ВАШЕ ПЛАНИРУЕМОЕ СЧАСТЬЕ Влияние ИППП на качество эмбрионов в программе ЭКО Феськова А. М. , проф. , д. мед. н. Х А Р Ь К О В 2015
ВАШЕ ПЛАНИРУЕМОЕ СЧАСТЬЕ Мужское бесплодие • Брак считается бесплодным при отсутствии беременности на протяжении года регулярной (2 -3 раза в неделю) половой жизни без предохранения. • С проблемой бесплодия сталкивается 16 % супружеских пар (каждая 6 -я семья). • Мужской фактор является причиной бесплодия практически в 65% случаев (ASRM, Балтимор 2015).
ВАШЕ ПЛАНИРУЕМОЕ СЧАСТЬЕ Влияние ИППП на фертильность сперматозоидов: • • • Снижение количества морфологически нормальных форм Снижение количества подвижных сперматозоидов Ухудшение созревания Увеличение ДНК-фрагментации Повышение содержания анеуплоидий (нарушение количества хромосом) в ядрах сперматозоидов Centre for Dermatology and Venerology, J. W. Goethe University, Frankfurt/Main, Germany. Andrologia. 2008 Apr; 40(2): 72 -5
ВАШЕ ПЛАНИРУЕМОЕ СЧАСТЬЕ Цель: 1. Исследовать влияния ИППП на уровень хромосомных нарушений и фрагментацию ДНК в ядрах сперматозоидов. 2. Проанализировать влияние повышенного содержания анеуплоидных сперматозоидов и сперматозоидов, несущих фрагментированную ДНК, в эякуляте у пациентов со сниженной репродуктивной функцией на процесс развития эмбрионов. В качестве показателя дробления эмбрионов выбран индекс частоты формирования бластоцист (ЧФБ).
ВАШЕ ПЛАНИРУЕМОЕ СЧАСТЬЕ Материалы и методы анализ ядер сперматозоидов на наличие в них анеуплоидий: метод флуоресцентной гибридизации in situ (fluorescence in situ hybridization, FISH); анализ фрагментации ДНК сперматозоидов: метод SCD (sperm chromatin dispersion); Лечение ИППП: антибактериальная терапия, озонотерапия и иммунокоррекция.
В ходе работы сформировано 2 группы пациентов: ВАШЕ ПЛАНИРУЕМОЕ СЧАСТЬЕ 1) Группа 1: 100 мужчин, средний возраст 37, 2± 4, 2 лет – исследован уровень фрагментации ДНК спермы методом SCD; 2) Группа 2: 120 мужчин, средний возраст 38, 4± 5, 1 лет – исследован уровень хромосомных нарушения в сперме методом FISH (13 -14, 16, 18, 21, X, Y) Распределение пациентов в группах по результатам исследования эякулята: Вид анализа Астенозооспермия (фракция А+В менее 50 %) Олигозооспермия (менее 20 млн/мл) Тератозооспермия (менее 30 % норм. форм) Нормоспермия Фрагментация ДНК (100 пациентов) 25 % 34 % 21 % 20 % Анализ анеуплоидий спермы (120 пациентов) 37, 5 % 28, 3 % 17, 5 % 16, 7 %
ВАШЕ ПЛАНИРУЕМОЕ СЧАСТЬЕ Рис. 1. Патологическое ядро. Наличие двух половых ( синие сигналы) и двух 18 -х (красные сигналы) хромосом в ядре Рис. 2. Фрагментация ДНК в сперме (метод SCD)
ВАШЕ ПЛАНИРУЕМОЕ СЧАСТЬЕ Результаты исследования Высокое содержание анеуплоидных сперматозоидов было выявлено для 74 -х из 120 пациентов Заключение спермограммы Количество, N Количество, % Олигозооспермия 29 (34) 85, 3 % Астенозооспермия 25 (45) 55, 6 % Тератозооспермия 15 (21) 71, 4 % Нормоспермия 5 (20) 25, 0 %
ВАШЕ ПЛАНИРУЕМОЕ СЧАСТЬЕ Высокое содержание сперматозоидов с фрагментированной ДНК было выявлено для 55 -ти из 100 пациентов: Заключение спермограммы Количество, N Количество, % Олигозооспермия 16 (34) 47, 0 % Астенозооспермия 21 (25) 84, 0 % Тератозооспермия 10 (21) 47, 6 % Нормоспермия 2 (20) 10, 0 %
ВАШЕ ПЛАНИРУЕМОЕ СЧАСТЬЕ Индекс ЧФБ для пациентов с высоким и нормальным содержанием сперматозоидов, несущих фрагментированную ДНК Уровень фрагментации ДНК Количество пациентов Индекс ЧФБ в программе ЭКО, % Получена клиническая беременность Фрагментация ДНК: менее 20, 0 % 45 (из 100 человек) 48, 33 % 44, 4 % (20 человек) Фрагментация ДНК: более 20, 0 % 55 (из 100 человек) 25, 26 % 23, 6 % (13 человек)
ВАШЕ ПЛАНИРУЕМОЕ СЧАСТЬЕ Терапия ИППП проведена для 116 -ти пациентов: 42 пациента с высоким уровнем фрагментации ДНК в сперме, после неудачной попытки ЭКО; 74 пациентов с высоким содержанием анеуплоидий в сперме
Антибактериальная терапия: Вильпрафен по 1 табл. 2 раза после еды в день в течение 10 дней, затем Юнидокс Солютаб по 1 табл. 2 раза в день еще 10 дней.
ВАШЕ ПЛАНИРУЕМОЕ СЧАСТЬЕ Контроль после лечения 42 -х пациентов с высоким уровнем фрагментации ДНК в сперме Уровень фрагментации ДНК Количество пациентов Индекс ЧФБ в программе ЭКО, % Получена клиническая беременность Фрагментация ДНК: менее 20, 0 % 32 (76, 1 %) 51, 14 % 46, 9 % (15 человек) Фрагментация ДНК: более 20, 0 % 10 (23, 9 %) 27, 8 % 20, 0 % (2 человека)
ВАШЕ ПЛАНИРУЕМОЕ СЧАСТЬЕ Контроль после лечения 74 -х пациентов с высоким уровнем анеуплоидий в сперме Уровень анеуплоидий в сперме До лечения После лечения Уровень анеуплоидий более 1, 3 % 61, 7 % (74 человека) 27, 0 % (20 человек) Уровень анеуплоидий менее 1, 3 % 38, 3 % (46 человек) 72, 9 % (54 человека)
ВАШЕ ПЛАНИРУЕМОЕ СЧАСТЬЕ Выводы Выявлено значительное превышение содержания анеуплоидных сперматозоидов для мужчин с олигозооспермией по сравнению с наличием анеуплоидий в ядрах сперматозоидов для мужчин с астено- и тератозооспермией (р<0, 05). Содержание сперматозоидов с поврежденной ДНК значительно чаще выявляется у пациентов с показателями спермограммы, отличными от нормы (p < 0, 05). Индекс ЧФБ значительно выше для пациентов с содержанием сперматозоидов, несущих фрагментированную ДНК, в пределах нормы, по сравнению с пациентами с повышенным содержанием сперматозоидов с нарушением целостности ДНК (p < 0, 05). ИППП могут быть причиной генетических нарушений мужских гамет. Своевременное лечение позволяет снизить уровень ДНКфрагментации и содержания анеуплоидий в хромосомах сперматозоидов.
ВАШЕ ПЛАНИРУЕМОЕ СЧАСТЬЕ СПАСИБО ЗА ВНИМАНИЕ!
Скачать презентацию ВАШЕ ПЛАНИРУЕМОЕ СЧАСТЬЕ Влияние ИППП на качество эмбрионов
Доклад АМ на Металлист 17.12.15.pptx