УЧАСТИЕ МИКРООРГАНИЗМОВ В КРУГОВОРОТЕ АЗОТА 1 Круговорот азота

УЧАСТИЕ МИКРООРГАНИЗМОВ В КРУГОВОРОТЕ АЗОТА 1. Круговорот азота 2. Свободноживущие азотфиксаторы 3. Симбиотическая фиксация азота у бобовых растений 4. Симбиотическая азотфиксация у небобовых растений 5. Химизм фиксации микроорганизмами молекулярного азота Азот – это вечный источник танталовых мук человечества, вечные терзания голода среди роскошного изобилия (американский биохимик М. Камен)

КРУГОВОРОТ АЗОТА

АЗОТ Запасы газообразного N 2 в атмосфере неисчерпаемы (79 %). Над 1 км 2 земной поверхности в воздухе - около 8 млн. т N 2, Источник «N» для растений – минеральный «N» , в почве его сравнительно немного (150 кг/га). Мировое сельское хозяйство ежегодно выносит с урожаем 110 млн. т «N» . Для пополнения запасов «N» в почве его постоянно вносят в виде удобрений (аммонийная селитра, навоз, торф, компосты). На синтез азотных удобрений в США расходуется 2, 5 % годовой добычи природного газа. N 2 – инертное соединение, он не доступен высшим организмам. Его фиксируют только прокариоты, за счет которых в почву ежегодно поступает 60 -75% азота от общего содержания его в почве.

ФИКСАЦИЯ АТМОСФЕРНОГО АЗОТА Фиксировать N 2 способны более 30 видов бактерий: клостридии, энтеробактерии, сульфатредукторы, спириллы, актиномицеты, цианобактерии. В природе азотфиксация происходит биологическим и небиологическим путями (газовые разряды, работа двигателей внутреннего сгорания - 0, 5 % фиксированного «N» , в то время как общая продукция биологической фиксации «N» – 300 млн. т в год.

ОТКРЫТИЕ АЗОТФИКСАТОРОВ Впервые обогащение субстратов «N» в результате деятельности свободноживущих микроорганизмов показал французский ученый Жоден (1882). М. Бертло (1885) подтвердил это. М. Бейеринк (1901) открыл Azotobacter chroococcum (семейство Azotobacteriaceae). М. Бейеринк (1851 -1931, Голландия) Пьер–Эжен Марселен Бертло (1827 -1907, Франция)

СВОБОДНОЖИВУЩИЕ АЗОТФИКСАТОРЫ Az. agilis Azotobacter chroococcum Az. vinelandii Цuсты

Azotobacter Молодые клетки Azotobacter – аэробные палочки, позже они превращаются в крупные кокки, которые покрываются капсулой и содержат разные включения (жир, крахмал). Иногда превращаются в цисты. Палочковидные клетки микроба имеют жгутики, подвижны. При переходе палочек в кокки жгутики теряются. Источник «N» – соли аммония, нитриты, нитраты и аминокислоты. При отсутствии связанных форм «N» фиксируют N 2. Активные культуры связывают 15 -20 мг N 2 на 1 г потребленного органического вещества.

Пищевые потребности Azotobacter использует огромный набор органических соединений – моно- и дисахариды, некоторые полисахариды (декстрин, крахмал), спирты, органические кислоты, в том числе ароматические. Проявляет высокую потребность в органических веществах, поэтому он в больших количествах встречается в нейтральных влажных почвах, богатых органикой, особенно весной. Летом в засуху клетки отмирают. Для роста нужен фосфор, кальций, молибден, его используют в качестве биологического индикатора на наличие этих элементов в почве.

Beijerinckia К семейству Azotobacteriaceae относится род Beijerinckia. Она отличается кислотоустойчивостью (р. Н около 3), кальцифобностью. Впервые выделена из кислых почв рисовых полей Индии Р. Старки и П. Де (1939). Ее сначала назвали Azotobacter indicum. Клетки Beijerinckia палочковидной, овальной или круглой формы. Некоторые виды подвижны, другие неподвижны. Иногда образуют капсулы. Цисты и эндоспоры отсутствуют. На безазотной среде с глюкозой дают выпуклые, блестящие, нередко складчатые слизистые колонии, которые при старении окрашиваются в красноватый или темно-коричневый цвет.

Пищевые потребности Beijerinckia В отличие от Azotobacter, Beijerinckia не усваивает ароматические соединения и хуже ассимилирует органические кислоты. При развитии на углеводах в среде накапливаются уксусная и другие органические кислоты. Beijerinckia менее требовательна по сравнению с Azotobacter к фосфору, менее чувствительна к повышенной концентрации солей «Fe» и «Al» , нуждается в меньшем количестве молибдена. Распространена в кислых почвах субтропиков и тропиков, реже встречается в почвах умеренной зоны. В окультуренных кислых почвах юга содержится больше клеток Beijerinckia, чем в целинных. Целинные луговые почвы богаче Beijerinckia, чем лесные.

СВОБОДНОЖИВУЩИЕ АЗОТФИКСАТОРЫ Derxia - медленно растущие палочки, обладающие в определенной стадии развития жгутиком. Колонии пленочные или слизистые, при старении желтовато-коричневые. Derxia обнаружена в почвах тропиков, как и бактерии рода Azomonas, также близкие к азотобактеру. Azomonas agilis Derxia gummosa

СВОБОДНОЖИВУЩИЕ АЗОТФИКСАТОРЫ Klebsiella (семейство Enterobacteriaceae) – Г–, факультативноанаэробные палочки подвижные перитрихи. Они выносят низкое значение р. Н, встречаются в лесных подзолистых почвах, а в зоне умеренного климата – под травянистой растительностью. К зотфиксаторам относятся род Erwinia, некоторые расы Pseudomonas fluorescens (в почвах северной зоны), вибрионы спириллы (Azospirillum lipoferum и Az. brasilense), Arthrobacter Azospirillum lipoferum Pseudomonas fluorescens Klebsiella sрp.

АНАЭРОБНЫЕ АЗОТФИКСАТОРЫ Clostridium pasteurianum (С. Н. Виноградский, 1893) – анаэробная спорообразующая палочка. Молодые клетки перитрихи, старые образуют споры. В присутствии О 2 Cl. pasteurianum может развиваться только при наличии в среде аэробных бактерий, поглощающих О 2, малочувствителен к реакции среды (р. Н от 4, 5 -5, 5 – 8 -9). Споры Cl. pasteurianum выдерживают нагревание до 96° С в течение нескольких минут. Источник азотного питания – соли аммония, азотной кислоты и содержащие Cl. pasteurianum – слабоактивный азотфиксатор: связывает от 1 до 3 мг, иногда до 10 -12 мг «N» на 1 г сброженного сахара. Способны фиксировать N 2 Cl. butyricum, Cl. acetobutylicum, Cl. pectinovorum, Cl. felsineum. Анаэробные азотфиксаторы – Bacillus polymyxа и некоторые олиготрофные бактерии. Clostridium pasteurianum Bacillus polymyxа

СВОБОДНОЖИВУЩИЕ АЗОТФИКСАТОРЫ На затопленных полях под посевами риса при разложении массы растительных остатков в почве под слоем воды наряду с другими веществами образуются газообразные соединения – Н 2, СН 4, СО 2. Корине- и микобактерии, окисляя Н 2 и ассимилируя СО 2, одновременно фиксируют N 2. СН 4 используется специфическими азотфиксаторами из рода Methylomonas ( монотрихи, не образующие спор). Микобактерии Methylomonas sрp.

СВОБОДНОЖИВУЩИЕ АЗОТФИКСАТОРЫ В воде рисовых полей - азотфиксирующие анаэробы: пурпурные серобактерии (Thiocapsa, Chromatium, Thiocystis), пурпурные несерные бактерии (Rhodospirillum, Rhodopseudomonas), зеленые серобактерии (Chlorobium, Pelodiction). В почвах, загрязненных нефтью - коринебактерии (Arthrobacter). Thiocapsa sрp. Rhodospirillum sрp. Chlorobium sрp. Chromatium sрp. Rhodopseudomonas sрр. Arthrobacter sрр.

ЦИАНОБАКТЕРИИ - АЗОТФИКСАТОРЫ Активные азотфиксаторы – аэробные цианобактерии: Anabaena, Nostoc, Cylindrospermum, Calothris, Tolypothrix и Scytonema. Распространены во всех почвенно-климатических зонах, но предпочитают нейтральную р. Н, поэтому их больше в южных нейтральных почвах. Многие цианобактерии живут в симбиозе с растениями, грибами, образуя при этом лишайники. Фиксируют N 2 при 0° и -5°С. Anabaena sрp. Calothris sрp. Nostoc sрp. Tolypothrix sрp. Scytonema sрp. Cylindrospermum sрp.

СИМБИОТИЧЕСКАЯ ФИКСАЦИЯ N 2 У БОБОВЫХ РАСТЕНИЙ Греческие и римские мыслители (100 -150 лет до н. э. ): бобовые растения повышают плодородие почвы Первые эксперименты в этом направлении – Ж. -Б. Буссенго (1838). М. С. Воронин (1866): описание микроскопических телец в тканях клубеньков. Г. Гельригель и Г. Вильфарт (1886 -1888): взаимосвязь между бородавчатыми наростами на корнях бобовых растений (корневых клубеньков) и фиксацией растениями N 2. В клубеньках обнаружили бактерии. Чистую культуру бактерий выделил М. Бейеринк (1888). М. Бейеринк (1851 -1931) Герман Гельригель (1831 -1895) М. С. Воронин (1838 -1903) Ж. -Б. Буссенго (1802 -1887)

Rhizobium Между бактериями и растениями устанавливаются симбиотические отношения. Клубеньки образуются лишь у представителей семейства Papilionaceae. К бобовым растениям относится около 10 000 видов, 200 используются в сельском хозяйстве. Клубеньковые бактерии относятся к роду Rhizobium – группа родственных микроорганизмов. Это Г– неспорообразующие аэробные палочки. Имеют жгутики, одни из них – монотрихи, другие – перитрихи.

Цикл развития Rhizobium (по В. К. Шильниковой)

Rhizobium При старении Rhizobium теряют подвижность, переходят в состояние опоясанных палочек, которые образуют утолщенные, разветвленные, грушевидные или сферические неподвижные и не размножающиеся бактероиды, энергично усваивающие N 2. Для большинства культур Rhizobium оптимальное значение р. Н 6, 5 -7, 5. Оптимальная температура - около 24 -26 0 С.

Избирательность Rhizobium На плотных средах клубеньковые бактерии обычно образуют бесцветные прозрачные слизистые колонии, иногда с шероховатой поверхностью. Отдельные культуры Rhizobium характеризуются избирательностью (специфичностью) по отношению к растению-хозяину: Rh. leguminosarum – бактерии гороха, вики, кормовых бобов, чечевицы; Rh. phaseoli – фасоли; Rh. japonicum – сои; Rh. vigna – вигны, маша, арахиса; Rh. cicer – нута; Rh. lupine – люпина; Rh. trifolii – клеверов; Rh. meliloti – люцерны, донника, тригонеллы; Rh. simplex– эспарцета; Rh. lotus – лядвенца; Rh. robinii – акации. В некоторых случаях наблюдается сортовая специфичность Rhizobium.

Взаимодействие Rhizobium с растением На поверхности клеточной стенки бобовых - белок, к которому избирательно «прилипают» лишь специфические клубеньковые бактерии через липополисахариды своей клеточной стенки. В ответ на клеточной стенке бобового растения появляется «антитело-белок» – лектин, связывающий полисахариды оболочки Rhizobium. Способность клубеньковых бактерий входить в контакт с корневой системой бобовых и проникать в ткани корня, размножаться там и вызывать образование клубеньков – вирулентность (природное свойство культуры).

Активность штаммов Rhizobium Активность (эффективность) клубеньковых бактерий – способность в симбиозе с бобовыми растениями ассимилировать N 2. В почве могут быть штаммы клубеньковых бактерий эффективные, неэффективные и переходные. Активные расы образуют многочисленные розовые клубеньки на главном корне, на боковых их мало. Цвет придает пигмент леггемоглобин (легоглобин). Клубеньки у неактивных рас Rhizobium зеленоватые. В активных бактероидах не накапливается гликоген.

ОБРАЗОВАНИЕ КЛУБЕНЬКОВ Внедрение бактерий в корни растений - через корневые волоски. Корневая система выделяет триптофан, который превращается в ИУК, вызывающую своеобразное изменение формы корневых волосков, которые изгибаются в виде ручки зонтика. В корневых волосках содержится фермент полигалактуроназа, частично растворяющий компоненты оболочки, что позволяет клетке волоска растягиваться.

Развитие инфекционной нити В корневом волоске клубеньковые бактерии образуют инфекционную нить, которая передвигается к основанию волоска к клеткам эпидермиса. Этот путь она проходит в течение 1 -2 суток. При внедрении в растительные клетки инфекционная нить покрывается оболочкой из целлюлозной оболочки клетки.

ОБРАЗОВАНИЕ КЛУБЕНЬКОВ Клубеньковые бактерии размножаются в тетраплоидных клетках коры и частично эпидермиса корня. Инфицирование клубеньковыми бактериями цитоплазмы растительной клетки вызывает ее активное деление, а также деление соседних незараженных клеток, что приводит к образованию вздутия – клубенька.

Rhizobium в клубеньке

Развитие клубеньков В период образования бактероидов митохондрии и пластиды клетки перемещаются к клеточной оболочке и располагаются вдоль нее. В клубеньках появляется леггемоглобин – переносчик О 2 к бактероидам клубеньков. Со временем клубеньки дегенерируют и отмирают из-за опробковения клеток сосудистой системы, задерживающего обмен питательными веществами между растением-хозяином и тканями клубеньков. В клетках клубеньков появляются вакуоли. Ядро перестает окрашиваться, а бактероиды лизируются, что происходит в пeриод окончания активной жизни клубеньков, обычно совпадающий с некрозом клубеньков во время окончания цветения растения-хозяина.

КЛУБЕНЬКИ НА КОРНЯХ У однолетних растений клубеньки однолетние, у многолетних они функционируют в течение ряда лет. К концу сезона бактероидная ткань клубеньков многолетних растений дегенерирует, но клубеньки не отмирают и на следующий год вновь начинают функционировать.

Взаимоотношения между бобовыми растениями и клубеньковыми бактериями создаются при действии комплекса факторов (оптимальные аэрация, температура, р. Н; присутствие в доступной форме фосфора, калия, микроэлементов и т. д. ). В нейтральных почвах (черноземах) бактерии размножаются лучше, чем в кислых. Окультуривание почв, особенно связанное с внесением органических удобрений, улучшает условия для размножения клубеньковых бактерий. В ризосфере, на клубеньках и на поверхности растений всегда имеются фаги клубеньковых бактерий. В нейтральных и слабокислых почвах фаги более многочисленны.

Sesbania rostrata У тропического бобового Sesbania rostrata клубеньки образуются не только на корнях, но и на стебле и в условиях влажного и жаркого климата активно фиксируют N 2.

СИМБИОТИЧЕСКАЯ АЗОТФИКСАЦИЯ У НЕБОБОВЫХ РАСТЕНИЙ Клубеньки обнаружены у 200 видов из 17 родов древесных, кустарниковых и травянистых растений разных систематических групп. У деревьев и кустарников клубеньки образуются аэробными актиномицетами Frankia. Клубеньки у покрытосеменных деревьев и кустарников – многолетние и крупные. Они формируются на боковых корнях и бывают двух типов – коралловые сферические (у ольхи и облепихи) и с прорастающими через дольки клубенька корнями, направленными вверх (у восковника) - «актинориза» . Клубеньки могут быть у злаковых, осоковых, лютиковых. Frankia sрp.

ЛИСТОВЫЕ КЛУБЕНЬКИ У ряда южных растений обнаружены листовые клубеньки. Из клубеньков кустарников Pavetta и Psychotria выделяются азотфиксирующие бактерии Klebsiella rubacearum. В Шри-Ланка листья Pavetta используют в качестве зеленого удобрения. Pavetta indica Pavetta gardeniofolia Psychotria poeppigiana

УЧАСТИЕ МИКРООРГАНИЗМОВ В КРУГОВОРОТЕ ВЕЩЕСТВ В ПРИРОДЕ 1. 2. 3. Нитрификация Иммобилизация азота Денитрификация

ОБРАЗОВАНИЕ НИТРАТОВ 1. NH 3 + кислоты → аммонийные соли. 2. NH 3 → в атмосферу. 3. NH 3 окисляется до азотистой и азотной кислот (нитрификация). До середины XIX в. образование нитратов – химическая реакция окисления NH 3 О 2, почва – химический катализатор. Л. Пастер: образование нитратов – микробиологический процесс. Первые экспериментальные доказательства: Т. Шлезинг и А. Мюнц (1879).

НИТРИФИКАЦИЯ С. Н. Виноградский (1856 -1953) С. Н. Виноградский (1890 -1892) - чистые культуры нитрификаторов, которые не растут на обычных питательных средах с органическими веществами. Они – хемолитоавтотрофы. 2 группы нитрификаторов: 1 -я – окисление NH 3 до НNО 2 (1 -я фаза нитрификации), 2 -я окисляет НNО 2 до НNО 3 – 2 -я фаза нитрификации.

НИТРИФИКАТОРЫ Относятся к семейству Nitrobacteriaceae. Г–, с различной морфологией: палочковидные, эллипсоидные, сферические, извитые, плеоморфные. Есть подвижные и неподвижные формы с полярным, субполярным и перитрихиальным жгутикованием. Размножаются делением (Nitrobacter – почкованием).

1 -я фаза нитрификации Бактерии 1 -й фазы нитрификации: Nitrosomonas, Nitrosococcus, Nitrosospira, Nitrosolobus, Nitrosovibrio. Nitrosomonas europaea – короткие овальные палочки, проходят ряд стадий развития: подвижные формы с субполярным жгутиком или пучком жгутиков и неподвижные зооглеи. Nitrosomonas europaea

2 -я фаза нитрификации Вторая фаза нитрификации: Nitrobacter, Nitrospira, Nitrococcus (Nitrobacter winogradskyi, Nitrobacter agilis). Nitrobacter – удлиненная клиновидная или грушевидная форма, более узкий конец часто загнут в виде клювика. Размножается почкованием, дочерняя клетка обычно подвижна, т. к. имеет один латерально расположенный жгутик. Оптимум р. Н 7, 5 -8, t 0 развития – 25 -30 0 С. Облигатные аэробы или микроаэрофилы, хемолитоавтотрофы. Nitrobacter agilis Nitrobacter winogradskyi Nitrococcus sp.

a: Nitrobacter winogradskyi - 2, 500 x; b: N. winogradskyi cytomembranes -213, 000 x; c: Nitrosomonas europaea - 2, 500 x; d: cytoplasmic membranes in N. еuropaea.

НИТРИФИКАЦИЯ NH 3 → NH 2 ОН (гидроксиламин) → NOH (нитроксил), либо ONOOH (пероксинитрит) → NO 2 - → NO 3 - Нитроксил и гидроксиламин могут димеризоваться в гипонитрит или превращаться в N 2 О. Нитрификация – на ЦПМ и внутрицитоплазматических мембранах. Фиксация СО 2 нитрификаторами – через цикл Кальвина, в результате образуются углеводы, белки, НК, жиры. Нитрификаторы способны переключаться с автотрофного на гетеротрофное питание.

НИТРИФИКАЦИЯ Этапность нитрификации – характерный пример метабиоза. Накопление нитратов – в прямой зависимости от плодородия почвы. Чем богаче почва, тем больше НNО 3 она может накапливать. Интенсивность нитрификации можно использовать для характеристики агрономических свойств почвы.

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ НИТРАТОВ РАСТЕНИЯМИ NH 4+ поглощается почвой, нитраты легко вымываются из нее и восстанавливаются до N 2 → обедняется азотный запас почвы → существенное снижение коэффициента использования нитратов растениями. В растительном организме нитраты при их использовании для синтеза должны быть восстановлены, на что тратится энергия, NH 4+ используется непосредственно.

Нитрификация – в почвах, озерах, морях, океанах. Nitrosouva aequatorialis Nitrosocystis oceanus Nitrosococcus marinus

ГЕТЕРОТРОФНАЯ НИТРИФИКАЦИЯ Pseudomonas, Arthrobacter, Corynebacterium, Nocardia и грибы из родов Fusarium, Aspergillus, Penicillium, Cladosporium. Гетеротрофная нитрификация – в основном в атипичных условиях (при высоком содержании органических С- и N-соединений в щелочной почве). Гетеротрофные микроорганизмы могут вызывать образование и накопление токсинов; веществ, обладающих канцерогенным и мутагенным действием, а также соединений с химиотерапевтическим действием.

ПРЕВРАЩЕНИЯ НИТРАТОВ 1) они могут быть использованы высшими растениями; 2) могут вымываться в водоемы; 3) закрепляться в клетках микроорганизмов, которые используют нитраты в качестве источника азота; 4) восстанавливаться микроорганизмами до N 2 и NH 3.

ИММОБИЛИЗАЦИЯ АЗОТА Почвенные минеральные формы «N» потребляются микробами и переводятся в белок цитоплазмы – иммобилизация азота. Наблюдается при внесении в почву значительной массы соломы → использование «N» растениями заметно снижается → уменьшение урожая. Иммобилизация – процесс обратный минерализации. Биологически закрепленный «N» после отмирания микроорганизмов превращается в NH 3.

СООТНОШЕНИЕ C: N Превращение азотсодержащих соединений по пути минерализации или иммобилизации полностью определяется соотношением «N» и «С» в органическом веществе, вносимом в почву. Если субстрат имеет узкое соотношение С к N, то при его разложении накапливается NH 3, т. к. микроорганизмам не хватает углеродсодержащих соединений для ассимиляции «N» . Сушеная кровь животных при распаде дает много NH 3 (С : N = 4, 2: 1). В соломе зерновых культур С : N = 100 : 1, при внесении ее в почву – «биологическое закрепление» минерального «N» .

СКОРОСТЬ ИММОБИЛИЗАЦИИ Связана и с типом углеродсодержащего соединения (глюкоза вызывает более быстрое закрепление «N» , чем целлюлоза или лигнин). Органические соединения с соотношением С к N = 20 -25 : 1 и меньшим способствуют накоплению минеральных форм «N» в почве, а вещества с более широким соотношением этих элементов вызывают иммобилизацию азотных запасов. В среднем на каждые 100 г разложенного органического вещества (имеющего 50 г «С» ) микроорганизмы потребляют 2 г «N» .

ИММОБИЛИЗАЦИЯ ДЛЯ АГРОТЕХНИКИ Удобрение почвы под зерновые культуры растительными остатками, бедными «N» , нежелательно → ухудшение азотного питания растений. Соломистые удобрения можно вносить в почву лишь с добавлением азотных удобрений. Осенью иммобилизация полезна, т. к. нитраты и NH 3 связываются и не теряются в результате выщелачивания зимой. Весной «N» , связанный в микробной клетке, ы частично минерализуется и превращается в NH 3 и нитраты, которые затем могут быть использованы растениями. Таким образом, сезон года определяет полезность или вредность иммобилизации. Бобовые растения, фиксирующие в симбиозе с бактериями N 2, не испытывают депрессии от внесения соломистых удобрений.

ДЕНИТРИФИКАЦИЯ Денитрификация в широком смысле – это восстановление, в результате «N» переходит в менее окисленную форму, чем в нитратах. В узком смысле слова – восстановление нитратов до нитритов и далее до N 2: NO 3 → NO 2 → NO → N 2. Это приводит к потере определенного количества почвенного «N» и возврату его в атмосферу.

ПУТИ ДЕНИТРИФИКАЦИИ 2 ферментные системы денитрификации: 1) цитохромная(диссимиляционная), 2) флавопротеидная (ассимиляционная) → Пути восстановления нитратов: ассимиляционный (неспецифический) и диссимиляционный (специфический). Ассимиляционная денитрификация (нитратредукция) → образование в цитоплазме NН 3, который ассимилируется организмом и включается в метаболизм. Диссимиляционная денитрификация – на мембранах для получения энергии, ее конечный продукт – N 2. Achromobacter sp.

ДЕНИТРИФИКАТОРЫ Большинство денитрификаторов – факультативные анаэробы, синтезируют стимуляторы роста растений. Прямая денитрификация: 150 видов из 50 родов почвенных микроорганизмов. Хемоорганогетеротрофы: Pseudomonas, Bacillus, Corynebacterium, Achromobacter. Хемолитоавтотрофы: Micrococcus denitrificans, Thiobacillus denitrificans. Corynebacterium sp. Micrococcus denitrificans Pseudomonas sp.

Thiobacillus denitrificans 5 S + 6 KNO 3 + 2 Н 2 О = 3 N 2 + K 2 SO 4 + 4 KHS 04 Усваивает СО 2 воздуха. В отсутствие органических соединений она окисляет серу до H 2 SO 4 за счет О 2 нитратов. Полученную энергию использует для синтеза органических соединений из СО 2.

ЗНАЧЕНИЕ ДЕНИТРИФИКАЦИИ Широко распространена в пресных и соленых водоемах, в различных типах почв. Основной ущерб сельскому хозяйству – диссимиляционная денитрификация → снижение запасов азота в почве и в водоемах. В результате денитрификации в атмосферу ежегодно поступает свыше 300 млн. т азота. Особенно активно денитрификация протекает в ризосфере растений, на тяжелых, сильно переувлажненных почвах, при слабой аэрации, наличии достаточного количества органических соединений Потери азотных удобрений, вносимых в почву, в результате денитрификации – от 5 до 10%. Для борьбы с денитрификацией рыхление почвы в целях создания аэробных условий жизни денитрифицирующим бактериям. .

КОСВЕННАЯ ДЕНИТРИФИКАЦИЯ Косвенная денитрификация – чисто химический процесс, реакция восстановления, происходящая при взаимодействии нитритов с аминосоединениями, которые образуются в процессе жизнедеятельности различных микроорганизмов: HNO 2 + R-CHNH 2 COOH → RCHOH-СООН + N 2 + H 2 O. Микроорганизмам в этой реакции принадлежит косвенная роль: они образуют исходные продукты реакции – нитриты и аминосоединения. Косвенная денитрификация – только в кислой среде и ее значение невелико, т. к. окультуренные почвы не кислые. Более распространена в природе прямая денитрификация.

МИНЕРАЛИЗАЦИЯ ОРГАНИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ, СОДЕРЖАЩИХ ЖЕЛЕЗО Железо в небольших количествах необходимо для всех существ. В почве – в виде органических и неорганических соединений. Растения усваивают неорганические растворимые соединения железа. Органические вещества, содержащие железо (каталаза, пероксидаза, цитохромы, железопорфириновые соединения), разлагаются микроорганизмами.

МИНЕРАЛИЗАЦИЯ ОРГАНИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ, СОДЕРЖАЩИХ ЖЕЛЕЗО Минерализацию железосодержащих органических соединений осуществляют многие хемоорганогетеротрофные бактерии, актиномицеты, грибы. Органическую часть молекулы, содержащей железо, использует микроб, железо освобождается и в аэробных условиях откладывается в виде гидрата окиси железа на поверхности клеток микроорганизмов. Такие микроорганизмы обитают в водоемах (Blastocaulis) и в почвах (Hyphomicrobium, Seliberia). Blastocaulis sp. Hyphomicrobium sр. Seliberia sр.

ЖЕЛЕЗОБАКТЕРИИ Железобактерии, окисляющие неорганические соединения железа в болотах, ручьях, железистых источниках, озерах, дренажных трубах и других водоемах с образованием охристых осадков: нитчатые бактерии (Leptothrix, Crenothrix), Gallionella, Metallogenium. Crenothrix sр.

Leptothrix – нитчатые хемоорганогетеротрофные железобактерии, образующие цепочки клеток. Их боковая поверхность выделяет Fe(OH)3, который образует цилиндрический чехол, покрывающий всю цепочку. По мере утолщения чехла ограничивается доступ к клеткам закисного железа, О 2 и СО 2 → бактерии покидают старые чехлы, медленно выходя наружу, затем одеваются новыми чехлами. Пустые чехлы, скапливаясь, образуют охристые осадки в водоемах: 4 Fе 2(СО 3)3 + 6 Н 2 О + О 2 = 4 Fe(OH)3 + 4 СО 2 Leptothrix ochracea свободно плавает в воде, не прикрепляясь к субстрату, размножается поперечным делением клеток.

Gallionella Типичный представитель – Gallionella ferruginea – вибриоидные клетки со жгутиками. Клетки расположены на длинном плоском, спиральноперекрученном стебельке. Одна сторона клетки вогнутая, другая – выпуклая, выделяющая наружу отложение коллоидного Fe(OH)3, из которого постепенно образуется стебелек. При делении клетки стебелек расходится, образуя дихотомическое ветвление. Стебельки способны к самостоятельному росту и на них возникают клеточные образования. В стебельках обнаружен белок. Стебельки – живые образования, а не мертвые части железобактерий.

Thiobacillus ferrooxidans Хемолитоавтотроф, получающий энергию в результате окисления закисного железа и использующие углерод из СО 2 – сероокисляющая Thiobacillus ferrooxidans. Окисление закисного железа дает малый выход энергии, и для поддержания роста бактерии расходуют большое количество железа: для образования 1 г сырой биомассы клеток бактерии должны окислить около 500 г сернокислого железа. Thiobacillus ferrooxidans