РЕГУЛЯЦИЯ КИНЕТИЧЕСКИХ ПАРАМЕТРОВ ФЕРМЕНТАТИВНЫХ РЕАКЦИЙ РЕГУЛЯЦИЯ КИНЕТИЧЕСКИХ

РЕГУЛЯЦИЯ КИНЕТИЧЕСКИХ ПАРАМЕТРОВ ФЕРМЕНТАТИВНЫХ РЕАКЦИЙ

РЕГУЛЯЦИЯ КИНЕТИЧЕСКИХ ПАРАМЕТРОВ ФЕРМЕНТАТИВНЫХ РЕАКЦИЙ v = d. P/dt = f([E]0, [S]0, [X (I)0], p. H, T, …(ε, μ…)…t) n ИНГИБИРОВАНИЕ n р. Н – ЗАВИСИМОСТИ n ЗАВИСИМОСТИ ОТ ТЕМПЕРАТУРЫ

Ингибирование ферментов n ОБРАТИМЫЕ КОНКУРЕНТНЫЕ n НЕКОНКУРЕНТНЫЕ n БЕСКОНКУРЕНТНЫЕ n n НЕОБРАТИМЫЕ МОДИФИКАТОРЫ n СУБСТРАТОПОДОБНЫЕ (СУИЦИДНЫЕ) n

CH 3 O | || CH 3 – CH – O – P – F | CH 3 – CH – O | CH 3 диизопропилфторфосфат CH 3 O | || СH 3 – CH – O – P – F | CH 3 зарин CH 3 O | || (СH 3)3 C – CH – O – P – F | CH 3 зоман

Ингибирование ферментов n ИНГИБИРОВАНИЕ СЕРИНОВЫХ ПРОТЕИНАЗ ФОСФОРОРГАНИЧЕСКИМИ ОТРАВЛЯЮЩИМИ ВЕЩЕСТВАМИ E – OH + (R 1, R 2) P(O)F → E – O – P(0)(R 1, R 2) + HF Ki ki E + I ↔ EI → EI’ ki I o [E] = [E]o exp (- _____ *t) K i+I 0

Ингибирование ферментов n определение природы функциональных групп n n n активных центров ферментов фиксация промежуточных соединений инактивация протеолитических ферментов титрование активных центров введение метки – репортера установление взаимосвязи структуры и реакционной способности

Обратимое ингибирование n КИНЕТИЧЕСКИЕ ПРОЯВЛЕНИЯ ДЕЙСТВИЯ ИНГИБИТОРОВ Сорбционная область Каталитический центр

Обратимое ингибирование n конкурентное n неконкурентное n бесконкурентное

Обратимое ингибирование n КОЛИЧЕСТВЕННЫЕ ПАРАМЕТРЫ, ХАРАКТЕРИЗУЮЩИЕ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ИНГИБИРОВАНИЯ Ki конкурентное и I 50 неконкурентное

Ингибиторный анализ n ИССЛЕДОВАНИЕ ТОПОГРАФИИ И СТРУКТУРЫ АКТИВНЫХ ЦЕНТРОВ n БИФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ИНГИБИТОРЫ

Ингибирование ферментов n р. Н-зависимости ферментативной активности: протон - ингибитор и активатор фермента

р. Н-зависимости ферментативной активности n Протон - как ингибитор и активатор фермента

р. Н-зависимости ферментативной активности n Зависимость кажущейся максимальной скорости от р. Н

р. Н-зависимости ферментативной активности n Определение p. Ka функциональных групп фермента и фермент-субстратного комплекса