Спектрофотометрия Метод количественного анализа Определение Это оптический

Спектрофотометрия Метод количественного анализа

Определение Это оптический метод исследования растворов и твердых веществ, основанный на определении интенсивности поглощения или излучения веществом света в зависимости от длины волны.

Абсорбционная спектрофотометрия Метод исследования растворов и твердых веществ, основанный на определении интенсивности поглощения света веществом в зависимости от длины волны.

Эмиссионная спектрофотометрия Метод исследования растворов и твердых веществ, основанный на определении интенсивности излучения света веществом в зависимости от длины волны.

Получаемые в результате абсорбционные и эмиссионные спектры являются характерными для каждого данного вещества.

Различают спектрофотометрию в ультрафиолетовой (УФ) – (200400 нм), видимой (400 -760 нм) и инфракрасной (ИК) (>760 нм) областях спектра.

Широко применяется в клинических, биохимических, санитарно-гигиенических, судебномедицинских и фармацевтических лабораториях для качественного и количественного анализа различного рода объектов биологического происхождения ( сыворотка крови, спинномозговая жидкость e. t. c. ), лекарственных средств, продуктов питания e. t. c.

Как это работает? Например, применение спектрофотометрии в УФ и видимой областях спектра основано на поглощении электромагнитного излучения соединениями, содержащими хромофорные (напр. , С=С, С≡С, С=О) и ауксохромные (ОСН 3, ОН, NH 2 и др. ) группы

Поглощение излучения в этих областях связано с возбуждением электронов s- и p- орбиталей и переходами молекул в возбужденное состояние.

Оптическая плотность — это мера ослабления света прозрачными объектами (такими, как кристаллы, стекла, фотоплёнка) или отражения света непрозрачными объектами (такими, как фотография, металлы и т. д. ).

Она вычисляется как десятичный логарифм отношения потока излучения падающего на объект, к потоку излучения прошедшего через него (отразившегося от него), то есть это есть логарифм от величины, обратной к коэффициенту пропускания (отражения):

К примеру D=4 означает, что 4=10 000 свет был ослаблен в 10 раз, то есть для человека это полностью чёрный объект, а D=0 означает, что свет прошёл (отразился) полностью.

Спектрофотометр это — прибор, предназначенный для измерения отношений двух потоков оптического излучения, один из которых — поток, падающий на исследуемый образец, другой — поток, испытавший то или иное взаимодействие с образцом.

пас С а вн оз иб ие! ман и