Валидация аналитических методик Валидация

Валидация аналитических методик

• Валидация – • Валидация -

Цель: • 1. минизация и количественная оценка возможности возникновения ошибок • 2. • 3. одним методом можно определять разные вещества • 4.

• 5. Один метод на разном оборудовании – различная точность (погрешности) • 6. Методика – метод + пробоподготовка – погрешности • 7. Персонал (случайные ошибки)

Какие аналитические процедуры валидируются

Валидация требуется для следующих групп методик • Идентификация веществ _________________ • Количественное определение _________________ • Контроль предельно допустимых значений содержания примесей • Определение количественного содержаний веществ в ЛП

Особенности

Основные документы, регламентирующие процесс валидации: • общая фармакопейная статья ОФС в USP, • ОФС РФ «Валидация фармакопейных методов» , • ГОСТ РФ «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений» , • ГОСТ Р ИСО 5725 -1 -2002 (является полным аутентичным текстом международного стандарта ИСО 5725 -1 -1994), • документы IUPAK (Международный союз фундаментальной и прикладной химии) и ICН — международной конференции по гармонизации технических требований к регистрации лекарств для человека в странах ЕС, Японии и США.

Документы • ICH – международная организация по гармонизации • Q 2 A руководство по валидации аналитических методик • - термины и определения • Содержит основные этапы и принципы • Q 2 B Процедура проведения валидации аналитических методов • Рекомендации по отдельным этапам

организация процесса валидации методики • 1. Разработать протокол валидации или рабочий процесс для валидации, в котором определить приложение, цель и область метода, эксплуатационные параметры и критерий приемки, валидационные эксперименты; 2. Определить необходимые рабочие характеристики оборудования, квалифицировать материалы, например, стандарты и реактивы; 3. Исполнить эксперименты предвалидации, корректировать параметры метода или критерии приемки в случае необходимости; 4. Исполнить полные внутренние и внешние эксперименты валидации; 5. Разработать СОП (стандартную операционную процедуру) для рутинного выполнения метода, определить критерии для ревалидации; 6. Определить тип и частоту испытаний пригодности метода; 7. Документировать эксперименты и результаты валидации в отчете.

Валидационные характеристики аналитических методов • • ___________(precision) __________ (accuracy) ; __________ (reproducibility) ; __________ (repeatability) __________ (robustness) ; __________ (linearity); ___________________ (range) _____________________ (specificity) ; • ___________ (limit of detection -LOD ) ; • ______________________ (limit of quantitation LOQ);

Взаимосвязь параметров валидации

Точность (рrecision) - Показатель правильности - значение систематической ошибки. Правильность оценивается на основе не менее 9 результатов определений по всему диапазону концентраций (_______________________________________) и не менее 6 определений при 100%

Правильность (аccuracy, тrueness) - • зависит только от случайных факторов • не связана с истинным значением измеряемой величины • выражается величиной стандартного отклонения (коэффициент вариации) • показатели прецизионности - повторяемость (сходимость) и воспроизводимость

повторяемость (repeatability) - степень согласованности результатов измерений (испытаний), полученных одним и тем же методом на идентичных объектах испытаний, в одной и той же лаборатории, одним и тем же испытателем, с использованием одного и того же оборудования, в пределах короткого промежутка времени. Повторяемость оценивается величиной относительного стандартного отклонения Sr , которая не должна превышать 2%.

Воспроизводимость (reproducibility) - мера совпадения результатов измерений, полученных одним и тем же методом, на идентичных образцах, в разных лабораториях, разными испытателями, с использованием различного оборудования. Воспроизводимость: Оценивается величиной относительного стандартного отклонения Sr, которая не должна превышать 3%. Выражает точность результатов испытаний, проведенных в условиях различных лабораторий

Устойчивость (robustness) - (изменение состава, скорости потока или р. Н мобильной фазы в методах ВЭЖХ, температуры в ГХ, длины волны в УФВ- методах, р. Н среды и др. ) Изучаются в ходе робастности: • Параметры методики • Стабильность растворов • ВЭЖХ – смена колонки

Линейность результатов (linearity) - • Проводят повторные определения каждой концентрации • Строят график линейности • Статистическая обработка результатов – наклон прямой, сумма квадратов, коэффициент корреляции (должен быть не меньше 0, 995).

Специфичность, селективность (specifity, selectivity) – Определяется: способностью достоверно определять лекарственное вещество в присутствии примесных соединений, продуктов деградации и вспомогательных веществ.

Предел обнаружения (limit of detection) - Предел обнаружения обычно выражается как концентрация анализируемого вещества в образце, например, в % или долях на миллион (ppm), миллиард (ppb). Соотношение сигнал/шум (для методов с базовыми шумами)

Пригодность системы (system suitability) • Параметры пригодности системы обеспечивают соблюдение валидности метода в тех случаях, когда в процессе анализа возможны некоторые внутрилабораторные изменения условий анализа. • Тесты пригодности системы зависят от типа метода, но особенно важны для хроматографических методов.

Аналитические методы • 1. Селективные • 2. Неселективные методы

Категория / типы методик • Категории: • Трансфер (проверка пригодности в условиях конкретной лаборатории) • Методика, разработанная впервые • …. • Типы: • 1. фармакопейные • 2. нефармакопейные (производидитель) • Испытуемые образцы: • Субстанция • ЛП

План валидации • • - первый этап Содержание: Лист утверждения Состав валидационной группы Описание аналитического метода Условия эксперимента Порядок проведения валидации и критерии приемлемости • График проведения • Бланки-формы

План валидации Лист утверждения Этапы работы /ответственность Подготовка протокола валидации Выполнение валидационных испытаний в соответствии с утвержденным протоколом Согласование протокола Утверждение протокола, корректирующих действий Должность (Ф. И. О. ) Подпись дата

Порядок тестирования валидационных характеристик • • Специфичность Точность Диапазон Пределы Правильность Линейность Робастность

Использование параметров валидации для различных типов АМ Параметр валидации идентификация Определение примесей количественно Специфичность + Правильность пределы + + Определение содержания + + + Повторяемость + + Промежуточная точность + + LOD + LOQ + Линейность + + Диапазон + + Точность устойчивость + + +

Валидационные документы

Валидация спектрофотометрических методик • При проведении валидации необходимо доказать, что методика позволяет контролировать качество данного ЛС на оборудовании и в условиях данной лаборатории, а также в любой другой лаборатории на любом другом оборудовании, при условии, что оно отвечает требованиям Фармакопеи и/или дополнительным требованиям. • Особенностью валидации многоволнового СФанализа - прогноз погрешности должен обязательно предшествовать экспериментальной валидации — бессмысленно экспериментально проверять методику, которая заранее дает неприемлемо высокую погрешность.

• В отчет о валидации методики обычно рекомендуется включать: • — цель и контекст метода (область применения, процедура); — тип анализируемых веществ и матрицы; — детальную информацию о реактивах, эталонах и приготовлении контрольных (стандартных) образцов; — процедуры для проверок качества стандартов и используемых реактивов; — соображения безопасности; — параметры метода; — критические параметры, установленные при испытании прочности; — перечень оборудования и его функциональных и эксплуатационных характеристик, например (для хроматографии), размеры ячейки, шум базовой линии, диапазон температур колонки;

• — детальные условия проведения экспериментов, включая подготовку пробы; — процедуры вычислений и статистической обработки результатов; — процедуры для контроля качества в процессе эксплуатации методики (например, испытания пригодности системы); — графическую информацию, например хроматограммы, спектры и калибровочные кривые; — пределы эксплуатационных данных для принятия метода; — ожидаемую неопределенность результатов измерения; — критерии для ревалидации; — специалистов, которые разрабатывали и первоначально валидировали метод; — резюме и заключения.