ВИЧ- вирус иммунодефицита человека. Онковирусы. ВИЧ Семейство: Retroviridae

ВИЧ- вирус иммунодефицита человека. Онковирусы.

ВИЧ Семейство: Retroviridae Подсемейство : Lentiviridae ВИЧ-1 – 90% случаев (основной возбудитель) ВИЧ-2 – менее вирулентный (встречается в Африке) Аналогия м/у ними- 50%. РНК-содержащий сферической формы (100-120 нм)

Структура ВИЧ С вн.стороны ВО (липидная) матриксный каркас, образованный белком Р17/18. Сердцевина- р24 Нуклеокапс.протеин р7/р9. Геном: - 2 однонитев.РНК 3 энзима:ОТ, протеаза, интеграза Структурные гены: gag, pol, env (кодируют структ.компон.В.) Регуляторные гены: кодируют протеины.

МОРФОЛОГИЯ Полная вирусная частица: - ядро: - РНК - 3 энзима: ревертаза, интеграза протеаза.

ЭПИДЕМИОЛОГИЯ ВИЧ-инфекция зарегистрирована почти во всех странах мира. Со времени 1-ой регистрации ВИЧ инфицировано более 65 млн. чел., 23 млн. умерло

ВИЧ/СПИД в РК За последние годы ухудшилась эпидситуация по ВИЧ/СПИД Тенденция к распространению ВИЧ от ПИН к др.группам населения гетеросексуальным путем

В РЕСПУБЛИКЕ КАЗАХСТАН По оценкам экспертов в настоящее время в стране проживает более 17 тысяч людей с ВИЧ/СПИД. удельный вес людей - 20- 39 лет составляет 77%. среди ВИЧ -инфицированных преобладают мужчины – 75% (соотношение мужчин к женщинам 3:1).

Более 17 тыс. ВИЧ-инфицированных зарегистрировано наибольший показатель: - в Алматы (211,4 на 100 тыс.населения) - Павлодарской (180,2) - Карагандинской (152) областях

В последние годы наблюдается рост полового пути передачи - 42,8%. смещение случаев инфекции в сторону более старших возрастов: доля ВИЧ-инфицированных в возрасте 15- 19 лет сократилась почти в 2 раза

ДОСТИГНУТ В РК 97 % охват ВИЧ-инфицированных беременных женщин профилактическими мероприятиями по предупреждению передачи от матери к ребенку 97,4% – охват новорожденных. Уровень передачи ВИЧ от матери к ребенку снижается, сейчас он составляет 3,4%. В Казахстане за 2011 год выявлены 19 ВИЧ-инфицированных детей

Фермент ОТ позволяет синтезировать ДНК на матрице РНК Вирусная ДНК попадает в ядро клетки-хозяина и интегрируется с его ДНК Клетка перепрограммируется на синтез вирусных ДНК, РНК, белков вместо собственных Транскрипция Трансляция На рибосомах клетки синтезируются длинные белковые цепочки, которые потом расщепляются на отдельные звенья. Этот процесс активируется ферментом – протеазой Вирус созревает и высвобождается

Адсорбция ВИЧ на CD4 рецепторах ВИЧ-поражает клетки с СД4 рецепторами: Лимфоциты (отвечают за иммунологическую память) Моноциты и МФ (долгоживущие клетки неспец.защиты- (постоянные резервуары сохранения ВИЧ Жизненный цикл начинается с взаимодействия gp120 c CD4

Адсорбция ВИЧ на Т-лимфоцитах (сканирующая электронная микроскопия)

ВИЧ входит в CD4 клетку

Фермент – обратная транскриптаза Освобождение сердцевины ↓ запуск обратной транскрипции вирусной РНК при участии ОТ. Сначала синтезируется: 1-цепочечная ДНК-комплементарная вирусной РН затем 2 цепь ДНК, используя 1-ую в качестве матрицы.

Интеграция (встраивание) вирусной ДНК в ДНК клетки хозяина 1. 2-цепочечная вирусная ДНК (провирус) проникает в клеточное ядро → благодаря протеазе, которая разрезает ДНК-клетки хозяина 2. Затем встраивается в хромосомную ДНК, сохраняясь в ней до конца жизни клетки

Активация вирусной ДНК. Раскручивание для синтеза м-РНК Репликация начинается с активации концевых повторов провирусного генома ↓ инициация транскрипции В.геномов. Образование РНК-транскрипта: ↓ На матрице провирусной ДНК с участием клеточной ДНК-зависимой РНК-полимеразы Затем молекулы РНК, содержащие полный геном → в Ц. (геномный фонд для формирования зрелых вирионов)

Синтез вирусных белков на м-РНК м-РНК в цитоплазме ↓ это матрицы для синтеза на клеточных рибосомах ↓ вирусных протеинов + энзимов

Фермент протеаза- нарезает вирусные белки Протеины синтезируются в виде длинных полипептидных цепей- предшественники На индивидуальные структурные белки нарезаются ↓ вирусными протеазами

Новые вирусные частицы покидают CD4 клетку

ПАТОГЕНЕЗ Вирус поражает клетки , имеющие СD 4 рецепторы- Размножение ВИЧ → к гибели Т- хелперов Лф ↓ ослабление иммунной системы. Организм может защищать себя от большинства чужеродных агентов, пока число T-лимфоцитов находится на уровне более 500 в 1 мкл Постепенное ухудшение функций ИС, приводящее к развитию СПИДа, длится в среднем 8-10 лет (у нелеченных лиц). Клинические симптомы ВИЧ инфекции проявляются позже

АГ- СВОЙСТВА И ИЗМЕНЧИВОСТЬ ВИЧ АГ свойствами обладают: белки сердцевины оболочечные гликопротеины. ВИЧ обладает высокой изменчивостью, которая происходит в ходе инфекции и в организме вирусоносителей. Это дает возможность вирусу скрываться от специфических АТ и факторов клеточного иммунитета, что приводит к хронизации процесса.

ВИЧ – вирус иммунодефицита человека ВИЧ инфекция -состояние, вызывающееся действием ВИЧ СПИД - синдром приобретенного иммунодефицита Как разделить понятия: ВИЧ и СПИД СПИД - завершающая стадия ВИЧ инфекции, связанная с гибелью клеток, отвечающих за иммунитет Внедрение ВИЧ Формирование иммунодефицита СПИД Носительство Предболезнь Болезнь Завершение болезни

Эпидемиология ВИЧ/СПИД ИИ- ВИЧ- инфицированный человек на всех стадиях заболевания Вирус (+) в: - крови - сперме - влагалищном и цервикальных секретах - грудном молоке Инфицирующая доза В- около 10 тыс вирионов. Слюна, моча, слезная жидкость также содержат В., но инфицирующая доза невелика.

Пути передачи ВИЧ Введение зараженной крови Половой акт От матери к ребенку Гетеросекс. Гомосекс. Парентеральный

Основные симптомы ВИЧ-инфекции и СПИДа

Оппортунистические заболевания при ВИЧ: а) лейкоплакия (вирус Эпштейна-Барра); b) Кандидоз; c)Cаркома Капоши; d) Пневмоцистная пневмония; e)Ретинит, вызванный ЦМВ; f)Криптоспоридоз

Структура ведущих ВИЧ-индикаторных и СПИД-ассоциированных заболеваний в РК

Сравнение структуры вторичных заболеваний у ВИЧ-инфицированных (Трунова Ж.З., 2001). РК Россия Европа США Туберкулез 33,0 25,5 20,0 5,0 Герпес 26,6 33,3 6,0 2,8 Кандидоз 20,6 16,6 20,6 11,0 Саркома Капоши 0,7 21,2 8,0 25,0

Структура ВИЧ-индикаторных и СПИД-ассоциированных заболеваний в РК У каждого 4 пациента - хронические вирусные гепатиты (геп.С- 57,3%) 14,3% новорожденных - инфицируется перинатально 72% ВИЧ-инфицированных погибают от развития СПИДа (с генерализованными бактериальными, вирусными и паразитарными инфекциями) 28 % - от передозировки наркотиков и травм.

Опоясывающий лишай

Кандидоз полости рта

Кандидоз слизистой губы

Волосистая лейкоплакия языка

Волосистая лейкоплакия языка

Проявления герпетической инфекции при СПИДе

Бластомикоз

Кахексия

Кахексия

САРКОМА КАПОШИ

САРКОМА КАПОШИ

Саркома Капоши на языке

Лабораторная диагностика при ВИЧ-инфекции

Задачи лабораторной диагностики ВИЧ Определить ВИЧ-статус (да/нет) 2. Исследования у ВИЧ- (+) пациента: - определить стадию ВИЧ-инфекции и прогноз течения, - показания к терапии, - контроль эффективности терапии

Что же мы определяем лабораторно?

Естественное течение ВИЧ-инфекции: клинико-лабораторные параллели

Тесты для лабораторной диагностики Тесты для диагностики: Скрининговые для определения АТ: ИФА, в т.ч. быстрые тесты Подтверждающие для определения АТ : - иммунный блотинг (ИБ) Методы амплификации НК: качественная ПЦР(ДНК-ПЦР) в культуре лимфоцитов крови Тесты для слежения за течением: Методы амплификации НК: количественная ПЦР (РНК-ПЦР, вирусная нагрузка) в плазме Определение иммунного статуса: CD4

Кто подлежит обследованию на ВИЧ? доноры бывшие в половом контакте с ВИЧ+ лицом или в сходных условиях по риску заражения ВИЧ по клиническим показаниям (при оппортунистических инфекциях или ИД) получающие частые гемотрансфузии дети от ВИЧ+ матерей или оформляющиеся в госучреждения пациенты с ИППП ПИН, МСМ, РКС Заключенные медработники в случае профессионального контакта все изъявившие пройти обследование, в том числе анонимно

Диагностический алгоритм обследования на ВИЧ-инфекцию

Биологические жидкости, в которых можно определять АТ к ВИЧ Сыворотка крови, полученная путем центрифугирования цельной крови Цельная капиллярная кровь (взятая из пальца) Транссудат слизистой полости рта, собранный с помощью специального приспособления (тесты «Oral Fluid», «OMT- EIA») Моча

ИФА: принцип метода

Реакция иммунного блоттинга - специфичный ИФА с определением АТ к определенным АГ ВИЧ (+) результат - окончательно подтверждает ВИЧ-инфицирование Чувствительность - 100%.

Предварительная диагностика ВИЧ Обнаружение АТ к ВИЧ с помощью экспресс-тестов : - карт с АГ и синтетическими пептидами ВИЧ ½. Чувствительность 98% специфичность 94%. ЭКСПРЕСС обследование на ВИЧ

ПЦР ПЦР - из РНК возбудителя выбирается сегмент, который амплифицируется для создания достаточного количества для анализа. Качественный и количественный метод. Чувствительность и специфичность ПЦР ВИЧ - 100%. Определяет активность ВИЧ-инфекции, Выбор АРВ-препаратов Контроль эффективности

Динамика лабораторных показателей при ВИЧ Заражение Виремия Появление АТ к ВИЧ 3-6 недель 2-8 недель Нарастание виремии Снижение CD4 лимфоцитов Стадия клинических проявлений 7-10 лет

Что такое вирусная нагрузка? Ко-во частиц ВИЧ в плазме крови. Определяют только РНК вируса. Количество копий РНК ВИЧ в 1 мл «Прогностичный" тест (оценка ИС в ближайшее время)

VL на фоне АРТ: контроль эффективности лечения ВИРУСНАЯ НАГРУЗКА

Лабораторное обследование детей, рожденных ВИЧ+ матерями

Цитофлюориметрическое определение количества CD4-клеток Деление клеток крови по их размеру (объему) Меченные красителем моноклоновые АТ соединяются с комплементарными им CD4 ЛФ, что вызывает изменение окраски рабочего раствора, определяемое фотометрически

Зачем нужно определение CD4? Установление: - стадии ВИЧ-инфекции - показаний для начала АРТ Контроль за иммун. ответом на АРТ (восстановление CD4 при лечении)

Лечение Цель- предотвращение прогрессирования болезни, поддержание функции ИС. К этиотропным препаратам относятся: Ингибиторы ОТ: - тимидиновые (азидотимидин, ставудин) - нетимидиновые Имитируют естественные нуклеотиды и конкурируют с ними в синтезе цепей вирусной ДНК на этапе обратной транскрипции

Ингибиторы обратной транскриптазы

2. Ингибиторы фермента- протеазы Тормозят процесс нарезания длинных цепочек вновь синтезированных протеинов → что приводит к образованию незрелых неинфекционных вирусных частиц.

3. Ингибиторы слияния GP120 В.с CD 4 рецепторами клетки хозяина

Блокирование транскрипции РНК

Ингибиторы интегразы

ПРОФИЛАКТИКА ВИЧ-инфекция сравнительно мало заразна Простые меры защиты снижают степень заразительности в сотни и тысячи раз Создано более 50 препаратов, рассматриваемых в качестве потенциальных кандидатов профилактических вакцин, более 20 – прошли испытание на добровольцах.

ВИЧ НЕ ПЕРЕДАЕТСЯ При рукопожатиях, объятиях, поцелуях При кашле или чихании При пользовании общими предметами, в том числе общим телефоном, При совместной еде, в том числе пользовании совместными столовыми приборами При пользовании общей одеждой, обувью, постельными принадлежностями. При пользовании туалетами, рукомойниками, душевыми, бассейнами При укусах кровососущих насекомых

Как предотвратить ВИЧ инфицирование медицинских работников Универсальные меры предосторожности рассматривать кровь и биологические жидкости всех пациентов как потенциально инфицированные и при работе с ними всегда предпринимать соответствующие меры защиты Избегать контакта с кровью и другими биологическими жидкостями Избегать травм при обращении с мед. инструментарием Использовать защитные приспособления, безопасные технологии и индивидуальные средства защиты (перчатки, халаты, маски очки, экраны)

Действия в случае профессионального контакта При контакте с биологическими жидкостями ВИЧ-инфицированного пациента провести : - провести тестирование на ВИЧ мед. Работника - провести анализ произошедших событий прием АРТ не позднее 48 час. от момента аварийной ситуации!!!

ОНКОВИРУСЫ Папилломавирусные инфекции- развитие доброкачественных опухолей кожи и слизистых ВИЧ- СПИД, на фоне которого развиваются злокачественные опухоли (лейкозы, саркома Капоши) Герпес Эпштейна-Барр → инфекционный мононуклеоз → злокачественная лимфома Беркитта, назофарингеальный рак Гепатит В → хр.гепатит → рак печени

ОНКОГЕННЫЕ ВИРУСЫ Создают условия для развития злокачественных опухолей. ИИ- вирусоносители, а не больные с опухолевыми заболеваниями.