ТЕХНОЛОГИЯ РЕКОМБИНАНТНЫХ ДНК I. - Создание рекомбинантных ДНК выделение ДНК из клеток донора подготовка ДНК к клонированию секвенирование фрагментов ДНК конструирование рекомбинантных ДНК II. Введение и экспрессия рекомбинантных ДНК в клетки реципиента - трансформация реципиентных клеток рекомбинантными ДНК - отбор трансформированных клеток - получение экспрессируемого белкового продукта и его анализ - промышленное получение полипептидного препарата
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ГЕНЕТИЧЕСКИХ ВЕКТОРОВ Векторы, применяемые в генетической инженерии прокариотических организмов - плазмидные, - фаговые, - плазмидно-фаговые (космиды и фазмиды)
ПЛАЗМИДНЫЕ ВЕКТОРЫ
ФАГОВЫЕ ВЕКТОРЫ
КОСМИДНЫЙ ВЕКТОР
ЛИГИРОВАНИЕ
КОНСТРУИРОВАНИЕ РЕКОМБИНАНТНЫХ ДНК • 1) выбор вектора; • 2) обработка вектора теми же рестриктазами, которые использовались для расщепления донорной ДНК; • 3) смешивание этих двух образцов ДНК (векторного и донорного) и сшивание их ДНК-лигазой фага Т 4.
Векторы для введения трансгена в геном растительной и животной клетки
Структура Тi-плазмиды Процесс трансформации растений с помощью агробактерии
Коинтегративный вектор
Бинарный вектор
Общая схема получения трансгенных животных • Выделение ДНК • Вырезание гена • Размножение гена, введение в состав векторных систем • Введение гибридной ДНК в оплодотворенную яйцеклетку • Яйцеклетку имплантируют приемной матери, где она продолжает развиваться • В потомстве появляется трансгенная гигантская мышь, если введен гормона роста от крысы
Скачать презентацию ТЕХНОЛОГИЯ РЕКОМБИНАНТНЫХ ДНК I — Создание рекомбинантных ДНК
vektora (1).ppt