Роль вирусов в возникновении и развитии обострения хронического

Роль вирусов в возникновении и развитии обострения хронического обструктивного заболевания лёгких Институт фтизиатрии и пульмонологии им. Ф. Г. Яновского АМН Украины профессор А. Я. Дзюблик

Эпидемиология ХОЗЛ болеют 4 -10% взрослого населения США и Европы ХОЗЛ причина смерти 2, 75 млн. человек ежегодно (данные ВОЗ) ХОЗЛ является одной из ведущих причин смерти (к 2020 г. прогнозируется выход на третье место по причинам смерти)

Эпидемиология ХОЗЛ в США Ежегодно >16 млн. амбулаторных приемов и 500 000 случаев, требующих госпитализации $18 млрд. ежегодных прямых расходов $32 млрд. ежегодных непрямых расходов (экономические потери)

Обострение ХОЗЛ – относительно продолжительное (не менее 24 ч) ухудшение состояния больного, по своей тяжести выходящее за границы нормальной суточной вариабельности симптомов, характеризующееся острым началом и требующее изменения схемы обычной терапии GOLD, 2003

Основные причины обострения ХОЗЛ воздействие экзогенных повреждающих факторов; инфекция трахеобронхиального дерева; пневмония; неадекватная физическая нагрузка; неадекватная базисная терапия; сердечная недостаточность, аритмия; легочная эмболия; спонтанный пневмоторакс; неконтролируемая кислородотерапия; использование лекарственных средств (седативных, диуретиков); хирургическая операция; метаболические нарушения (диабет, электролитный дисбаланс, нарушения питания); аспирация

Этиология обострения ХОЗЛ Инфекционные факторы (80%): • 60– 70% — бактериальные возбудители • 20– 40% — вирусы Неинфекционные факторы (20%): • Факторы окружающей среды • Не соблюдение правил приема медикаментов

Основные вирусные возбудители обострения ХОЗЛ Вирусная инфекция в 20 -30% случаев является причиной обострения ХОЗЛ • четырехкратное увеличение титра антител • определение вируса в секрете дыхательных путей Gump et al. , ARRD, 1976; Buscho et al. , JID, 1978; Smith et al. , ARRD, 1980

Спектр вирусных возбудителей инфекций дыхательных путей Больные ХОЗЛ Контроль (n=55) Вирус Всего (n=62) Легкое течение (n=30) Среднее и тяжелое течение (n=32) Picornavirus 28 22, 9 % 8 8 Parainfluenza virus 23 28, 6 % 9 11 Coronavirus OC 43/229 E 12 22, 9 % 6 10 Influenza virus A/B 15 11, 4 % 3 5 Respiratory syncytial 9 11, 4 % 5 3 Adenovirus 3 1, 4 % 0 1 Cytomegalovirus 1 1, 4 % 0 1 Всего 91 70 (100 %) 31 39 Greenberg, Allen, Wilson, et al Am J Respir Crit Care Med Vol 162. pp 167– 173, 2000

Этиология инфекционного обострения ХОЗЛ А. Я. Дзюблик и соавт. , 2006

Вирус гриппа Геном: 8 Фрагментов HA 1 -16 9 11 генов NA 1 - 9 10 254 комбинации 11 генов

Лабораторная диагностика респираторных вирусов Экспресс-методы Классические вирусологические методы Серологические методы МФА Выделение вируса на куриных эмбрионах и идентификация в РТГА ИФА Выделение вируса в культуре клеток и Идентификация в РТГА ИФА ( Ig. M , Ig G) ИХА (простые/быстрые тесты) РНГА ПЦР-диагностика РСК РНГА РН

Лабораторная диагностика вируса методом флуоресцирующих антител

Лабораторная диагностика респираторных вирусов Экспресс-методы Классические вирусологические методы Серологические методы МФА Выделение вируса на куриных эмбрионах и идентификация в РТГА ИФА Выделение вируса в культуре клеток и Идентификация в РТГА ИФА ( Ig. M , Ig G) ИХА (простые/быстрые тесты) РНГА ПЦР-диагностика РСК РНГА РН

Иммуноферментный анализ

Лабораторная диагностика респираторных вирусов Экспресс-методы Классические вирусологические методы Серологические методы МФА Выделение вируса на куриных эмбрионах и идентификация в РТГА ИФА Выделение вируса в культуре клеток и Идентификация в РТГА ИФА ( Ig. M , Ig G) ИХА (простые/быстрые тесты) РНГА ПЦР-диагностика РСК РНГА РН

CITO TEST INFLUENZA A+B Одношаговый иммунохроматографический тест для выявления антигенов вирусов гриппа типа А и В. Исследуемый материал: мазок, смыв, выделения из носа. Режим хранения: температура – 2 – 30 °С, срок годности: 2 года. Чувствительность: около 99%. Производитель: CERTEST Biotec. NB! С помощью CITO TEST INFLUENZA A+B мы определяем нуклеопротеин вируса.

CITO TEST INFLUENZA A+B Процедура исследования мазок из носа Разместите тампон в пробирке и вращайте 10 раз Добавьте 10 капель Добавьте 3 капли буфера В Буфера А И смешайте Добавьте 5 – 6 капель Подождите 10 минут

CITO TEST INFLUENZA A+B Процедура исследования Смыв или выделения из носа Добавьте 6 капель образца Добавьте 3 капли буфера В Смешайте раствор 10 раз с помощь пипетки Добавьте 5 – 6 капель Подождите 10 минут

CITO TEST INFLUENZA A+B Интерпретация результата Контрольная линия Тестовая линия Место для образца Грипп А Грипп В Грипп А+В Отрицательный Недействительный Положительный

Лабораторная диагностика респираторных вирусов Экспресс-методы Классические вирусологические методы Серологические методы МФА Выделение вируса на куриных эмбрионах и идентификация в РТГА ИФА Выделение вируса в культуре клеток и Идентификация в РТГА ИФА ( Ig. M , Ig G) ИХА (простые/быстрые тесты) РНГА ПЦР-диагностика РСК РНГА РН

Полимеразная цепная реакция 1 молекула ДНК 1010 -1012 копий ДНК

Полимеразная цепная реакция

Лабораторная диагностика респираторных вирусов Экспресс-методы Классические вирусологические методы Серологические методы МФА Выделение вируса на куриных эмбрионах и идентификация в РТГА ИФА Выделение вируса в культуре клеток и Идентификация в РТГА ИФА ( Ig. M , Ig G) ИХА (простые/быстрые тесты) РНГА ПЦР-диагностика РСК РНГА РН

Выделение вируса в культуре клеток и идентификация в РТГА

Метапневмовирус РНК-содержащий вирус СЕМЕЙСТВО: Paramyxoviridae Подсемейство: Pnevmovirus РОД: 1. Metapnevmovirus

СЕЗОННОСТЬ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ A. Mc. Adam e. a. , JID. 2004; 190: 20 -6

ИФА-диагностика h. MPV Выявление антигена h. MPV в разнообразных образцах из респираторного тракта (тест-система позволяет выявлять как свободный, так и ассоциированный с клетками вирус) Уникальная комбинация моноклональных антител к h. MPV, позволяющая выявлять как фьюжн, так и матриксные белки h. MPV Выявление всех известных штаммов h. MPV Превосходная чувствительность и специфичность при сравнении с ПЦР Простая и удобная в использовании тест-система Полностью готовые к использованию реагенты, снабженные цветовой кодировкой Суммарное время инкубаций 2 часа 15 минут Стрипы разделяются на отдельные лунки СЕ-маркировка Наименование, количество/упаковка Метапневмовирус человека (h. MPV) – определение антигена, 96

Метапневмовирус при обострении ХОЗЛ Martinello R. et al. J. Infect. 2006

ПАРАДОКСЫ ЛЕЧЕНИЯ Бактерии –у 50 -60 % больных ХОЗЛ, но антибиотики назначают в 95% случаев ВИРУСЫ – У 20 -40% БОЛЬНЫХ С ОБОСТРЕНИЕМ ХОЗЛ, НО ЭТИОЛОГИЧЕСКОЕ ЛЕЧЕНИЕ НЕ ПРОВОДЯТ!!!

НУЖНА ЛИ АНТИВИРУСНАЯ ТЕРАПИЯ У БОЛЬНЫХ С ОБОСТРЕНИЕМ ХОЗЛ ВИРУСНОЙ ЭТИОЛОГИИ ? ? ?

Противовирусные препараты Ингибиторы М 2 -каналов (Римантадин, амантадин) Ингибиторы нейраминидазы ( Озельтамивир, занамивир) Препараты расширенного спектра действия ( Интерфероны, Рибавирин) Арбидол, амиксин, амизон

Механизмы действия противовирусных Основные этапы репродукции вируса препаратов Антивирусные препараты Внеклеточные вирионы Адсорбция Арбидол, Проникновение Ингибиторы М 2 -каналов Раздевание» Синтез вирусных НК Синтез вирусных белков РНК / ДНК БЕЛКИ Рибавирин Интерфероны Ингибиторы протеаз Сборка Выход вирусного потомства Ингибиторы нейраминидазы Интерфероны

АРБИДОЛ – международное непатентованное название 1 -метил 2 -фенилтиометил 3 -карбоэндокси 4 -диметиламинометил 5 -окси 6 -броминдола, гидрохлорид, моногидрат карбоновой кислоты

КРАТКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА АРБИДОЛА Фармакологические свойства Ингибирующее действие на вирусы гриппа А и В Показания Профилактика и лечение гриппа типов А и В и других ОРВИ Интерферониндуцирующее действие Иммуномодулирующее действие Антиоксидантное действие Методика применения С лечебной целью по 0, 2 г 3 -4 раза в сутки в течении 3 -5 дней С профилактической целью: по 0, 2 г в сутки 1014 дней Лечение инфекционных обострений ХОЗЛ вирусной этиологии (предварительные данные) По 0, 2 г 3 раза в день 3 -4 дня

Подавляет слияние липидной оболочки вируса с клеточной мембраной А Р Б И Д О Л

Эффективность лечения инфекционного обострения ХОЗЛ (на 7 -10 день) А. Я. Дзюблик и соавт. , 2006

Эффективность лечения инфекционного обострения ХОЗЛ (длительность) А. Я. Дзюблик и соавт. , 2006

Выводы В возникновении и развитии ХОЗЛ важное значение играют респираторные вирусы, однако окончательно не установлена роль метапневмовируса. Для выяснения этиологии обострения ХОЗЛ разработаны современные высокоинформативные методы, диагностические тесты, но отсутствуют общепринятые диагностические алгоритмы. Практически не разработаны схемы лечения больных с обострением ХОЗЛ вирусной этиологии. Начатые исследования в нашем Институте являются новым направлением в Украине.