrón de bandas específicas) POSITIVO (dos de: p 24, gp 41 y gp 120/160)

BIBLIOGRAFIA n n n VIROLOGIA MEDICA. Tercera Edición. Guadalupe Carballal-José Oubiña. LIBRERIA EL ATENEO. Buenos Aires. 2002 HIV-1 PATHOGENESIS. Mario Stevenson. REVIEW. Nature Medicine. Volume 9. Number 7. July 2003 ENFERMEDADES INFECCIOSAS – Principios y Práctica. Mandell y col. Quinta edición, volumen 2. Editorial Panamericana. Buenos Aires. 2002. CELLS OF THE CENTRAL NERVOUS SYSTEM AS TARGETS AND RESERVOIRS OF THE HUMAN IMMUNODEFICIENCY. S Kramer, I Rothenaiger, H. Wolff, J. E. Bell, R. Brack-Werner. REVIEW. Virus Research 111(2005) 194 -213. VIRAL PATOGÉNESIS IN DIAGRAMS - Hans-W. Ackermann, M. D. Laurent Berthiaume, Ph. D. Michel Tremblay, Ph. D. CRC Press LLC, 2000 N. W. Corporate Blvd. , Boca Raton, Florida 33431. VIRAL PATHOGENESIS AND IMMUNITY – 2º Edicion. Neal Nathanson, Departments of Microbiology and Neurology University of Pennsylvania Medical Center, Philadelphia, USA. 2007. Elseiver Centro Nacional de Referencia para el Diagnóstico de VIH-SIDA. www. cnrsida. org. ar – 2009 REDUCTION OF DIAGNOSTIC WINDOW BY NEW FOURTH-GENERATIONHUMAN IMMUNODEFICIENCY VIRUS SCREENING ASSAYS. BERNARD WEBER, EL HADJI MBARGANE FALL, ANNEMARIE BERGER and HANS WILHELM DOERR. American Society for Microbiology. Vol. 36, No. 8. 1998 SEXUAL TRANSMISSION OF HIV-1. Julie Fox, Sarah Fidler. Antiviral Research, 85: 276 -285. 2010 ACUTE HIV-1 INFECTION. Myron S. Cohen, George M. Shaw, Andrew J. Mc. Michael, Barton f. Haynes. The New England Journal of Medicine, 364: 1943 -54. 2011. MULTICENTER EVALUATION OF A NEW, AUTOMATED ENZYME-LINKED IMMUNOASSAY FOR DETECTION OF HUMAN IMMUNODEFICIENCY VIRUS-SPECIFIC ANTIBODIES AND ANTIGEN. Eva Sickinger, Myriam Stieler, Boris Kaufman, Hans-Peter Kapprell, Daniel West, Arnold Sandridge, Sushil Devare, Gerald Schochetman, 2 J. C. Hunt, David Daghfal, and the Ax. SYM Clinical Study Group. JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY, 42: 21– 29 2004

FIN MUCHAS GRACIAS