Регуляция экспрессии генов, методы генной инженерии Молекулярная биология
Регуляция экспрессии генов у эукариотов (контроль транскрипции) • Амплификация – ген металлотионеина • Рекомбинация – структура антител • Регуляция транскрипции (факторы транскрипции : ТАТА-фактор, СААТ-бокс, сайт терминации) • Сайленсеры Энхансеры • Гормон-чувствительные участки
Lac-оперон E. coli содержит регуляторные и структурные гены (цистроны). репрессор Индуктор (лиганд) Z -β- галактозидаза (расщепляет лактозу на глюкозу и галактозу). Y- β- галактозидпермеаза (переносит лактозу через мембрану клетки). А - тиогалактозидтрансацетилаза (ацетилирует галактозу).
Ретровирусы • РНК ретровирусов встраивается в геном инфицированной вирусом клетки с помощью особого фермента обратной транскриптазы (ревертазы), превращающей РНК ретровируса в ДНК. РНК ДНК Белок
Ретровирусы • вирус инфекционной анемии лошадей, • вирус артрита-энцефалита коз, овец, • вирус иммунодефицита крупного рогатого скота, • вирус иммунодефицита обезьян (SIV), • вирус иммунодефицита человека (HIV, в русской транскрипции ВИЧ).
Вирус иммунодефицита человека gp 41 и gp 120 (от слова “glicоprotein”)
Проникновение вируса в клетку Вирус взаимодействует с определенными рецепторами, локализованными на плазматической мембране. Рецептором для ВИЧ является антиген CD 4 - (Сell Differention antigen) на Т-хелперах
Методы Для выявления в клетках человека вирусной РНК используют • РНК- зонды • ПЦР – полимеразная цепная реакция
Полимеразная цепная реакция
Полимеразная цепная реакция
Генная инженерия - создание новых генетических конструкций • Молекулы ДНК содержат различные палиндромные последовательности. Каждый палиндром – это последовательность-перевертыш, идентичный в обеих цепях при ее прочтении в направлении от 5'-конца к 3'концу. • А роза упала на лапу Азора
Рестриктазы • Рестриктазы – ферменты, которые узнают определенные короткие нуклеотидные последовательности ДНК и разрезают ее в строго определенном месте этих последовательностей (сайты рестрикции). • Рестриктазы бактерий являются средством защиты от проникающих в них вирусов. • Образующиеся после разрезания фрагменты ДНК называются рестрикционными фрагментами, или рестриктами • С помощью рестриктаз построены рестрикционные карты, на которых указано положение каждого участка рестрикции относительно других рестрикционных участков ПДРФ.
Рестриктазы • Рестриктаза Eco. RI узнает нуклеотидную последовательность: • Уж редко рукою окурок держу (палиндром) 5' ГААТТЦ 3' 3' ЦТТААГ 5'
Рестриктазы • Hae. III 5' ГГЦЦ 3‘ 3' ЦЦГГ 5' • Bam. HI 5' ГГАТЦЦ 3‘ 3' ЦЦТАГГ 5' • Tag I 5' ТЦГА 3' 3' АГЦТ 5'
Получение рекомбинантной молекулы ДНК (гибридной ДНК)
Плазмиды (векторы) Структура Ti-плазмиды
Использование ДНК-технологий в медицине Получение лекарственных препаратов: • Вакцины (против вируса гепатита В) • Белки(инсулин, гормон роста, фактор VIII и др. ) Генодиагностика Терапия Карта генома человека
Геномодифицированные продукты • первые трансгенные растения, разрешенные к применению в США в 1994 году были помидоры сорта FLAVR SAVR, устойчивые к вирусам, грибкам, нематодам и другим вредителям, холоду, жаре, засухе, долго не портящиеся при хранении. • суперморозоустойчивость получили с помощью гена, кодирующего белок-антифриз из камбалы
Скачать презентацию Регуляция экспрессии генов методы генной инженерии Молекулярная биология
Регуляция экспрессии генов,генная инженерия.ppt