Условно-патогенные микроскопические грибы СПб.

Условно-патогенные микроскопические грибы СПб. ГУ 2015

Царство: Грибы (Fungi) • Отдел Зигомицеты (Zygomycota) Rhyzopus, Mucor Отдел Аскомицеты (Ascomycota) Candida, Aspergillus, Penicillium • Отдел Базидиомицеты (Basidiomycota) макромицеты и криптококки Отдел Дейтеромицеты (Deuteromycota)

Микозы • Заболевания, вызываемые микроскопическими грибами

Микология • Наука о грибах • В последнее время возросла роль микозов в патологии человека

Деление грибов на 2 группы • Патогенные • Условно патогенные (УПГ)

Понятие УПГ • Основано не на таксономических признаках • Группа широко распространенных в природе и разнообразных по морфологическим признакам грибов • род Candida • р. Aspergillus • р. Penicillium • р. Rhizopus • р. Mucor

УП плесневые грибы

Классификация микозов по Н. Д. Шеклаковой (1976). • 1. кератомикозы (разноцветный лишай, пьедра, черепитчатый микоз); • 2. дерматомикозы (эпидермофития; микоз, обусловленный красным трихофитоном; трихофития, микроспория, фавус); • 3. микозы, вызванные УПГ (кандидоз, аспергиллез, пенициллиноз, мукороз); • 4. глубокие или системные (висцеральные) микозы: гистоплазмоз, кокцидиоидоз, бластомикозы, криптококкоз, геотрихоз, хромомикоз, риноспоридиоз); • 5. псевдомикозы - поверхностные формы (эритразма, подмышечный трихомикоз) и глубокие формы (актиномикоз, микромоноспороз, нокардиоз, мицетомы).

Ведущее место в структуре микозов • Занимают УПГ • Это обусловлено отсутствием очагов распространения облигатно-патогенных микроскопических грибов в СЗ регионе РФ

Факторы риска развития грибковых инфекций • Особое физиологическое состояние: беременные, новорожденные, пожилые. • Лечение антимикробными препаратами, кортикостероидами, цитостатиками, иммунодепрессантами, химиотерапия, рентгенотерапия. • Врожденные или приобретенные иммунодефицитные состояния. • Ассоциация с ВИЧ-инфекцией. • Эндокринные нарушения: диабет, дисбаланс гормонов.

Факторы риска развития грибковых инфекций (продолжение) • Лечебные процедуры, послеоперационное состояние, катетеризация. • Опухоли, ожоги. • Неблагоприятные профессиональные условия: напр. производство антимикробных препаратов, сопряженное с повышенной аллергизацией организма. • Токсикомания, наркомания. • Многие инфекционные заболевания, например: туберкулез и др.

Тенденция увеличения роли УПГ Связана: • с возрастанием числа больных с иммунодефицитными состояниями • применением антимикробных препаратов

Распространение • У 20% населения микотические инфекции • Самые частые – дерматофитии (поражение кожи, волос, микоз стоп, ногтей) • Это уже сигнал!!! • В СЗ регионе РФ – ведущая роль в микотической патологии человека связана с дрожжевыми грибами р. Candida

Кандидоз • микотическая инфекция, вызываемая дрожжевыми грибами р. Candida

Актуальность проблемы кандидозов • Связана с ростом числа этих заболеваний • Кандидоз – маркерное (индикаторное) заболевание при ВИЧ-инфекции

Заеды в уголках рта вызваны C. albicans

Кандидоз кожи

Кандидоз полости рта

Микропрепарат легкого при остром кандидозе

Кандидоз кишечника

Исход контакта грибов р. Candida с человеком • Стойкое носительство • Кратковременное пребывание на коже и слизистых оболочках • Заболевания различной локализации: 1. Первичные или поверхностные (чаще всего у детей); 2. Вторичные или висцеральные; 3. Генерализованные

Висцеральные формы кандидоза • Глубокие поражения кожи и внутренних органов развиваются на патогенетическом фоне • Для избавления от грибов нужно победить этот патогенетический фон

Патогенетический фон • Нерациональная массивная антибиотикотерапия • Нарушение структуры нормальной микрофлоры • Нормальная микрофлора – хороший антагонист как для УПБ, так и для УПГ

ОСОБЕННОСТИ УПГ • Грибы - эукариотические организмы • Мицелиально-дрожжевой диморфизм • Скорость размножения грибов меньше скорости размножения бактерий • Рост в широком диапазоне р. Н (2, 0 -10, 0)

Факторы патогенности грибов • Адгезия • Колонизация • Пенетрация через эпителий и последующая инвазия • Наличие в клеточных стенках большого числа углеводных компонентов, поэтому антигенные свойства менее выражены • Токсические свойства грибов

Схема строения дрожжевой клетки • Д – диктиосома (часть ап. Гольджи); • Ж – жировая капля; • Кст – клеточная стенка; • Мит – митохондрия; • П – полифосфатная гранула; • ПМ – плазматическая мембрана; • Руб – рубец на месте отпочковавшейся дочерней клетки; • ЦПл – цитоплазма; • ЭР – эндоплазматический ретикулум; • Яш – ядрышко

Поверхностные структуры грибов хитин ЦПМ β-(1, 6) глюканы маннопротеины эргостерол β-(1, 3) глюкан каспофунгин синтетазы β-(1, 3)глюкан

Структурные компоненты клеточной стенки грибов маннопротеин эргостерол

Состав клеточной стенки C. albicans Углеводы: • манноза - 86% • глюкоза - 6% • белки составляют 7% • хитин (больше в мицелиальной форме)

Дрожжевые грибы р. Candida Бесспоровые дрожжи - псевдомицелий: - может быть хорошо развитым, рудиментарным - или отсутствовать; - некоторые виды образуют истинный мицелий.

Таксономия рода Candida • C. albicans • C. tropicalis 196 видов • C. pseudotropicalis • C. stellatoidea • C. krusei • C. guilliermondii

Распространение • Широко распространены в природе: • На растениях, плодах, овощах, фруктах • Постоянные контакты с человеком • Обнаружение C. albicans у здоровых людей: • Полость рта – 50 -60% • Кишечник – 20 -50% • Вагина – 10 -20%

Основная проблема диагностики кандидозов • C. albicans встречаются повсеместно!!!!! • Поражены ли ими ткани?

Морфологические формы C. albicans 1. дрожжевая округлая, диаметр 5 -8 мкм 2. мицелиальная – нити различной длины 3. псевдомицелий – нити из удлиненных клеток

Морфологические формы C. albicans

Дрожжевая форма, образование бластоспоры C. albicans

Размножение почкованием - образование бластоспор (дочерних клеток) C. albicans

Ультратонкий срез дрожжевой клетки С. albicans диаметр 5 х 8 мкм

Ростковые трубки C. albicans

Ростковая трубка C. albicans

Стадии развития C. albicans: дрожжевая, мицелиальная, ростковые трубки, рубцы

Дрожжевая клетка и псевдомицелий C. albicans

Псевдомицелий C. albicans

Мицелий 1 3 4 2

Образование хламидоспор (10 -12 мкм) C. albicans на рисовом агаре

Образование клетками C. albicans хламидоспор на рисовом агаре

Хламидоспоры C. albicans

Культуральные свойства C. albicans • Факультативный анаэроб • Среда Сабуро, Чапека • Опт. То – 20 -37 о. С • Устойчивы к воздействию факторов окружающей среды

Колонии C. albicans Среды для культивирования: Сабуро, Чапека, пивное сусло, среды на основе овощей (картофельный, капустный, морковный, рисовый агар)

АГ структура C. albicans • По строению поверхностных полисахаридных АГ делят на 6 групп: A, B, C, D, E, F – они же низкомолекулярные токсины • Структура белковых АГ меняется при переходе из дрожжевой в мицелиальную форму • Серологические методы в диагностике - не главные!!!

Факторы патогенности C. albicans • Аллергические реакции - алкогольдегидрогеназа и кислый Р 2–белок • Адгезия, коадгезия, рецепторы гликолипиды • Инвазия • Диссеминация • Экзоферменты: 1. Фосфолипаза 2. Экзоклеточная протеиназа

Токсины C. albicans • Экзотоксин – кандитоксин (сильный аллерген) • эндотоксин – паприн • Низкомолекулярные токсины - полисахариды - A, B, C, D, E, F) • Действие токсинов: снижают количество Т-клеток (в 15 раз) • риск аутоиммунных заболеваний • подавляют пролиферацию лимфоцитов • снижение активности фагоцитов и клеточного иммунитета • аллергены

Патогенез при кандидозе • Инвазию ограничивают нейтрофилы • Образуют скопления вокруг грибов в виде микроабсцессов • Нейтрофилы не способны фагоцитировать мицелиальные формы • Фунгицидные системы макрофагов и лимфоцитов менее активны, чем нейтрофилов

Незавершенный фагоцитоз клеток C. albicans нейтрофилами и моноцитами

Фагоцитоз дрожжевых форм C. albicans

У здорового человека и у носителей никогда не будет УПГ в крови, конъюнктиве, ушной сере, носовой полости и в желудке

Лабораторная диагностика кандидоза • Нет проблемы с диагностикой поверхностных форм • Висцеральные формы кандидоза не имеют своей собственной клинической картины • Для постановки диагноза необходимо 3 раза выделить один и тот же вид Candida

Материал на исследование • В зависимости от локализации: мокрота, промывные воды бронхов, пунктат плевры, моча, кровь и т. д. • Характер мокроты (гной, кровь, много лейкоцитов)

Типы врастания мицелия на картофельном агаре • Тип кандида - ветвление 1 -го порядка (характерно для C. albicans) • Тип микокандида - ветвление 2 -го и 3 -го порядка (C. pseudotropicalis).

Биохимические свойства: короткий ряд сахаров для C. albicaus • глюкоза К+Г+ • мальтоза К+Г+ • лактоза - • сахароза К+Г-

Серологические реакции • РА • РНИФ • метод встречного иммуноэлектрофореза (ВИЭФ)

Метод встречного иммуноэлектрофореза (ВИЭФ) дуги преципитации

Чувствительность УПГ к АМП • Поверхностный кандидоз - раствор буры, краска Кастелляни (фукорцин) • Производные аморолфина: ламизил - крем, лоцерил - лак. • Диссеминированный и хронический кожно- слизистый кандидоз - амфотерицин B • Кандидоз кишечника, мочевыводящей системы- микогептин, нистатин, леворин • Группа имидазола: клотримазол, кетоконазол, дифлюкан (флюконазол)