ВИЧ-ИНФЕКЦИЯ ЭТИОЛОГИЯ История открытия 1984 год

ВИЧ-ИНФЕКЦИЯ

ЭТИОЛОГИЯ История открытия 1984 год – вирус был выделен практически одновременно американскими (Роберт Галло) и французскими (Люк Монтанье) учеными 1985 год – разработан метод диагностики 1986 год – по рекомендации ВОЗ вирус получил единое название – HIV (ВИЧ) В 2008 году Люк Монтанье и Франсуаза Барре-Синусси были удостоены Нобелевской премиии в области физиологии и медицины «за открытие вируса иммунодефицита человека» . Вирус относится к семейству ретровирусов, подсемейству лентивирусов В мире циркулирует три типа вирусов: ВИЧ-1, ВИЧ-2, ВИЧ-3, которые отличаются по структуре, антигенному составу и эпидемиологической характеристике. В России распространен ВИЧ-1 и ВИЧ-2

СТРУКТУРНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ВИЧ

ГЕНЕТИЧЕСКАЯ СТРУКТУРА ВИЧ

СТРУКТУРНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ВИЧ

СВОЙСТВА ВИРУСА ИЗМЕНЧИВОСТЬ ВИЧ Частота генетических ошибок при репликации составляет 10 -4 – 10 -5 ошибок одного гена на цикл репликации (ни один ВИЧ не производит при репликации вирион, в точности повторяющий родительский)

УСТОЙЧИВОСТЬ ВИЧ ВО ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ Вирус сохраняется: Ø 4 -5 суток в жидкой среде или в высушенном состоянии при комнатной температуре Ø 14 дней – в шприцах с кровью Ø до 10 лет - в замороженной крови (плазме) Ø до нескольких месяцев - в замороженной сперме Вирус погибает: Ø при нагревании до 56 о. С в течении 30 мин. (для гарантии безопасности препаратов крови их обрабатывают при этой температуре 3 -5 часов) Ø при кипячении – за 1 -5 минут Ø при резком изменении p. H среды (1% р-р глютарового альдегида, 3% р-р перекиси водорода, 1% р-р лизола, о, 5% р-р гипохлорида натрия, 70% этанола) Вирус относительно устойчив к ультрафиолетовому облучению, а также к ионизирующей радиации

ПУТИ ПЕРЕДАЧИ ИНФЕКЦИИ 1. Естественные: • Половой • Вертикальный - антенатальный – 25 -30% - проникновение вируса через плаценту) - перинатальный- 50 -70% - во время родов - постнатальный – 10 -20% - при грудном вскармливании 1. Искусственные: • Парентеральный - переливание крови и ее компонентов, - использование инфицированных медицинских инструментов, шприцов и игл и др. - трансплантация органов и тканей

ПУТИ ПЕРЕДАЧИ ВИЧ-ИНФЕКЦИИ Группы инфицированных Доля ВИЧ-инфицированных во всем мире, % Лица с бисексуальной или гетеросексуальной ориентацией 70— 85 Гомосексуалисты 10— 15 Инъекционные наркоманы 5— 10 Лица, перенесшие переливание компонентов крови 2— 8 Дети, заразившиеся от матери в перинатальном периоде 5— 10 Медицинский персонал < 0, 01

Репликативный цикл ВИЧ

ПАТОГЕНЕЗ Капсид содержит два гликопротеида - 41 и 120, причем последний обеспечивает специфическое связывание вируса с клетками, несущими на своей поверхности антиген СD 4. Такими клетками являются: - Т-CD 4+-лимфоциты (хелперы) циркулирующие в крови и входящие в состав лимфоидных фолликулов; - В-лимфоциты (те, которые имеют рецептор СD 4+); - моноциты и макрофаги; - дендритические клетки; - некоторые клетки ЦНС Инфицирование других клеток (за счет связывания gp 41 с F-пептидом) - глиальные клетки - клетки человеческого мозга плода - клетки эпителия прямой кишки

Снижению числа лимфоцитов CD 4 в крови способствует следующее: Прямое повреждение лимфоцитов ВИЧ Аутоиммунное поражение лимфоцитов CD 4 Образование синцития из пораженных лимфоцитов под действием ВИЧ Блокирование CD 4 -рецептора на незараженных Т-клетках Токсическое действие вирусных белков на зрелые лимфоциты и костный мозг Апоптоз лимфоцитов

Нарушение функций макрофагов 1. Угнетение хемотаксиса. 2. Ухудшение антигенпредставляющих функций. Показано, что белок вируса Tat, трансактивирующий транскрипцию вирусных генов, значительно ингибирует транскрипцию и биосинтез молекул главного комплекса гистосовместимости MHC–I, следовательно, и противовирусные иммунные реакции. 3. Угнетение фагоцитоза, опосредованного через Fc–peцептор. 4. Угнетение всех макрофагальных бактерицидных механизмов

B–лимфоциты и иммуноглобулины Поликлональная активация В-лимфоцитов самим ВИЧ, а также EBV и CMV. Соответственно гипериммуноглобулинемия (особенно за счёт изотипов Ig. G 1, Ig. G 3, Ig. A, Ig. E), но снижение антительных функций сыворотки и способности к индукции антигенспецифичного гуморального ответа. Кроме этого, противовирусные АТ, связывая вирусы в комплекс, помогают им инфицировать все клетки, имеющие Fc–рецептор (феномен усиления вирусной инфекции АТ).

Классификация ВИЧ-инфекции (В. И. Покровский, 2001 г. ) 1. Стадия инкубации – от момента заражения до клинических проявлений и/или выработки антител (от 3 недель до 3 месяцев) 2. Стадия первичных проявлений Варианты течения: А. Бессимптомная только выработка антител Б. Острая ВИЧ-инфекция без вторичных заболеваний «Мононулеозоподобный» синдром - у 50 -90% инфицированных в первые 3 месяца после заражения В. Острая инфекция с вторичными заболеваниями У 10 -15% инфицированных – вторичные заболевания различной этиологии (ангина, бактериальная пневмония, кандидозы, герпетическая инфекция и др. ) 3. Латентная стадия (2 -20 лет)

Классификация ВИЧ-инфекции (продолжение) (В. И. Покровский, 2001 г. ) 4. Стадия вторичных заболеваний 4 А. Потеря массы тела менее 10%; грибковые, вирусные, бактериальные поражения кожи и слизистых оболочек; опоясывающий лишая; повторные фарингиты, синуситы (фаза: прогрессирования, ремиссии – спонтанной или на фоне лечения) 4 Б. Потеря массы тела более 10%; необъяснимая диарея или лихорадка более 1 мес; волосистая лейкоплакия; туберкулез легких; повторные или стойкие вирусные, бактериальные, грибковые, протозойные поражения внутренних органов; повторный или диссеминированный опоясывающий лишай; локализованная саркома Капоши (фаза: прогрессирования, ремиссии – спонтанной или на фоне лечения) 4 В. Кахексия; генерализованные бактериальные, вирусные, грибковые, протозойные и паразитарные заболевания; пневмоцистная пневмония; кандидоз пищевода, бронхов, легких; внелегочной туберкулез; атипичные микобактериозы; диссеминированная саркома Капоши; поражение ЦНС различной этиологии. (фаза: прогрессирования, ремиссии – спонтанной или на фоне лечения) 5. Терминальная стадия

Стадии ВИЧ-инфекции и диагностические критерии СПИДа у подростков и взрослых I. Группы ВИЧ-инфицированных Клинические проявления Число лимфоцитов CD 4 в крови, мкл– 1 А Острая лихорадочная фаза, бессимптомная фаза, персистирующая генерализованная лимфаденопатия Б В Симптомы, не характерн ые для групп А и В СПИД ³ 500 А 1 Б 1 В 1 200— 499 А 2 Б 2 В 2 < 200 А 3 Б 3 В 3 (а) Согласно рекомендациям Центра по контролю заболеваемости США, с 1993 г. в США к больным СПИДом относят ВИЧинфицированных, входящих в группы А 3 и Б 3, В 1, В 2, В 3.

Индикаторные болезни клинических категорий А, В и С (по данным CDCP от 1993 г. ) Категория А. Бессимптомная. Либо персистирующая дольше 3 мес генерализованная лимфаденопатия без видимых признаков других инфекций. Категория В. · Бациллярный ангиоматоз. Кандидоз орофарингеальный. · Кандидоз вульвовагинальный, персистирующий, торпидный к традиционной терапии. · Цервикальная дисплазия или цервикальная карцинома. Лихорадка (38, 5 °C) или/и диарея более 1 мес. Лейкоплакия полости рта. · Герпеc опоясывающий, более двух эпизодов в год. Тромбоцитопения. Листериоз. · Пельвиоцеллюлит, тубоовариальные абсцессы.

Категория С. · Кандидозы бронхов, трахеи, лёгких. · Кандидоз пищевода. · Цервикальный рак, инвазивный. · Кокцидиоидомикоз, диссеминированный или экстрапульмонарный. · Криптококкоз, экстрапульмонарный. · Криптоспороидоз, хронический кишечный (более 1 мес). · Цитомегаловирусные инфекции (за пределами печени, селезёнки, лимфатических узлов). · Цитомегаловирусный ретинит с потерей зрения. · ВИЧ–энцефалопатия. · Простой герпес: изъязвления долее 1 мес, с локализацией в бронхах, лёгких или пищеводе. · Гистоплазмоз, диссеминированный или экстрапульмонарный. · Изоспориоз, хронический кишечный (более 1 мес). · Саркома Капоши. · Лимфома типа Бёркетта. · Лимфома иммунобластная. · Лимфома мозга, первичная. Mycobacterium avium, M. kansasii, диссеминированные или экстрапульмонарные. Mycobacterium tuberculosis любой локализации (лёгочной или экстрапульмонарной). Микобактерии любых других видов, диссеминированные или экстрапульмонарные. Пневмония Pneumocystis carinii. Пневмония рекуррентная (>2 эпизодов в год). Прогрессивная мультифокальная лейкоэнцефалопатия. Рекуррентная септицемия, вызываемая сальмонеллами. Токсоплазмоз мозга. ВИЧ–wasting–синдром (синдром истощения).

РАЗВИТИЕ ВИЧ-ИНФЕКЦИИ

Динамика содержания CD 4+ T–лимфоцитов в крови ВИЧ–инфицированных пациентов

ДИАГНОСТИКА ВИЧ-ИНФЕКЦИИ Определение антител к ВИЧ Определение антигенов ВИЧ (p 24) Определение нуклеиновых кислот ВИЧ Твердофазный ИФА Иммуноблоттинг Иммунофлюоресцентный анализ ПЦР Метод разветвленной ДНК. Флюоресцентная гибридизация in situ Выделение ВИЧ Из плазмы В культуре лимфоцитов и моноцитов больного Непрямые методы Определение соотношения CD 4/CD 8 Оценка пролиферативной активности лимфоцитов

АНТИТЕЛА к ВИЧ появляются у 90 -95 % зараженных в течение 3 -х месяцев после заражения, у 5 -9 % - через 6 месяцев от момента заражения, и у 0, 5 -1 % - в более поздние сроки. Наиболее ранний срок обнаружения антител - 2 недели от момента заражения. Обнаружение антител к ВИЧ включает два этапа 1. На первом этапе проводится выявление суммарного спектра антител против антигенов ВИЧ с использованием различных тестов: иммуноферментных, агглютинационных, комбинированных, гребеночных, мембранно-фильтрационных или мембраннодиффузных. 2. На втором этапе методом иммунного блотинга проводится определение антител к отдельным белкам вируса.

ТВЕРДОФАЗНЫЙ ИФА В качестве твердой фазы чаще всего используются полистироловые планшеты с сорбированными на них антигенами Определение антител к какому-либо антигену проводят следующим образом: 1) исследуемую жидкость вносят в лунки планшета с сорбированным на них антигеном; 2) во время инкубации антитела связываются с антигеном; 3) планшет отмывают от несвязавшихся антител и добавляют антитела к иммуноглобулинам (вторые антитела), меченные ферментом; 4) планшет вновь отмывают, добавляют субстрат фермента и хромоген (вещество, меняющее окраску в процессе химической реакции); 5) под действием продукта ферментативной реакции хромоген меняет окраску. Чем больше меченных ферментом вторых антител связывается с комплексами антиген—антитело, тем выше активность фермента и интенсивность окраски раствора

ТВЕРДОФАЗНЫЙ ИФА А. Определение антител. Б. Определение антигенов.

Иммуноблоттинг — качественный метод, позволяющий выявлять антигены и антитела в исследуемой пробе Антитела с помощью этого метода выявляют следующим образом: 1) смесь известных антигенов разделяют с помощью электрофореза в полиакриламидном геле и переносят на нитроцеллюлозную мембрану; 2) мембрану инкубируют с исследуемой пробой, например сывороткой, а затем — с мечеными антителами к иммуноглобулинам. Белки оболочки вируса (env) ВИЧ-1, обычно обозначаемые как гликопротеины, (гп) с молекулярным весом 160 кд, 120 кд, 41 кд. У ВИЧ-2 гликопротеины имеют вес 140 кд, 105 кд, 36 кд. Белки сердцевины (gag) (обычно обозначаемые как протеины) у ВИЧ-1 имеют молекулярный вес соответственно 55 кд, 24 кд, 17 кд, а ВИЧ-2 - 56 кд, 26 кд. 18 кд. Ферменты ВИЧ-1 (pol) имеют молекулярный вес 66 кд, 51 кд, 31 кд, ВИЧ-2 - 68 кд.

Результаты, полученные в иммунном блотинге, интерпретируются, как положительные, сомнительные и отрицательные. • Положительными (позитивными) считаются пробы, в которых обнаруживаются антитела к 2 или 3 гликопротеинам ВИЧ. • Отрицательными (негативными) считаются сыворотки, в которых не обнаруживается антител ни к одному из антигенов (белков) ВИЧ. • Сомнительными (неопределенными или не интерпретируемыми) считаются пробы, в которых обнаруживаются антитела к одному гликопротеину ВИЧ и/или каким-либо протеинам ВИЧ. При получении сомнительного результата с антителами к белкам сердцевины (gag) в иммунном блотинге с антигенами ВИЧ-1 проводится исследование с антигенами ВИЧ-2. При получении положительных результатов иммунного блотинга делается заключение о наличии в исследуемом материале антител к ВИЧ. При получении отрицательного результата анализа в ИБ выдается заключение об отсутствии антител к ВИЧ.

ПРОГНОСТИЧЕСКИЕ ТЕСТЫ ПРИ ВИЧ -ИНФЕКЦИИ Определение абсолютного и относительного количества лейкоцитов и лимфоцитов в периферической крови Определение абсолютного и относительного количества Тхелперов (CD 4 -лимфоцитов). Определение концентрации молекул CD 4 на поверхности Т-хелперов Определение соотношения CD 4CD 8 Оценка функционального состояния Т-клеточной системы Оценка гуморального звена иммунитета (содержание Ig. A, Ig. M, Ig. G и уровня ЦИК) Исследование функциональной активности фагоцитов

Противовирусные средства, блокирующие репликацию ВИЧ Препарат Механизм действия Зидовудин, диданозин, зальцитабин, Ингибируют обратную транскриптазу ингибиторы обратной транскриптазы, не относящиеся к нуклеозидам Ингибиторы протеаз, ингибиторы TAT Ингибируют транскрипцию и трансляцию Интерфероны Препятствуют проникновению вируса в клетку, ингибируют репликацию ДНК зараженных клеток и внутриклеточную сборку вируса TAT — белок трансактивации.

Ингибиторы обратной транскриптазы Препарат Дозы Побочные действия Зидовудин 100— 200 мг внутрь каждые 8 ч, детям — 50— 200 мг (100— 180 мг/м 2) внутрь каждые 6 ч Угнетение кроветворения, миопатия Диданозин 200— 300 мг внутрь каждые 12 ч, детям — 25— 100 мг внутрь каждые 12 ч (200 мг/м 2/сут) Периферическая нейропатия, острый панкреатит Зальцитабин 0, 375— 0, 75 мг внутрь каждые 8 ч, детям не назначают Периферическая нейропатия, стоматит

ВИЧ-ИНФЕКЦИЯ/СПИД В АЛТАЙСКОМ КРАЕ ПО ДАННЫМ НА 01. 05. 2010 г. Всего зарегистрировано случаев ВИЧ-инфекции - 10158 чел. , в т. ч. 2377 - в учреждениях исполнения наказания. ВИЧ-инфекция регистрируется в 11 городах и 57 районах Алтайского края. Пол Возраст М Ж 0 -14 15 -17 18 -19 20 -29 30 и > Абс. число 6968 3190 95 240 592 5370 3861 % 68, 6 31, 4 0, 9 2, 4 5, 8 52, 9 36, 0

ВИЧ-ИНФЕКЦИЯ/СПИД В АЛТАЙСКОМ КРАЕ ПО ДАННЫМ НА 01. 05. 2010 г. возраст пол Социально-значимое занятие