Техника дозирования и источники ошибок Biohit Oyj

Техника дозирования и источники ошибок © Biohit Oyj

Два принципа дозирования воздушное замещение позитивное вытеснение 31. 1. 2018 © Biohit Oyj

Воздушное замещение • Воздушная прослойка между поршнем и жидкостью • Простейший принцип работы • Рекомендован для: – Водных растворов • Система, чувствительная к контаминации – Наконечники с фильтром – Защитные фильтры • Подразумевает хорошую технику дозирования и опыт • Чувствительна к изменениям в окружающей среде (температура, давление воздуха) • Экономичная система 31. 1. 2018 © Biohit Oyj

Позитивное вытеснение • Жидкость соприкасается с поршнем • Система защищена от контаминации • Рекомендована для: – Вязких жидкостей – Летучих жидкостей (напр. этанол) – Пенящихся жидкостей • Хорошая точность • Дорогостоящая система 31. 1. 2018 © Biohit Oyj

Хм…какую технику я должна выбрать? Техники дозирования 31. 1. 2018 © Biohit Oyj

Прямое дозирование (P) • • Самая простая из техник Для больших объемов Для водных растворов Для жидкостей, содержащих небольшое количество детергента или протеина • Для растворителей (необходима предварительная промывка) 31. 1. 2018 © Biohit Oyj

Прямое дозирование (P) • Нажмите на плунжер до первого упора • Поместите наконечник в дозируемую жидкость на глубину 2 -3 мм • Плавно отпустите плунжер • Сбросьте оставшуюся в наконечнике жидкость, плавно нажав на плунжер до первого упора • Нажмите кнопку до второго упора 31. 1. 2018 © Biohit Oyj

Обратное дозирование (r. P) • Дозатор набирает необходимый объем + излишек • Для биологических жидкостей • Для пенящихся жидкостей (содержащих протеин или детергент) • Для вязких жидкостей • Для небольших объемов • Работа требует высокой точности и сосредоточенности 31. 1. 2018 © Biohit Oyj

Обратное дозирование (r. P) • Нажмите на плунжер до второго упора • Поместите наконечник в дозируемую жидкость на глубину 2 -3 мм • Плавно отпустите плунжер • Для дозирования жидкости плавно нажмите плунжер до первого упора • Сбросьте оставшуюся в наконечнике жидкость, нажав на плунжер до второго упора При сбрасывании жидкости всегда касайтесь наконечником стенки резервуара 31. 1. 2018 © Biohit Oyj

Другие техники (для электронных дозаторов) Многократное дозирование (d) Разведение (dd) Многократный набор (SA) Последовательное дозирование (Sd) (Для промывки микропланшетов) 31. 1. 2018 © Biohit Oyj

Точность и воспроизводимость Точность • • Можно быть очень последовательным, но постоянным в своих ошибках Погрешность это математическая разница между средним значением повторяющихся измерений и их истинным значением Воспроизводимость • • Воспроизводимость это близость результатов измерений одной и той же величине. Определяется средним квадратичным отклонением. 31. 1. 2018 © Biohit Oyj

Точность и воспроизводимость Точная Воспроизводимость Точно Неточность Воспроизводимость Не точная Не воспроизводимость 31. 1. 2018 © Biohit Oyj

Факторы, влияющие на результаты дозирования для дозаторов на принципе воздушного вытеснения 31. 1. 2018 © Biohit Oyj

(1) Факторы, влияющие на результаты дозирования • Дозатор – Качество – Термоизоляция – Состояние • Чистый дозатор гарантирует наилучший результат • Регулярное сервисное обслуживание 31. 1. 2018 © Biohit Oyj

Предотвращение контаминации и загрязнения • Защитные фильтры (PE) – – Дорогостоящая система Предотвращают контаминацию дозатора и образца Продлевают срок службы дозатора Используются с большинством моделей дозаторов Biohit с объемом дозирования > 10 мкл • Наконечники с фильтром • Используйте принцип позитивного вытеснения – При работе с органическими жидкостями – При работе с радиоактивными жидкостями 31. 1. 2018 © Biohit Oyj

(2) Факторы, влияющие на результаты дозирования • Наконечник – – Качество Форма/размер Материал Соответствий дозатору 31. 1. 2018 © Biohit Oyj

Уровень спецификации Случайная погрешность % Разница между наконечниками различных производителей Наконечники Biohit Уровень спецификации Погрешность % Заключение: Используйте наконечники в соответствии со спецификациями производителя дозаторов 31. 1. 2018 © Biohit Oyj

Сравнение наконечников на 10 и 300 мкл (дозаторы 2 -в-1) Точность наконечники 10 мкл Воспроизводимость наконечники 10 мкл Точность наконечники 300 мкл Воспроизводимость наконечники 300 мкл Объем (мкл) Заключение: Используйте по возможности наконечники наименьшего объема (минимизируя мертвое воздушное пространство дозатора) для получения точных результатов 31. 1. 2018 © Biohit Oyj

(3) Факторы, влияющие на результаты дозирования • Окружающая среда – Температура – Влажность – Давление воздуха 31. 1. 2018 © Biohit Oyj

Работа дозаторов при различных температурных режимах Объем (мкл) мкл Дозатор при 5°С Дозатор при 22°С Дозатор при 28°С Температура воды Чтобы избежать ошибок при дозировании: • Дозатор, наконечник и жидкость должны находиться в одном температурном режиме (предпочтительна комнатная температура) Или • При дозировании холодных жидкостей не требуется предварительно промывать наконечник, меняйте его после каждой процедуры дозирования, чтобы избежать влияния на дозатор разницы температур 31. 1. 2018 © Biohit Oyj

(4) Факторы, влияющие на результаты дозирования • Ошибки пользователя – навыки, мастерство – Опыт – Синдром RSI 31. 1. 2018 © Biohit Oyj

Влияние опыта дозирования на результат работы Электронные дозаторы Нет опыта Опытный пользователь Эксперт Объем (мкл) Погрешность % Механические дозаторы Нет опыта Опытный пользователь Эксперт Объем (мкл) Заключение: Механические дозаторы предполагают профессиональную работу для получения наилучших результатов. Работая с электронными дозаторами, любой пользователь может получить наилучшие результаты 31. 1. 2018 © Biohit Oyj

Плохая воспроизводимость по причине RSI СКО Время дозирования в часах Обыкновенный дозатор Лимит в соответствии c ISO 8655 Каждый дозатор тестировался в течение более 5 часов. Сеты из 5 повторных взвешиваний 500 мкл были произведены 180 раз на калибровочных весах. Тот же оператор производил процедуру тестирования. Линия лимита СКО показывает максимально допустимое значение, определенное ISO 8655 -2 допустимых ошибок. Легкая операция дозирования m. LINE позволяет улучшить воспроизводимость в процессе работы. 31. 1. 2018 © Biohit Oyj

(5) Факторы, влияющие на результаты дозирования • Техника дозирования – Прямое или обратное в соответствии с типом жидкости, ее вязкостью… – Предварительное промывание наконечника – Угол наклона дозатора 31. 1. 2018 © Biohit Oyj

мкл Дозирование вязких жидкостей (Глицерин) Последовательное дозирование многократное обратное прямое дозирование 4 х25 мкл Заключение: • Используйте технику обратного дозирования, чтобы получить более воспроизводимые результаты • Электронный дозатор позволит вам получить наиболее точные и 31. 1. 2018 © Biohit Oyj воспроизводимые результаты в режиме многократного дозирования

Эффект предварительного промывания Biohit Proline Электронный дозатор 5 -100 мкл Объем (мкл) Biohit Proline Механический дозатор 10 -100 мкл Количество процедур дозирования Заключение: Для получения наилучших результатов, предварительно промывайте наконечник 3 - 5 раз 31. 1. 2018 © Biohit Oyj

Влияние угла наклона дозатора на результаты дозирования Угол наклона 45° Объем (мкл) Угол наклона 90° Тестовые точки Заключение: Во время дозирования держите дозатор как можно более вертикально 31. 1. 2018 © Biohit Oyj

Как правильно держать дозатор, работающий на принципе воздушного вытеснения • Во время набора жидкости держите дозатор вертикально • Погрузите наконечник в жидкость всего на 2 -3 мм • Предварительно промойте наконечник 3 -5 раз перед дозированием • После набора жидкости всегда выдерживайте паузу • Дозируйте под углом 30 – 45° • Извлекая наконечник из дозируемой жидкости коснитесь им внутренней стенки резервуара • Плавно и равномерно нажимайте на плунжер большим пальцем 31. 1. 2018 © Biohit Oyj

Возможные причины ошибок MAX Ошибки % A. Неисправный поршень/цилиндрическая система B. Неподходящий наконечник C. Повторное использование наконечника D. При извлечении наконечника из дозируемой жидкости, пользователь не коснулся им стенки резервуара E. Разница во влажности F. Нет предварительного промывания G. Неравномерные временные интервалы и невыдержанный ритм во время работы H. Угол наклона дозатора не равен 90° I. Неравномерное движение поршня J. Разница в температурном режиме между дозатором, жидкостью и наконечником 31. 1. 2018 © Biohit Oyj

В заключении • Правильно выберите принцип/технику для разных типов жидкости • Используйте оригинальные наконечники • Используйте наконечник минимального объема (сокращая воздушную прослойку) • Обеспечьте дозатору, наконечнику и дозируемой жидкости одинаковый температурный режим • Следите за правильным выполнением техники дозирования • Не держите дозатор и наконечник в руках, когда вы не производите дозирование, или используйте дозаторы с термоизоляцией (m. LINE, Proline Plus) 31. 1. 2018 © Biohit Oyj