СРО на тему Определение спор сульфид редуцирующих

СРО на тему : Определение спор сульфид редуцирующих клостридий методом мембранной фильтрации ПОДГОТОВИЛА: МУБАРАКОВА УЛЖАН 406 ГР. ОЗ

Споры сульфитредуцирующих клостридий Сульфитредуцирующие клостридии (СРК) – это крупные грамположительные спорообразующие палочки, у которых диаметр спор превышает диаметр вегетативной клетки, облигатные анаэробы. Данная группа клостридий обладает свойством восстанавливать сульфиты до сульфидов, что используется при их идентификации Поскольку способностью редуцировать сульфиты обладают только споровые анаэробы кишечного происхождения, это позволило выделить данную группу микроорганизмов как санитарно показательную. Доминирующим представителем СРК является Clostridium perfringens. Эта бактерия является постоянным консорбентом кишечного тракта, хотя ее численность значительно ниже, чем E. col

Споры СРК имеют высокую устойчивость в окружающей среде, поэтому их обнаружение в воде может свидетельствовать о давнем фекальном загрязнении. Однако, учитывая, что СРК способны при благоприятных условиях размножаться в окружающей среде (особенно в почве), ценность спор СРК как показателя фекального загрязнения не высока. В то же время, высокая устойчивость спор к агрессивным воздействиям внешней среды и, в том числе, к дезинфицирующим и стерилизующим приемам, делает споры СРК важным индикатором оценки качества обеззараживания воды. При дефектах в технологии обеззараживания спорообразующие клостридии – первые из бактерий, преодолевающие этот барьер. Кроме того, СРК относятся к индикаторам биологического загрязнения воды: наличие их спор будет указывать на возможное присутствие сходных по устойчивости цист и ооцист простейших и жизнеспособных яиц гельминтов.

В настоящее время для выделения и учета спор СРК существуют коммерческие высокочувствительные и высокоспецифичные среды, содержащие соли тиогликолевой кислоты и добавки антибиотиков, например SPS-агар. Соли тиогликолевой кислоты обеспечивают более высокую степень анаэробиоза, что повышает чувствительность метода, а добавка антибиотиков повышает его специфичность.

Определение спор сульфитредуцирующих клостридий Определение проводят: прямым глубинным посевом в пробирках, двухслойным чашечным методом, методом мембранной фильтрации или методом НВЧ

Благодаря редукции сульфитов, на железосульфитном агаре и сходных средах СРК образуют колонии в виде черных пушинок или комочков ваты

На сегодняшний день самый надёжный, удобный и экономичный метод для проведения микробиологических анализов - метод мембранной фильтрации. Принцип метода пропускание анализируемой пробы через мембранный фильтр с размером пор 0, 45 0, 65 мкм, при этом происходит концентрирование присутствующих в пробе микроорганизмов на поверхности фильтра. Фильтр с задержанными микроорганизмами помещают на питательную среду и инкубируют в соответствующих условиях.

Метод мембранной фильтрации имеет неоспоримые : преимущества количественное определение микроорганизмов высокая точность результата возможность анализа проб с низким содержанием микроорганизмов исключение влияния на результат анализа ингибиторов роста микроорганизмов, бактериостатиков экономия питательных сред экономия рабочего времени возможность документирования результатов

Микробиологический анализ методом мембранной фильтрации Установки вакуумной фильтрации 2. Мембранные фильтры для проведения микробиологических анализов 3. Питательные картонные подложки 4. Счётчик колоний 5. Аксессуары для систем вакуумной фильтрации

Установки вакуумной фильтрации Для проведения микробиологических исследований используют вакуумные фильтрационные системы из различных материалов. Исследование нескольких проб одновременно возможно с помощью многосекционных систем. В зависимости от потребностей и особенностей Вашей лаборатории возможна поставка систем вакуумной фильтрации как отечественного, так и зарубежного производства.

типы фильтродержателей, используемые в вакуумной фильтрации: Стерильные пластиковые воронки Biosart 250 мл

Воронка из нержавеющей стали 40, 100, 500 мл

Стеклянный фильтродержатель 250 мл

Поликарбонатный фильтродержатель 250 мл

Одноразовые пластиковые воронки исключают необходимость предварительной стерилизации оборудования; применяются для мембранной фильтрации больших объемов образцов (до 250 мл). Воронки поставляются стерильными, конструкция позволяет крепить их на одиночных фильтродержателях. Воронки изготовлены из полипропилена и надежно соединяются с фильтродержателем, имеют градуировку на уровне 50, 100, 150 и 200 мл. Большой внутренний диаметр обеспечивает высокую скорость потока. Коническая форма позволяет выполнить тщательное послефильтрационное ополаскивание.

Установки вакуумной фильтрации из нержавеющей стали Установки из нержавеющей стали и могут быть односекционными или многосекционными (3 х и 6 ти). Стандартная комплектация установок: фильтродержатель из нержавеющей стали (диаметр фильтра 47 (50) мм, объем 500 мл. ), вакуумная колба с пробкой, вакуумный шланг, гидрофобный фильтр для защиты насоса от капельной влаги, вакуумный насос.

Суть метода: Мембранный фильтр с соответствующими размерами пор устанавливают в фильтрационную систему и фильтруют пробу. При этом микроорганизмы, имеющиеся в исследуемой пробе, осаждаются на поверхности мембранного фильтра. Ингибиторы роста могут быть устранены при помощи ополаскивания стерильной водой. Сразу же после этого мембранный фильтр помещают на питательную среду и инкубируют. Диффузия питательных веществ и продуктов обмена проходит через пористую систему нитроцеллюлозного мембранного фильтра. Колонии, появляющиеся на поверхности мембранного фильтра подсчитывают и пересчитывают их количество на общий объем пробы. Для селективного определения на мембранном фильтре рекомендуется использовать питательные картонные подложки (ПКП), обеспечивающие высокое качество анализов.

Мембранные фильтры для проведения микробиологических анализов Фильтры представляют собой стерильные, индивидуально упакованные диски диаметром 47 или 50 мм. Каждый фильтр полностью готов к применению. Материал мембранных фильтров – нитрат целлюлозы. Как показала многолетняя практика, этот материал обеспечивает оптимальные условия роста задержанных микроорганизмов, исключая таким образом получение ложного отрицательного результата. Для упрощения подсчета результатов сетка, нанесенная на поверхность фильтров, делит зону фильтрации на 130 квадратов размером 3, 1*3, 1 мм.

Питательные картонные подложки (ПКП) это диск из сорбирующего материала, пропитанный селективной питательной средой, а затем высушенный в специальных условиях и стерильно упакованный в чашку Петри. Активация питательной среды проводится непосредственно перед использованием путём смачивания подложки стерильной водой. Использование ПКП не требует приготовления и стерилизации питательных сред.

ПКП стоит применять, потому что они: Экономичны. Исключают затраты времени и труда на приготовление жидких культуральных сред (стерилизацию, очистку и т. д. ) Очень удобны в использовании. Просты в хранении. ПКП имеют срок годности от 9 до 24 месяцев при комнатной температуре Универсальны. ПКП могут быть модифицированы в зависимости от того, чем они смачиваются. Например, если смочить ПКП Wort или Orange Serum 5% этанолом, то на ней вырастут уксуснокислые бактерии. А если смочить ПКП Caso 10% раствором сыворотки крови, то на ней растёт ряд патогенных микроорганизмов: пневмококки, стрептококки и др. Демонстрируют постоянное качество. Процесс производства ПКП стандартизован и про ходит тщательный контроль, отвечающий требованиям международных стандартов ISO и GMP. Каждая новая партия также проходит контроль качества. Ростовые свойства ПКП проверяются на ряде тестовых штаммов, специфичных для данной среды (эта информация приведена на обороте сертификата качества, который вкладывается в каждую упаковку). Таким образом, Вы можете быть уверены в стабильности состава питательных сред, а также надежности и воспроизводимости полученных результатов

Счетчик колоний Конструкция этого компактного счётчика колоний выполнена в виде ручки. Ручка счётчик имеет 4 х разрядный жидкокристаллический дисплей, общий выключатель и чувствительный маркер. При прикосновении к поверхности чашки Петри происходит звуковой сигнал, электронная регистрация касания и вокруг колонии возникает цветовой след. Маркер одинаково хорошо пишет как на пластиковой, так и на стеклянной чашке Петри. Счетчик имеет аккумуляторную батарею емкостью на 1 миллион касаний. Подсчёт колоний с помощью ручки не только исключает ошибки, но становится исключительно лёгкой процедурой

Аксессуары для систем вакуумной фильтрации Вакуумный насос Колба Инкубатор Гидрофобный фильтр

Анаэробный инкубатор Ручной вакуумный насос Устройство для распаковки фильтров Приставка для предфильтрации

Заключение: Таким образом, определение спор сульфитредуцирующих клостридий методом мембранной фильтрации является наиболее эффективным и экономичным медодом Споры клостридий способны существовать в воде значительно дольше, чем колиформные организмы и они более устойчивы к обеззараживанию. Их присутствие в прошедшей дезинфекцию воде может указывать на ее недостаточную очистку и, следовательно, на то, что устойчивые к обеззараживанию патогенные микроорганизмы могли не погибнуть. Из за своей способность к длительному присутствию в воде сульфитредуцирующие клостридии лучше всего подходят для обнаружения периодического или давнего загрязнения. С другой стороны, именно в силу того, что клостридии имеют тенденцию к выживанию и накапливанию в воде, они могут обнаруживаться намного позднее и дальше от места загрязнения, что может усложнить интерпретацию результатов биологического исследования качества воды. Именно поэтому, не смотря на свое особое значение, тест на сульфитредуцирующие клостридии не включен Всемирной Организацией Здравоохранения в обязательный перечень для рутинного контроля распределительных систем

Список использованной литературы: http: //www. septech. ru/items/154 http: //mibio. ru/contents. php? id=2536 Http: //www. chem. msu. su/ http: //medvuz. info/load/mikrobiologija/mikro biologija_uchebnik_vorobev_a_v_bykov_a_s _pashkov_e_p/64 1 0 975

Спасибо за внимание