ТУБЕРКУЛЕЗ (Определение, этиология, эпизоотология, клиническая картина, патизменения) лекция + практические занятия
Историческая справка. Туберкулез известен человечеству с глубокой древности. Гиппократ (4 век до н. э. ) описал клинические признаки туберкулеза у человека и рекомендовал способы лечения. Термин «туберкулез» впервые употребил французкий врач Ленек (1819 г) в 1869 г. Виллемен установил заразительность туберкулеза. Возбудителя болезни в 1882 году открыл Р . Кох. Он же в 1890 г изготовил диагностический препарат-туберкулин. В 1924 г. А Кальметт и С. Герен изготовили вакцину БЦЖ — для специфической профилактики туберкулеза у людей. Туберкулез регистрируется во многих странах мира. Искорененние туберкулеза — серьезная проблема и особенно актуальная потому, что болезнь является зооантропонозной и антропозоонозной.
Возбудитель болезни -Mycobacterium tuberculosis, палочка длиной от 0, 5 до 8µ, часто согнутая под углом, иногда представляется в виде зернышек, расположенных по одной линии. Микроб — строгий аэроб, не подвижен, спор не образует, кислотоупорен, а также спирто -и антиморфиноустойчив. Кислотоупорность туберкулезной палочки используется для дифференциации ее от других некислотоупорных бактерий. .
Mycobacterium tuberculosis (человеческий вид) вызывает заболевание туберкулезом у человека. К данному виду микобактерий восприимчивы также свиньи, кошки, собаки, рогатый скот, пушные звери, а птицы (за исключением попугаев) не восприимчивы. Micobacterium bovis (бычий вид) вызывает заболевание туберкулезом у всех видов сельскохозяйственных, диких животных, в том числе пушных зверей, а также человека. Птицы к данному виду микобактерий не восприимчивы. Mycobacterium avium (птичий вид) вызывает заболевание туберкулезом домашних и диких птиц, к данному виду микобактерий восприимчивы свиньи. Животные других видов и человек заражаются редко. В природе (в торфе и почве) существуют условно-патогенные атипичные и сапрофитные микобактерии которые по своим морфологическим и культуральным свойствам близки к микобактериям птичьего типа.
Эпизоотологические данные. К туберкулезу восприимчивы более 55 видов домашних и диких животных и около 25 видов птиц. Наиболее восприимчивы: крупный рогатый скот и свиньи, из пушных зверей – норки, птиц - куры. Реже туберкулезом заболевают козы, собаки, из птиц - утки и гуси. Очень редко болеют овцы, лошади, кошки. Основным источником возбудителя инфекции при туберкулезе являются больные животные и люди Факторы передачи возбудителя : корма, вода, подстилка, навоз, сперма и пр. пути передачи: молочные продукты, сало, мясо, воздушно-капельный, скученность, через плаценту от больной туберкулезом матери к плоду, нарушения правил асептики, антисептики и в ходе БЦЖ-вакцинации
Патогенез. Проникнув в организм животного с вдыхаемым воздухом или через пищеварительный тракт, туберкулезные бактерии попадают в легкие или другие органы лимфогенным и гематогенным путями. На месте локализации туберкулезных бактерий развивается воспалительный процесс с последующим образованием туберкулезных узелковтуберкулов величиной до чечевичного зерна, сероватого цвета, округлой формы. В центре туберкулы отмершие клетки под действием токсинов микобактерии превращаются в творожистую массу. В зависимости от резистентности организма и вирулентности бактерий туберкулезный процесс может протекать доброкачественно и злокачественно. В резистентном организме туберкулезные бактерии окружаются эпителиоидными клетками, из которых в дальнейшем образуются гигантские клетки. Вся эта группа клеток окружается кольцом из лимфоцитов. Между клетками отлагается экссудат и свертывается фибрин. Формирующийся бессосудистый туберкулезный бугорок (гранулема) инкапсулируется. Тканевые клетки в бугорке отмирают из-за отсутствия притока питательных веществ, и под воздействием токсинов бактерий образуется творожистая масса, пропитывающаяся известковыми солями. При таком доброкачественном течении болезни, в таком инкапсулированном очаге туберкулезные бактерии погибают и развитие инфекционного процесса прекращается.
У крупного рогатого скота довольно часто наблюдается туберкулез серозных оболочек (плевры, брюшины) — «жемчужница» . При этой форме болезни воспаление с самого начала носит продуктивный характер. Туберкулезные бугорки подвергаются фибринозному перерождению и превращаются в плотные блестящие наросты.
В случае генерализации туберкулезного процесса и обширных поражений легких нарушается газообмен, токсины туберкулезных бактерий снижают эритропоэз, что вызывает анемию. Если к этому присоединяется поражение кишечника, сопровождающееся нарушением всасывания питательных веществ, то у животного наступает истощение и смерть.
Течение и симптомы болезни. Длительность инкубационного периода при туберкулезе колеблется от двух до шести недель. Туберкулез у животных протекает хронически или латентно, поэтому клинические признаки болезни могут появляться через несколько месяцев или даже лет после инфицирования. Туберкулез свиней наблюдается в хозяйствах, где имеется больной туберкулезом крупный рогатый скот или птица. Болезнь у свиней протекает преимущественно бессимптомно. Наиболее характерными клиническими признаками является увеличение подчелюстных, заглоточных и шейных лимфатических узлов. Лошади болеют туберкулезом сравнительно редко, преимущественно в хозяйствах, где крупный рогатый скот болеет туберкулезом, и болезнь у них чаще всего протекает латентно. У овец и коз туберкулез в основном протекает так же, как и крупного рогатого скота. Чаще заболевание бывает бессимптомным. При сильно выраженном туберкулезном процессе у больных наблюдаем кашель, истечение из носа, исхудание. У коз поражение вымени характеризуется образованием твердых, бугристых припухлостей, достигающих иногда значительной величины. Туберкулез верблюдов. Поражаются шейные и подчелюстные лимфатические узлы; отмечается кашель, повышается потливость, наблюдается быстрая утомляемость. Из пушных зверей к туберкулезу восприимчивы серебристо-черные лисицы, норки и нутрии. Чаще заболевает молодняк.
Туберкулез птиц. Чаще заболевают куры, значительно реже гуси, утки индейки. Болезнь протекает хронически с весьма неясными клиническими признаками. Наблюдается побледнение и сморщенность гребня, птица малоподвижная, яйценоскость снижается, грудные мышцы атрофируются. Генерализация туберкулезного процесса сопровождается поражением кишечного тракта. Наблюдаются рвота, понос, вызывающие резкое истощение птицы. Иногда поражаются кости, суставы, отмечается хромота. У больной птицы развивается анемия: количество эритроцитов падает до 1 млн. , содержание гемоглобина до 35%.
Патологоанатомические изменения. При вскрытие легких обнаруживают плотные очаги красновато-серого или желтоватого цвета. Содержимое очагов творожистое или известкововидное. Иногда очаги имеют вид гнойных фокусов, окруженных тонкой соединительнотканной капсулой. Вокруг таких очагов рассеяны узелки различной величины, от булавочной головки до просяного зерна. Характерно также наличие каверн, окруженных плотной капсулой.
лабораторные занятия КЛИНИКО-ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ТУБЕРКУЛЕЗА История лабораторной диагностики туберкулеза берет начало с середины XIX века. Первое гистологическое исследование специфической гранулемы было выполнено в 1852 г. выдающимся хирургом Н. И. Пироговым. Он описал гигантские клетки, содержащиеся в туберкулезном бугорке (многоядерные клетки Пирогова-Лангханса). Этиологическую лабораторную диагностику туберкулеза впервые осуществил немецкий бактериолог Роберт Кох в 1882 г. , открывший возбудителя этого заболевания. Исследование кожной чувствительности к микобактериям туберкулеза было предложено австрийским патологом и педиатром Клеманс фон Пирке в 1907 г. Для проведения накожной пробы он использовал туберкулин Коха - препарат, содержащий антигенный материал микобактерии туберкулеза (Р. Кох получил в 1890 г. водно-глицериновую вытяжку туберкулезных культур, названную туберкулином, и предложил использовать ее для лечения туберкулеза). проведении первичной диагностики туберкулеза. Все методы лабораторной диагностики туберкулеза можно разделить на специфические (этиологические) и неспецифические.
Диагноз на туберкулез ставят комплексно с учетом эпизоотических данных, клинических признаков и результатов аллергического, патологоанатомического, гистологического, бактериологического и биологического исследований. Клинический метод диагностики имеет ограниченное значение, так как применительно к крупным видам животным при помощи этого метода удается выделить очень мало больных туберкулезом. Основным методом прижизненной диагностики туберкулеза является аллергический. Позволяет выявлять больных с любыми формами туберкулеза, независимо от того, имеет ли животное клинические признаки болезни или нет. Для диагностики туберкулеза у крупного рогатого скота, буйволов, свиней, коз, овец, лошадей, верблюдов, собак, обезьян и пушных зверей применяют туберкулин- стерильный фильтрат убитых культур возбудителя туберкулеза двух видов: сухой очищенный (ППД) туберкулин для млекопитающих и ППД- туберкулин для птиц. Туберкулин ППД для птиц готовят из возбудителя туберкулеза птичьего вида и применяют для диагностики туберкулеза птиц и свиней. Основным прижизненным методом диагностики туберкулеза у животных - аллергическая внутрикожная туберкулиновая проба. У лошадей, верблюдов, буйволов диагностику проводят глазным методом (офтальмопроба). При необходимости офтальмопробу проводят и у крупного рогатого скота одновременно с внутрикожной пробой.
Туберкулинизации подвергают: крупный рогатый скот (буйволов) два раза в год: весной, перед выгоном на пастбище, и осенью, перед постановкой скота на зимнее содержание, а телят с 2 -месячного возраста, скот откормочных групп – один раз в год; лошадей, мулов, ослов, овец и коз – в зависимости от эпизоотической обстановки; всех взрослых свиноматок, а также молодняк после отъема во всех племенных хозяйствах — один раз в год, а на остальных свинофермах- в зависимости от эпизоотической обстановки; взрослую птицу (старше двух лет) исходных линий и прародительских стад на племенных заводах и селекционно-племенных птицеводческих станциях- один раз в год.
Животных, принадлежащих гражданам, проживающим на территории хозяйств или в отдельных населенных пунктах, исследуют на туберкулез одновременно с проведением туберкулинизации в хозяйстве. При внутрикожном методе туберкулинизации туберкулин вводят КРС, буйволам, зебу, оленям (маралам) в середину шеи, быкам-производителям — в под хвостовую складку, верблюдам -в область наружной поверхности уха в 2 см от его основания, козам -в толщу нижнего века; собакам, обезьянам и пушным зверям (кроме норок) — в область внутренней поверхности бедра или локтевой складки; норкам — интрапальпебрально в верхнее веко; кошкам — в область внутренней поверхности уха: курам — в бородку; индейкам -в подчелюстную сережку; гусям, уткам - в подчелюстную складку; фазанам – самцам -в кавернозные тела головы; павлинам, попугаям, голубям, журавлям, цаплям, аистам, фламинго- в область наружной стороны голени на 1. . . 2 см выше голеностопного сустава. Перед введением туберкулина шерсть (волос) в месте инъекции выстригают (перья выщипывают), кожу обрабатывают 70%-ным этиловым спиртом. Учет реакции на внутрикожное введение туберкулина проводят у КРС, буйволов, зебувидного скота, верблюдов и оленей через 72 ч; у коз, овец, свиней, собак, кошек, обезьян, пушных зверей через 48 ч; у птицы через 30 -36 ч.
В неблагополучных по туберкулезу пунктах крупному рогатому скоту и верблюдам допускается вводить туберкулин повторно через 72 ч после первого введения в той же дозе и в то же место. Учет и оценку реакции на повторное введение проводят через 24 ч. При учете внутрикожной реакции у каждого исследуемого животного пальпируют место введения туберкулина, у норок визуально сравнивают веки левого и правого глаза. При обнаружении во время читки утолщения кожи на месте введения туберкулина у КРС, буйволов, зебувидного скота, верблюдов, оленей берем кутиметр и измеряем толщину складки в миллиметрах и определяем величину ее утолщения, сравнивая ее с толщиной складки неизмененной кожи вблизи места введения туберкулина.
Животных считают реагирующим на туберкулин: - крупный рогаты скот (кроме быков), буйволов, зебувидных, верблюдов, оленей, маралов, антилоп при утолщении кожной складки на 3 мм и более независимо от характера припухлости (отечности, болезненности, повышения местной температуры); -быков, овец, коз, слонов, носорогов, бегемотов, свиней, собак, волков и других представителей хищных, птиц, дельфинов, кошек – при образовании припухлости в месте введения туберкулина. Внутрикожная туберкулиновая проба – высокоспецифическая реакция на туберкулез. В то же время она зависит от общей иммунореактивности организма. У старых, глубокостельных, у животных имеющих низкую упитанность, а также при генерализованном туберкулезном процессе реакция на туберкулез может быть выражена слабо или отсутствовать совсем (анергия). Ветспециалисты проводящие туберкулинизацию, должны иметь в виду, что иногда возможны неспецифические (пара — и псевдоаллергические) реакции на туберкулин для млекопитающих, обусловленные сенсибилизацией организма микобактериями птичьего вида, возбудителями паратуберкулеза и атипичными микобактериями, а также другими причинами.
Для дифференциации неспецифических реакций применяется симультанная аллергическая проба, которую проводят одновременно туберкулином для млекопитающих и комплексным аллергеном из атипичных бактерий (КАМ). Если при учете реакции внутрикожная реакция на введение КАМ выражена более интенсивно, чем на туберкулин для млекопитающих, реакцию ветспециалисты считают неспецифической, материал от таких животных исследуют на туберкулез лабораторными методами. Туберкулинизацию глазным методом (офтальмопробу) применяют для диагностики туберкулеза у лошадей и других представителей непарнокопытных. У крупного рогатого скота этот метод можно применять только одновременно с внутрикожной туберкулиновой пробой для дополнительного выявления зараженных животных в неблагополучных по туберкулезу хозяйствах или при отборе животных для диагностического убоя. Диагноз на туберкулез при патологоанатомическом исследовании наиболее часто подтверждается у животных, реагирующих одновременно при исследовании в каждой из проб.
Глазную туберкулинизацию проводят двухкратно с интервалом 5 -6 суток между введениями. Туберкулин в количестве 3 -5 капель наносят пипеткой или шприцом без иглы на конъюктиву нижнего века или на поверхность роговицы при оттянутом нижнем веке. Животным, реагировавшим на первое введение туберкулина, препарат повторно не вводят. Учет результатов офтальмопробы проводят через 6, 9, 12, и 24 часа после первого и 3, 6, 9 и 12 часов после повторного введения туберкулина. Положительная реакция характеризуется образованием слизисто-гнойного или гнойного секрета, накапливающегося в конъюктивальном мешке или вытекающего в виде шнура из внутреннего угла глаза, гиперемией и отеком конъюктивы. При учете реакции необходимо оттягивать нижнее веко и осматривать конъюктивальный мешок, так как реакция может ограничится кратковременным образованием гнойного секрета в виде зернышек.
Кратковременная гиперемия и слезотечение с образованием небольшого количества слизистого секрета, а также отсутствие каких-либо изменений оценивается как отрицательная реакция. Если проведении плановой туберкулинизации в благополучном хозяйстве впервые выявляются реагирующие на туберкулин животные, то с целью уточнение диагноза под контролем специалистов госветсети проводится комиссионный диагностический убой 3 -5 животных с наиболее ярко выраженными реакциями на туберкулин и осматривают внутренние органы и лимфатические узлы. При обнаружении хотя бы у одного из убитых животных патологических изменений, типичных для туберкулеза, диагноз считается установленным. Если у убитых животных свойственные туберкулезу изменения органов и тканей не обнаружены, берут материал для бактериологического исследования с постановкой биопробы. При выделении из материала от убитых животных микобактерий туберкулеза бычьего или человеческого видов или при положительной биопробе диагноз также считают установленным.
Иммунитет и специфическая профилактика. Возникновение и развитие туберкулезного процесса сопровождается раздражением центральной нервной системы. Это вызывает повышение специфической чувствительности организма к туберкулезным бактериям и их токсинам. Повышенная чувствительность, или аллергия, выявляется через несколько дней или недель после попадания бактерий в организм и знаменует собой не только возникновение инфекционного процесса, но и начало формирования определенной степени нестерильного иммунитета. При туберкулезе фагоцитоз редко имеет завершенный характер, бактерии размножаются в нейтрофилах и макрофагах. В процессе эволюции организм выработал способность отграничивать (замуровывать) возбудителя в гранулемах-туберкулах. Степень этой способности, зависит от многих факторов, в том числе и от вирулентности возбудителя, что определяет исход болезни. Агглютинины, преципитины и комплементсвязывающие антитела тоже играют в иммунитете незначительную роль. Инфекционный (нестерильный иммунитет) продолжается до тех пор, пока туберкулезные бактерии находятся в организме; с их выделением или гибелью прекращается и иммунитет.
Для специфической профилактики туберкулеза в медицинской практике широко применяется вакцина БЦЖ, изготовленная Кальметом и Гереном (1924 г) из культуры микобактерий бычьего типа. Специфическая профилактика туберкулеза при помощи вакцины БЦЖ возможна, но в большинстве стран сельскохозяйственных животных против туберкулеза не вакцинируют. Профилактика. Профилактику и меры борьбы с туберкулезом осуществляют согласно действующим санитарным (СП 3. 1 093 -96) и ветеринарным правилам (ВП 13. 3 1325 -96). Владельцы животных, руководители хозяйств, независимо от форм собственности, владельцы КФХ и другие обязаны: при наличие или приобретении животных произвести их регистрацию в ветеринарном учреждении, получить регистрационный номер в форме бирки и следить за его сохранностью; покупку, продажу, сдачу на убой, выгон, размещение на пастбищах и все другие перемещения и перегруппировки животных, реализацию животноводческой продукции проводить только с ведома и разрешения органов государственной ветеринарной службы; оборудовать необходимые объекты ветеринарно-санитарного назначения; соблюдать меры предосторожности при заготовке кормов с целью исключения их инфицировании; карантинировать в течение 30 дней вновь поступивших животных для проведения ветеринарных исследований и обработок; своевременно информировать ветеринарную службу о всех случаях заболевания животных с подозрением на туберкулез (потеря упитанности, признаки воспаления легких, увеличение поверхностных лимфатических узлов);
предъявлять по требованию ветеринарных специалистов все необходимые сведения о приобретенных животных и создавать условия для проведения их осмотра, исследований и обработок; соблюдать зоогигиенические и ветеринарные требования при перевозках, содержании и кормлении животных, строительстве объектов животноводства; осуществлять своевременную сдачу больных животных или полную ликвидацию всего неблагополучного поголовья по указанию ветспециалистов; обеспечивать проведение предусмотренных настоящими правилами ограничительных, организационно-хозяйственных, специальных и санитарных мероприятии по предупреждению заболевания животных туберкулезом, также по ликвидации эпизоотического очага в случае его возникновения с выделением необходимых материально-технических и финансовых средств. Лица, обслуживающие животных в неблагополучных по туберкулезу хозяйствах, должны быть ознакомлены с правилами личной профилактики и привиты против туберкулеза. Каждые 6 месяцев они должны проходить медицинский осмотр с обязательным рентгенологическим исследованием.
Лечение. Животных больных туберкулезом сдают на убой. В стадах, на фермах, в населенных пунктах, где болезнь уже установлена, животных, реагирующих на туберкулин, признают больными туберкулезом и отправляют их в течение 2 недель на убой.
А. Специфические методы лабораторной диагностики туберкулеза В свою очередь специфические методы по видам исследований можно разделить на несколько групп. Бактериологические и молекулярно-генетические методы являются основным инструментом в лабораторной диагностике туберкулеза, они позволяют определять в организме больного присутствие возбудителя туберкулеза. Если бактериовыделение не удается выявить, а клинически исключить туберкулез не представляется возможным, могут быть использованы цитогистологические методы, с помощью которых можно обнаружить специфические туберкулезные изменения (элементы гранулемы). С помощью иммунологических методов можно оценить реакцию иммунной системы на микобактериальные антигены и определить уровень специфических антимикобактериальных антител, что в комплексе с результатами других исследований является важной диагностической информацией. Например, при обследовании детей наиболее информативными являются иммунологические методы (реакция Пирке, проба Манту, определение специфических антимикобактериальных антител методом ИФА).
Обнаружение в мокроте микробных возбудителей, микобактерий туберкулеза, является абсолютным диагностическим признаком этого заболевания. Микропрепараты мокроты больного туберкулёзом лёгких (а) и культуры микобактерии туберкулёза (б): а — микобактерии туберкулёза, имеющие вид тонких прямых или слегка изогнутых палочек; б — гигантские формы микобактерий туберкулёза, выращенные на жидкой питательной среде; окраска по Цилю—Нельсену; × 1350
Окрашенный по Граму препарат мокроты, полученной у больного с аспирационной пневмонией, осложнившейся абсцессом легкого, вызванным возбудителем туберкулеза
Рисунок 1 - Микобактерии туберкулеза а - метод окраски по Цилю-Нельсену б - метод люминисцентной микроскопии
На фото виден рост колоний микобактерий на яичной среде Лёвенштейна-Йенсена. Посев мокроты производят на классические элективные среды (Левенштайна - Йенсена и др. ). Рост первых колоний отмечают через 4 -8 нед. Использование современных высокоселективных сред позволяет получать культуры в течение 1 -2 нед, однако идентификация требует дополнительного времени. При идентификации микобактерии весьма информативен метод определения термостабильности каталазы микобактерии, так как указанным свойством обладают только М. tuberculosis и М. bovis.
o o биологический метод - биопроба на морских свинках (заболеда и погибла чз 3035 дн - при патогенной форме, 60 дн-менее патогенной, 90 дн. - падеж отсутствует- апатогенная форма и при очередных пассажах – восстанавливается патогенность) и кроликах по 2 гол. у свинок при генерализованной форме туберкулеза поражаются легкие и все органы - это М. бовис, М. туберкулезис. Если печень и селезенка – это М авиум –Если единичные поражения внутренних органов - это М туберкулезис Птичий вид вызывает септическую форму туберкулеза у кролей, а для свинок она апатогенна. 3. Молекулярно-генетические методы Применение ПЦР позволяет в короткие сроки осуществлять диагностику туберкулеза. Быстрота определения имеет особое значение в случаях идентификации штаммов микобактерии, отличающихся замедленным ростом. Молекулярно-генетические методы имеют неоспоримое превосходство над культуральными в случаях, когда в образце содержатся нежизнеспособные и/или некультивируемые микобактерии.
Исследования с помощью ПЦР-диагностики
4. Цитогистологические методы: Главная задача цитогистологических методов в лабораторной диагностике туберкулеза – это обнаружение специфических туберкулезных изменений (элементов гранулемы). В зависимости от локализации специфического процесса по возможности производится пункция пораженного органа или ткани с последующим цитогистологическим исследованием полученного материала.
4. Иммунологические методы: o o Туберкулинодиагностика -Туберкулин - препарат, приготовленный из культуры микобактерий туберкулеза (протеиновая фракция) и обладающий их антигенными свойствами. В инфицированном организме при нормальной (или повышенной) иммунологической реактивности в ответ на введение антигенов микобактерий туберкулеза развивается реакция гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ). методы определения специфических антител к микобактериям туберкулеза (анти-МБТ) - Методами ИФА, РСК, РНГА определяют иммуноглобулины класса Ig. G, специфичные к антигенам микобактерии туберкулеза. Самым современным способом определения специфических антимикобактериальных антител является иммуноферментпый анализ (ИФА), отличающийся от прежних методик большей стандартизацией реагентов и условий проведения исследования.
СПАСИБО ЗА ВНИМАНИЕ
Скачать презентацию ТУБЕРКУЛЕЗ Определение этиология эпизоотология клиническая картина патизменения лекция
Туберкулез 4 к.практич..pptx