ШТУЧНІ БЛМ – МОДЕЛЬ ДЛЯ ДОСЛІДЖЕННЯ ІОННОЇ ПРОНИКНОСТІ КЛІТИННИХ МЕМБРАН Зінченко Валентина
ПЛАН ПРЕЗЕНТАЦІЇ Формування БЛМ (бішарових ліпідних мембран) Методи одержання БЛМ Порівняння властивостей БЛМ та біомембран БЛМ в якості моделей Використання БЛМ Дослідження іонного транспорту Перспективи
САМОЗБИРАННЯ ЛІПІДІВ Мономолекулярні ліпідні плівки (моношари) Міцели Бімолекулярні ліпідні шари (бішари)
ОДЕРЖАННЯ ЗА МЮЛЛЕРОМ
ОДЕРЖАННЯ ЗА МОНТАЛОМ
ПОРІВНЯННЯ ВЛАСТИВОСТЕЙ
БЛМ В ЯКОСТІ МОДЕЛЕЙ Простота одержання Можливість використання різноманітних електровимірювальних методів досліджень Можливість регулювати склад мембран і оточуючих розчинів Можливість включення функціонально активних елементів біомембран Наявність мікролінз розчинника в бішарі Низький натяг Нестабільність Короткий час існування
ВИКОРИСТАННЯ Розподіл електричного потенціалу Адсорбція іонів Будова подвійного електричного шару Вплив зовнішніх електричних полів Іонний транспорт Процеси злиття, поділу
ІОННИЙ ТРАНСПОРТ Плоскі ліпідні бішари – електрофізіологічний метод для вивчення властивостей окремих каналів в добре контрольованому штучному середовищі Можливість вивчати поведінку іонних каналів на рівні однієї молекули. Дослідження прямого впливу хімічних речовин і ферментів на канал без можливого впливу регуляторних білків нативних мембран.
СХЕМА ВИМІРЮВАЛЬНОЇ УСТАНОВКИ
ВКЛЮЧЕННЯ БІЛКІВ Білок не може бути включений в мембрану при формуванні через можливість денатурації під впливом органічного розчинника Широко використовується зливання БЛМ з ліпосомами, що містять необхідний білок, під впливом агентів, що полегшують злиття мембран (Са 2+, осмотичний шок)
BLM VS PATCH-CLAMP Контроль оточення білка Дослідження впливу ліпідного складу на функціонування білка Дослідження каналів, які анатомічно не доступні для вивчення за допомогою Patch-clamp Низький шум навіть на високих потенціалах (до 600 m. V) Не всі білки здатні функціонувати у БЛМ
ПЕРСПЕКТИВИ Створення штучних мембран з асиметрією ліпідів, притаманною клітинам людського організму
ПЕРСПЕКТИВИ Створення штучних неліпідних мембран з заданими характеристиками задля підвищенної стабільності вбудованих білків
СПИСОК ВИКОРИСТАНИХ ДЖЕРЕЛ Биоорганическая химия. Овчинников Ю. А. Москва, "Просвещение" 1987. - 816 c. Биофизика. Рубин А. Б. Изд-во Московского университета; 1999 Способ получения бислойных липидных мембран (блм). Батищев О. В. Инденбом А. В. Planar Lipid Bilayer Method for Studying Channel Molecules. Shigetoshi O. Recording of Ion Channel Activity in Planar Lipid Bilayer Experiments. Zakharian E.
ДЯКУЮ ЗА УВАГУ!
Скачать презентацию ШТУЧНІ БЛМ МОДЕЛЬ ДЛЯ ДОСЛІДЖЕННЯ ІОННОЇ ПРОНИКНОСТІ
blm_model.pptx