Тема лекции: Медицинские иммунобиологические препараты для профилактики и лечения инфекционных заболеваний Заведующий кафедрой микробиологии с вирусологией и иммунологией ГБОУ ВПО «ЯГМА» Минздравсоцразвития России профессор В. А. Романов
План лекции Вакцины n Анатоксины n Антитоксические сыворотки n Иммуноглобулины n Аллергены n Иммуномодуляторы n Побочное действие вакцин n
Вакцины (vacca – корова – оспопрививание) Это препараты из различных живых, инактивированных микроорганизмов или из их антигенных компонентов, использующиеся для активной иммунизации людей с профилактическими и лечебными целями.
Живые вакцины Содержат живой ослабленный микроорганизм, способный размножаться в организме и вызывать вакцинальный процесс с формированием невосприимчивости к «дикому» микробу. Могут быть получены путем селекции (БЦЖ, гриппозная). Утрата вирулентности у вакцинных штаммов закреплена генетически, однако у лиц с иммунодефицитами при введении живых вакцин могут возникнуть серьезные проблемы. Живые вакцины получают путем искусственного аттенуирования (ослабления штамма – вакцина BCG 200 300 пассажей на желчном бульоне, ЖВС пассаж на ткани почек зеленых мартышек) либо отбирая естественные авирулентные штаммы. Возможно создание живых вакцин путем генной инженерии. Полученные штаммы будут обладать свойствами обеих возбудителей, хромосомы которых были взяты для синтеза.
Живые вакцины Изготавливают на основе аттенуированных (ослабленных) штаммов микроорганизмов. Живые вакцины против: туберкулеза (БЦЖ – BCG – Bacteria Calmett. Geren), полиомиелита, кори, эпидемического паротита, краснухи (входят в календарь прививок) По эпидпоказаниям прививки против: чумы, сибирской язвы, туляремиии, бруцеллеза, сыпного тифа, лихорадки Ку, желтой лихорадки, гриппа, ветряной оспы, ротавирусной инфекции
Положительные свойства живых вакцин • по механизму действия на организм напоминают "дикий" штамм, может приживляться в организме и длительно сохранять иммунитет (для коревой вакцины вакцинация в 12 мес. и ревакцинация в 6 лет), вытесняя "дикий" штамм; • используются небольшие дозы для вакцинации (обычно однократная) и поэтому вакцинацию легко проводить организационно. • обеспечивают достаточно эффективный иммунитет, обычно вводятся однократно. Большинство живых вакцин вводится парентерально (за исключением полиомиелитной вакцины).
Отрицательные свойства живых вакцин • содержат 99% балласта и потому достаточно реактогенны; • способны вызывать мутации клеток организма; • содержат вирусы-загрязнители (контаминанты), особенно это опасно в отношении обезьяннего СПИДа и онковирусов; • трудно дозируются и поддаются биоконтролю; • легко чувствительны к действию высоких температур и требуют неукоснительного соблюдения холодовой цепи.
Инактивированные (неживые, убитые) корпускулярные (цельноклеточные или цельновирионные) вакцины Изготавливают из типичных вирулентных или из аттенуированных (ослабленных) штаммов микроорганизмов (бактерий или вирусов) путем химической (формалин, спирт, фенол) или физической (тепло, ультрафиолетовое облучение, радиация) инактивации. Убитые вакцины АКДС (адсорбированная коклюшно-дифтерийностолбнячная вакцина с инактивированным коклюшным компонентом), против клещевого энцефалита, холеры, гриппа, бешенства, гепатита А, полиомиелита, лептоспироза, синегнойной инфекции.
Положительные свойства убитых вакцин • легче дозировать; • лучше очищать; • длительно хранятся; • менее чувствительны к температурным колебаниям.
Бактериальные вакцины (лизаты) для профилактики ОРЗ Вакцина Состав Способ Возраст применения ВП-4 (Россия) Полисахаридная вакцина из S. aureus, K. pneumoniae, E. coli Назальнопероральная вакцина Дети, 2, 5 г. , взрослые Бронховаксом (Швейцария) (Бронхомунал (Словения) Лизат из 8 бактерий: S. pneumoniae, H. influence, K. pneumoniae, K. ozenae, S. pyogenes, N. catarrhalis Пероральная вакцина в таблетках Дети с 6 месяцев, взрослые Имудон (Франция) Лизат 13 бактерий Пероральная вакцина в таблетках Дети с 3 лет, взрослые ИРС-19 (Франция) Лизат 18 бактерий Назальный спрей Дети с 3 месяцев, взрослые Рибомунил Рибосомы S. pneumoniae, H. influence, K. pneumoniae, Пероральная вакцина в Дети с 6 месяцев,
Отрицательные свойства убитых вакцин • содержат 99 % балласта и потому реактогенны; • содержат фенол, используемый для умерщвления микробных клеток; • микробный штамм не приживляется, поэтому вакцины малоиммуногенны, вакцинация проводится в 2 или 3 приема, требует частых ревакцинаций (АКДС).
Химические (субклеточные или субвирионные) вакцины Создаются из иммуногенных компонентов, извлеченных из микробной клетки с помощью физико химических методов. Химические вакцины Менингококковая полисахаридная вакцина, гемофильная вакцина, вакцина брюшнотифозная из Vi антигена, вакцина дизентерийная, гриппозная тривалентная полимер субъединичная вакцина с иммуномодулятором полиоксидонием (Гриппол), вакцины против папилломатоза человека (Гардасил, Церварикс), вакцина Пневмо 23
Рекомбинантные вакцины Создают с помощью генно инженерной технологии, встраивая в геном вектора (дрожжи, кишечная палочка, вакцинный вирус) ген вируса гепатита В. После завершения культивирования вектора выделяют иммуногенный белок (Hbs. AG), подвергают его очистке и используют для профилактики гепатита В.
Анатоксины Это бактериальные экзотоксины, обезвреженные формалином, но сохранившие антигенность и иммуногенность токсина. С целью снижения реактогенности анатоксины очищают от балластных веществ, концентрируют для уменьшения объема вводимого препарата, сорбируют на гидроксиде алюминия с целью повышения иммуногенности. Анатоксины для профилактики и лечения инфекций стафилококковый, адсорбированный дифтерийный, адсорбированный дифтерийно-столбнячный, адсорбированный столбнячный, синегнойный, ботулинистический.
Пути введения вакцин - накожно (против оспы, туляремии); - внутрикожно (БЦЖ); подкожно (против кишечных инфекций); энтерально (живая вакцина против полиомиелита); на слизистую оболочку носа (против гриппа); аэрогенно; комбинированными методами. Используется также безыгольный внутрикожный метод. Живые вакцины вводят чаще однократно (против паротита, кори) или с последующей ревакцинацией (БЦЖ, против полиомиелита). Убитые вакцины и анатоксины вводят 2— 3 раза, химические вакцины, как правило, однократно.
Вакцины для лечения Используют при хронических, вяло протекающих заболеваниях: фурункулез и другие стафилококковые инфекции, хроническая гонорея, бруцеллез и др. с целью стимуляции иммунной системы и десенсибилизации организма. Убитые лечебные вакцины стафилококковая, бруцеллезная, гонококковая, стафило-протейно-синегнойная, герпетическая, синегнойная, протейная, анатоксины стафилококковый, синегнойной палочки.
Консервация и контроль качества вакцин Убитые вакцины консервируют добавлением 0, 25% фенола или мертиолата в соотношении 1: 10 000. Живые вакцины стабилизируют путем лиофильной сушки (высушивание из замороженного состояния в условиях вакуума).
Хранение вакцин Вакцины хранят в сухом, защищенном от света месте при температуре 2— 10 С в запаянных ампулах или флаконах с этикетками, на которых указаны институт, изготовивший вакцину, название, серия вакцины, номер государственного контроля, срок годности. для каждого вида вакцины. Сухие вакцины (лиофилизированные) имеют больший срок годности, чем жидкие. Срок годности анатоксина 1— 3 года.
Контроль качества вакцин Все вакцины проходят государственный контроль. Убитые, химические вакцины и анатоксины проверяют на стерильность путем посева в асептических условиях 0, 5 мл вакцины на МПБ, сусло и среду Китта — Тароцци с последующим выращиванием посевов в термостате при 370 С в течение 5 8 суток. Отсутствие роста на питательных средах свидетельствует о стерильности вакцины.
Безвредность и иммуногенность вакцин Безвредность вакцин проверяют путем подкожного введения белым мышам 0, 5 мл препарата. Выживание животных в течение 3 дней свидетельствует о безвредности вакцины. Иммуногенность вакцин проверяют путем иммунизации чувствительных к данному заболеванию животных с последующим заражением их смертельной дозой соответствующей живой культуры. Процент выживших животных указывает на степень иммуногенности (60— 80— 100% выживаемости).
Стандартизация вакцин Корпускулярная вакцина стандартизуется по содержанию определенного количества микробных клеток в 1 мл. Активность анатоксина определяют по его способности реагировать со специфической антитоксической сывороткой с помощью реакции флоккуляции. Сущность реакции заключается в том, что при смешивании токсина или анатоксина в определенных соотношениях с антитоксической сывороткой (антитоксином) образуется помутнение с выпадением рыхлого осадка. При строгом соответствии количества сыворотки и антигена реакция флоккуляции наступает раньше (так называемая начальная флоккуляция).
Контроль качества противовирусных вакцин • Отсутствие онкогенных свойств, обусловленных онкогенами и онкогенными вирусами, а также культурами клеток тканей, применяющихся для накопления вирусного материала, для чего заражают лабораторных животных и куриные эмбрионы. . • Отсутствие вирусов-контаминантов в культурах клеток; • Контроль качества питательных сред, используемых для получения культуры клеток. В средах должны отсутствовать бактерии, грибы, микоплазмы и посторонние вирусы. Для стерилизации сред рекомендуют использовать гамма облучение.
Плановые прививки Проводятся в соответствии с календарем профилактических прививок (вакцинация против гепатита В, туберкулеза, полиомиелита, коклюша, дифтерии, столбняка, гемофильной инфекции, кори, эпидемического паротита, краснухи ). Плановые прививки населению на территориях, эндемичных по природно очаговым и зоонозным инфекциям, проводятся группам лиц с высоким риском заражения.
Календарь профилактических прививок России Возраст Наименование прививки 12 часов Первая вакцинация против гепатита В 3 -7 день Вакцинация против туберкулеза 1 месяц Вторая вакцинация – против гепатита В 3 месяца Первая вакцинация – против дифтерии, коклюша, столбняка, полиомиелита, гемофильной инфекции Вторая вакцинация – против дифтерии, коклюша, столбняка, полиомиелита, гемофильной инфекции Третья вакцинация – против дифтерии, коклюша, столбняка, полиомиелита, гепатита В Вакцинация против кори, паротита, краснухи 4, 5 месяца 6 месяцев 12 месяцев 18 месяцев 20 месяцев Первая ревакцинация – против дифтерии, коклюша, столбняка, полиомиелита, гемофильной инфекции Вторая ревакцинация - полиомиелит 6 лет Вторая вакцинация против кори, паротита, краснухи 7 лет Вторая ревакцинация против дифтерии, столбняка. Первая ревакцинация против туберкулеза Вакцинация против гепатита В. Вакцинация против краснухи (девочки) 13 лет 14 лет Третья ревакцинация против дифтерии, столбняка, ревакцинация против туберкулеза
Прививки по экстренным эпидемическим показаниям Предусмотрены в случае контакта восприимчивых (непривитых) лиц с источником инфекции. Проводятся прививки против гриппа, менингококковой инфекции, особо опасных инфекций, прививки в очагах инфекции, экстренная профилактика столбняка, бешенства. Группы населения, подлежащие вакцинации при возникновении неблагоприятной эпидемической обстановки, определяют органы управления здравоохранения субъектов России.
Гетерологичные антитоксические лечебнопрофилактические сыворотки • Получают путем многократной подкожной или внутривенной иммунизации животных (обычно лошадей) анатоксинами (или микроорганизмами, вырабатывающими токсин). • Сыворотку проверяют на активность (титр антител), стерильность, безвредность, количество белка, прозрачность. • Нативные сыворотки содержат балластные белки, которые при введении человеку могут вызвать осложнения, поэтому полученные нативные сыворотки осаждают сульфатом аммония, подвергают очистке от балластных веществ путем ферментирования и диализа (метод «Диаферм 3» ), концентрируют и титруют на наличие антитоксических антител.
Антитоксические сыворотки В настоящее время выпускаются следующие антитоксические лечебно-профилактические сыворотки: • противодифтерийная, • противогангренозная, • противостолбнячная, • противоботулинистическая Активность антитоксических сывороток выражают в антитоксических или международных единицах (АЕ, МЕ). Антитоксическая единица противодифтерийной сыворотки — это наименьшее количество сыворотки, которое нейтрализует 100 DLM дифтерийного токсина для морской свинки (1 DLM — наименьшее количество токсина, которое вызывает гибель морской свинки массой 250 г при подкожном введении).
Применение сывороток Сыворотку вводят внутримышечно или внутривенно. Перед употреблением ее подогревают на водяной бане до температуры 36— 370 С. Введение чужеродного белка может вызвать тяжелые реакции, поэтому сыворотку вводят по методу Безредки с проверкой индивидуальной чувствительности человека к белку этой сыворотки (0, 1 мл сыворотки лошади, разведенной 1: 100, вводят внутрикожно в ладонную поверхность предплечья). У лиц с повышенной чувствительностью возникает аллергическая реакция в виде появлении папулы и гиперемии на месте введения через 20 мин после инъекции. При отрицательной реакции с целью десенсибилизации вводят 0, 1 мл неразведенной сыворотки, а через 30— 60 мин при отсутствии аллергических явлений — всю назначенную дозу.
Иммуноглобулины для клинического применения Препараты содержат иммунологически активные белковые фракции сыворотки крови (иммуноглобулины класса G – около 95%, класса М – около 3 -5%), выделенные путем фракционирования сывороточных белков спиртом на холоду. Период полувыведения иммуноглобулинов из организма человека составляет около 4 недель, а максимальный уровень антител в крови после внутримышечного введения достигается через 24 -48 часов. Сыворотки и иммуноглобулины создают кратковременный искусственный пассивный иммунитет, являются слабореактогенными препаратами, и применяются для экстренной профилактики и лечения инфекционных болезней.
Препараты иммуноглобулинов Иммуноглобулины получают из сыворотки крови: • неиммунизированных доноров (нормальный донорский или противокоревой иммуноглобулин из крови не менее чем 1000 человек, концентрируя препарат в процессе производства. Препарат содержит высокий уровень антител к возбудителям многих заболеваний кори, коклюша, гриппа, полиомиелита, гепатита и т. д. ) в результате предшествующих инфекций или прививок. • иммунизированных доноров (гомологичные специфические иммуноглобулины); • иммунизированных животных специфические иммуноглобулины). (гетерологичные
Гомологичные иммуноглобулины Из сыворотки крови иммунизированных доноров: специфические иммуноглобулины против гепатита В, гриппа, клещевого энцефалита, стафилококковых инфекций, коклюша, столбняка, дифтерии, бешенства (антирабический), а также иммуноглобулин, обогащенный Ig. А, для орального применения при кишечных инфекциях (комплексный иммуноглобулиновый препарат – КИП).
Гетерологичные иммуноглобулины Готовят из сыворотки крови иммунизированных животных Препараты против: бешенства, венесуэльского энцефаломиелита лошадей, клещевого энцефалита, лептоспироза, лихорадки Эбола, японского энцефалита, сибирской язвы
Прочие сывороточные препараты А. Иммуноглобулины человека для внутривенного введения Б. Сывороточные препараты для лечения инфекционных болезней (антистафилококковая плазма, антипротейная плазма, антисинегнойная плазма, иммуноглобулин человека антистафилококковый, иммуноглобулин человека противоботулинистический, иммуноглобулин человека противодифтерийный)
Диагностические иммунобиологические препараты Диагностикумы - взвесь убитых бактерий стандартной концентрации в физиологическом растворе. Применяется для диагностики в качестве корпускулярного антигена в реакции агглютинации с целью определения наличия и титра антител в крови больного. В настоящее время выпускается широкий спектр диагностикумов - брюшнотифозные O и H, паратифозные A и B, бруцеллезный, туляремийный и др. Эритроцитарные диагностикумы - взвесь эритроцитов барана в физиологическом растворе, на которых адсорбированы антигены, полученные из бактерий, риккетсий, вирусов (или сами вирусы). Применяются в РНГА для выявления антител при дизентерии Флекснера и Зонне, сыпном тифе, различных вирусных инфекциях и др. Выпускаются также различные антигены для РСК (растворы молекулярных антигенов из бледных трепонем, из риккетсий Провачека, из бактерий коклюша и др. ), тест-системы для ИФА, применяемые для установления титра антител в крови у больных соответствующими инфекциями.
Диагностические сыворотки Получают обычно путем иммунизации животных (обычно кроликов) соответствующими микроорганизмами, антигенами из них или токсинами. Агглютинирующие сыворотки против различных микроорганизмов применяются для идентификации микроорганизма по антигенным свойствам с помощью реакции агглютинации. Преципитирующая сибиреязвенная сыворотка используется для идентификации полисахаридного антигена бацилл сибирской язвы с помощью реакции преципитации. Люминесцирующие сыворотки представляют собой меченые флюорохромом (обычно изотиоцианатом флюоресцеина) антитела против возбудителей различных инфекций (чумы, туляремии, сибирской язвы, бруцеллеза, холеры, вирусов гриппа, парагриппа, аденовирусов и др. ). Применяются в реакции иммунофлюоресценции для выявления возбудителей инфекции или их антигенов в материале от больного.
Аллергены В практике здравоохранения используют инфекционные неинфекционные аллергены для специфической диагностики иммунотерапии заболеваний. и и Аллергены применяют с целью выявления иммунологической перестройки организма в результате вакцинации или заболевания, а также для определения чувствительности больного к определенным лекарственным средствам. Основные требования к аллергенам — высокая чувствительность и специфичность. Микробные аллергены готовят из фильтратов бульонных культур (туберкулин, бруцеллин, тулярин, антраксин, гистоплазмин) или из клеток микроорганизмов аналогично химическим вакцинам. Аллергены контролируют и хранят аналогично другим бактериальным препаратам.
Инфекционные аллергены Представлены аллергенами грибов, условно-патогенных и патогенных микроорганизмов. Аллергодиагностика инфекционных болезней основана на способности кожи человека, сенсибилизированного к аллергену определенного микроорганизма, реагировать на его внутрикожное введение развитием аллергической реакции. Аллергены наиболее часто вводят накожно (проба Пирке), внутрикожно (проба Манту) в объеме 0, 1 мл в ладонную поверхность предплечья или методом укола прик тесты, а также провокационные тесты. При положительной реакции на месте нанесения аллергена на блюдается покраснение и припухлость. В последние годы в практику внедрены препараты для сухого прик теста, представляющие собой металлические ланцеты с фиксированным на них сухим стандартизованным аллергеном. Аллергодиагностика может осуществляться также с помощью реакций in vitro (радиоаллергосорбентный, радиоиммунный тесты, иммуноблотинг, иммуноферментный анализ, реакция торможения миграции лейкоцитов РТМЛ, тест ППН показатель повреждения нейтрофилов).
Бактериальные и грибковые аллергены Представляют собой белковые термостабильные фракции бульонных культур соответствующих видов микроорганизмов, полученные путем осаждения уксусной кислотой с последующим растворением осадка боратно солевым буфером. Аллергены стандартизуются по белковому азоту. Диагностические бактериальные аллергены. При инфекционной патологии применяются для постановки кожных аллергических проб с целью диагностики туберкулеза, бруцеллеза, туляремии, сибирской язвы. Бактериальные аллергены могут использоваться также для специфической иммунотерапии различных хронических и рецидивирующих инфекционно аллергических заболеваний (инфекционно аллергическая форма бронхиальной астмы, хроническая пневмония, хронические тонзиллит, отит, синусит, бронхоэктатическая болезнь, полиартриты, энтериты, гастриты и т. д. ). Грибковые аллергены. Применяются в диагностических целях для постановки внутрикожных аллергических проб при кандидамикозах, плесневых и некоторых других микозах.
Иммуномодуляторы микробного происхождения Микробные липополисахариды Дрожжевые гидролизаты Бактериальные лизаты Пирогенал, продигиозан Натрия нуклеинат ИРС-19, бронхо-мунал, имудон Комбинированные Рибомунил (рибосомы иммунокорректоры, бактерий), содержащие антигены поликомпонентная вакцина бактерий и ВП-4 (убитые бактерии), неспецифические солкотриховак (убитые иммуномодуляторы лактобациллы), (липополисахариды, солкоуровак (убитые протеогликан) бактерии) Синтетические аналоги Ликопид
Иммуномодуляторы костномозгового и тимического происхождения Препараты тимуса Тималин, Т-активин, тимоптин, тимактид, тимостимулин, вилозен Синтетические Тимоген аналоги факторов тимуса Препараты костного мозга В-активин, миелопид
Цитокины для клинического применения Лимфокины Ронколейкин, беталейкин Интерфероны и их α-интерфероны: альфаферон, индукторы интерферон человека, локферон (иммуномодулирующие и противовирусные эффекты) α -2 а -интерфероны: роферон, реаферон α-2 b-интерфероны: виферон, интрон А, реальдирон α -2 c-интерфероны: Берофор α -2 n-интерфероны: Вэлферон β-интерфероны: ребиф, ферон β-1 b-интерфероны: бетаферон синтетические индукторы интерферонов: циклоферон, амиксин, ридостин,
Побочное действие вакцин Это способность вакцин вызывать функциональные и морфологические изменения в организме, выходящие за пределы физиологических колебаний и не связанные с формированием иммунитета Побочные реакции на введение вакцин 1. Вызванные самой вакциной 2. Спровоцированные вакцинацией 3. Связанные с ошибками при вакцинации 4. Возникающие при случайном совпадении с вакцинацией
Поствакцинальные реакции и осложнения Поствакцинальные реакции (местные и общие) - клинические и лабораторные признаки нестойких патологических изменений в привитом организме. Проявляются через 24 часа недомоганием, небольшим повышением температуры тела, незначительными местными реакциями, исчезают через 2 -7 дней Поствакцинальные осложнения – клинические проявления стойких патологических изменений в организме: • токсические • аллергические • неврологические
Виды побочного действия вакцин • Фармакологическое действие вакцин (липополисахариды, цитокины) • Поствакцинальный инфекционный процесс • Онкогенные эффекты • Образование антител к непротективным антигенам вакцин • Аллергия (к антигенам вакцины, к примесям и добавкам вакцины, к экзоаллергенам, не связанным с вакциной • Иммуномодулирующее действие вакцин (эффекты антигенов, сорбентов, носителей вакцины, цитокинов, присутствующих в вакцине • Аутоиммунные процессы • Иммунодефицитные состояния • Психогенное действие вакцин
Причины патологии вакцинации Низкое качество вакцин, нарушение вакцинации Обострение хронических инфекций Присоединение интеркуррентных инфекций Особенности реактивности организма правил Причины патологии вакцинации по времени Обострение вяло текущей или латентной инфекции Совпадение прививки с началом острого заболеваний Присоединение интеркуррентного заболевания
Скачать презентацию Тема лекции Медицинские иммунобиологические препараты для профилактики и
16Иммунитет вакцины сыворотки лф пф.ppt