Скачать презентацию Питательные среды Мультимедийная программа в поддержку лекций и Скачать презентацию Питательные среды Мультимедийная программа в поддержку лекций и

Питательные среды.ppt

  • Количество слайдов: 56

Питательные среды Мультимедийная программа в поддержку лекций и практических занятий Составитель: Л. С. Шишкина Питательные среды Мультимедийная программа в поддержку лекций и практических занятий Составитель: Л. С. Шишкина

Питательные среды. Цели занятия: 1. Осознать знчение питательных сред в микробиологическом исследовании. 2. Познакомитья Питательные среды. Цели занятия: 1. Осознать знчение питательных сред в микробиологическом исследовании. 2. Познакомитья с основными c принципами приготовления и использования питательных сред.

Питательные среды. • • Питательные среды – это субстраты, предназначенные для: накопления выделения изучения Питательные среды. • • Питательные среды – это субстраты, предназначенные для: накопления выделения изучения сохранения микроорганизмов Вопрос: Назовите метод изучения микроорганизмов, в котором используются питательные среды ?

Требования к питательным средам. 1. Питательность (содержание всех веществ, необходимых для жизнедеятельности микроорганизмов). 2. Требования к питательным средам. 1. Питательность (содержание всех веществ, необходимых для жизнедеятельности микроорганизмов). 2. Оптимальный ( 7, 2 -7, 4 -7, 6 ) (исключения: р. Н холерный вибрион (р. Н 8 -8, 6), дрожжи и плесень при р. Н 5, 0 -5, 5). 3. Изотоничность % (концентрация солей 0, 5 должна обеспечивать (осмотические услови 4. Стерильность и прозрачность. 5. Влажность не менее 20%

О влажности питательной среды (не менее 2 %), необходимой для жизнедеятельности микроорганизмов судят по О влажности питательной среды (не менее 2 %), необходимой для жизнедеятельности микроорганизмов судят по наличию конденсата на ней. Вопрос : Какие механизмы питания существуют у микроорганизмов? конденсат

Вопросы: 1. Что такое культивирование 2. Какие условия необходимы для культивирования микроорганизмов и почему Вопросы: 1. Что такое культивирование 2. Какие условия необходимы для культивирования микроорганизмов и почему ?

Классификации питательных сред I. По происхождению (по исходным компонентам): 1. Натуральные растительные и животные Классификации питательных сред I. По происхождению (по исходным компонентам): 1. Натуральные растительные и животные продукты 1. Искусственные • • состоят из продуктов растительного и животного происхождения не имеют определенного химического состава 2. Синтетические • • имеют строго определенный химическим состав. используются в научно-исследовательско деятельности

Классификации питательных сред II. По консистенции: 1. Жидкие(бульоны)для: § определения ферментативной активности § накопления Классификации питательных сред II. По консистенции: 1. Жидкие(бульоны)для: § определения ферментативной активности § накопления микробной массы. § определения типа дыхания 2. Полужидкие (желатиновые и агаровые 0, 2 -0, 7 % агара) для § определения ферментативной активности § подвижности микроорганизмов.

Тип дыхания микроорганизмов определяется жидких средах на • Поверхностно (пленкой) – растут аэробы • Тип дыхания микроорганизмов определяется жидких средах на • Поверхностно (пленкой) – растут аэробы • Придонно (осадком) – анаэробы • Диффузно (равномерная муть) – факультативные анаэробы.

Подвижность микроорганизмов определяется на полужидких средах при посеве «уколом в столбик» • подвижные вызывают Подвижность микроорганизмов определяется на полужидких средах при посеве «уколом в столбик» • подвижные вызывают помутнение всей толщи среды • неподвижные растут по «уколу» , оставляя остальную среду прозрачной.

Вопросы: • Что является локомоторным органом у бактерий ? • Классификация подвижных микроорганизмов. Примеры. Вопросы: • Что является локомоторным органом у бактерий ? • Классификация подвижных микроорганизмов. Примеры.

3. Плотные( 1, 5 -3 % агара) • Пластинчатые среды (в чашках Петри ) 3. Плотные( 1, 5 -3 % агара) • Пластинчатые среды (в чашках Петри ) для ü выделения чистой культуры ü определения ферментативной активности üопределения культуральных свойств. • Скошенные агары (в пробирках) для üнаращивания микробной массы üвыделение чистой культуры протея и определение его подвижности • Комбинированные среды • (в пробирках) для üопределения сахаролитической активности üопределения протеолитической активности üнакопление массы «ЧК»

Уплотнители питательных сред: Агар-агар– это • полисахарид • получен из красных морских водорослей • Уплотнители питательных сред: Агар-агар– это • полисахарид • получен из красных морских водорослей • имеет жесткую волокнистую структуру • не используется микроорганизмами для питания • плавится при температуре 80 -86 ° • застывает при 36 -45 ° Желатин– это • белок животного происхождения, • некоторые микроорганизмы используют ег как питательное вещество. • плавится при температуре 30 -34 ° • застывает при 22 -25 °

Вопросы: • Ученый, который ввел в практику плотные питательные среды ? • Температурные режимы Вопросы: • Ученый, который ввел в практику плотные питательные среды ? • Температурные режимы культивирования микроорганизмов на желатиновых и агаровых средах ?

Классификации питательных сред III. По составу: 1. Простые –для: • материала слабо загрязненного микрофлорой Классификации питательных сред III. По составу: 1. Простые –для: • материала слабо загрязненного микрофлорой • как основа сложных питательных сред (МПБ, МПА, пептонная вода и т. д. ). 2. Сложныеготовятся: • на основе простых питательных сред • с добавлением различных компонентов для изучения определенных микроорганизмов (кровь, сыворотка, яйцо, картофель, сахара, асцитическая жидкость и др. )

Классификации питательных сред III. По назначению : I. Универсальные (общеупотребительные) – это простые среды: Классификации питательных сред III. По назначению : I. Универсальные (общеупотребительные) – это простые среды: МПБ, МПА, пептонная вода. II. Специальные для культивирования и изучения определенных видов микроорганизмов

1. Элективные (избирательные) для определенного вида микроорганизмов основаны на принципе подавления роста других микроорганизмов. 1. Элективные (избирательные) для определенного вида микроорганизмов основаны на принципе подавления роста других микроорганизмов. • Желточно-солевой агар (ЖСА) стафилококков для • Кровяной агар (КА) для стрептококков • Сабуро для грибов • • • Пептонная вода (ПВ) р. Н 8 -8, 6 для холерного вибриона Эндо, Плоскирева, Левина для энтеробактерий Левенштейна-Йенсена для возбудителя туберкулеза Клаубергадля дифтерийной палочки Висмут сульфит агар (ВСА) сальмонелл для и др.

2. Дифференциально-диагностические (для дифференциации видов микроорганизмов п ферментативной активности). • Гисса по сахаролитической активности 2. Дифференциально-диагностические (для дифференциации видов микроорганизмов п ферментативной активности). • Гисса по сахаролитической активности • Ресселяпо сахаролитической активности • Олькеницкого сахаролитической и по протеолитической активности • Клиглерапо сахаролитической и протеолитической активности • и др.

3. Среды накопления (жидкие элективные среды) • Солевой бульон для стафилококка • Желчный бульон 3. Среды накопления (жидкие элективные среды) • Солевой бульон для стафилококка • Желчный бульон для сальмонелл • Селенитовый бульон для энтеробактерий • Сахарный бульон стрептококков для

В современных технологиях используются: • одноразовые пробирки с транспортными средами • вмонтированные тампоны для В современных технологиях используются: • одноразовые пробирки с транспортными средами • вмонтированные тампоны для взятия материала • все это упаковано в специальные контейнеры.

4. Консервирующие среды • способствуют длительному сохранения микробов • предохраняют загрязнения от (контаминации) • 4. Консервирующие среды • способствуют длительному сохранения микробов • предохраняют загрязнения от (контаминации) • облегчают маркировку взятого материала, • предотвращают выливание материала

Хромогенные среды (современные технологии ) Хромогенные среды позволяют определить несколько видов микроорганизмов. Принцип действия Хромогенные среды (современные технологии ) Хромогенные среды позволяют определить несколько видов микроорганизмов. Принцип действия этих сред: В них содержится несколько субстратов, позволяющих выявить высокоспецифичные ферменты у искомых микроорганизмов.

Культуральные свойства микроорганизмов это характер роста микроорганизмов на средах На плотных питательных средах микроорганизмы Культуральные свойства микроорганизмов это характер роста микроорганизмов на средах На плотных питательных средах микроорганизмы растут колониями КОЛОНИЯ – это, масса микроорганизмов, выросших: • из одной материнской клетки • при t° 37 ° • за 18 -20 часов

Выделяют 3 формы колоний: S – форма (классическая форма) круглая, выпуклая, с ровными краями, Выделяют 3 формы колоний: S – форма (классическая форма) круглая, выпуклая, с ровными краями, влажн гладкая, блестящая R – формас неровными краями, плоская, сух М – форма(слизистая) По величине колонии подразделяются: • • мелкие до 1 мм, средние - 2 -4 мм крупные- более 4 мм карликовые (точечные)

Цвет колонии определяется пигментом: • Золотистый St. aureus у • Сине-зеленый у Ps. aeruginosa Цвет колонии определяется пигментом: • Золотистый St. aureus у • Сине-зеленый у Ps. aeruginosa • Белый у St. epidermidis • Белый на Сабуро у. C. albicans • Красныйу S. marcescens • Черный у плесневых грибов • и др.

Культура микроорганизмов – масса микробов в субстрате или среде. Культура микроорганизмов бывает: • «Чистая Культура микроорганизмов – масса микробов в субстрате или среде. Культура микроорганизмов бывает: • «Чистая культура» состоит из одного вида организмов • «Смешанная культура» - состоит из разных видов микроорганизмов • «Жидкая культура» выросшая в бульоне – (бульонная) • «Плотная культура» колонии, выросшие на – плотной питательной среде

Сахаролитическая активность (на полужидких средах) Гисса Сахаролитическая активность (на полужидких средах) Гисса

Сахаролитическая активность (на плотных комбинированных средах) Ресселя Сахаролитическая активность (на плотных комбинированных средах) Ресселя

Сахаролитическая активность(на плотных пластинчатых средх) Сахаролитическая активность(на плотных пластинчатых средх)

Протеолитическая активность на жидких средах (МПБ) Протеолитическая активность на жидких средах (МПБ)

Протеолитические свойства изучают на жидких средах, содержащих белок или пептон (МПБ). Образование конечных продуктов Протеолитические свойства изучают на жидких средах, содержащих белок или пептон (МПБ). Образование конечных продуктов расщепления белков - индола, сероводорода аммиака изменяет цвет индикаторных бумажек, вставленных между горлышком и пробкой пробирок. Индол Сероводород Аммиак

Протеолитическая активность на полужидких средах(желатине) Протеолитическая активность на полужидких средах(желатине)

Элективная среда для коринебактерий Элективная среда для коринебактерий

Протеолитическая (лецитоветиллиназная) активность Протеолитическая (лецитоветиллиназная) активность

Элективная среда для сальмонелл Элективная среда для сальмонелл

Протеолитическая (гемолитическая) активность гемолиз B- Протеолитическая (гемолитическая) активность гемолиз B-

Протеолитическая (гемолитическая) активность гемолиз B- Протеолитическая (гемолитическая) активность гемолиз B-

Протеолитическая (гемолотическая) активность а- гемолиз Протеолитическая (гемолотическая) активность а- гемолиз

Протеолитическая (негемолитическая) активность Протеолитическая (негемолитическая) активность

Протеолитическая (гемолитическая) активность: a-гемолиз, B- гемолиз Протеолитическая (гемолитическая) активность: a-гемолиз, B- гемолиз

Протеолитические свойства. Гемолитическая активность Лецитоветилленазная активность Вопросы: 1. Наэовите питательные среды 2. Опишите культуральные Протеолитические свойства. Гемолитическая активность Лецитоветилленазная активность Вопросы: 1. Наэовите питательные среды 2. Опишите культуральные свойства микробов 3. Определите виды микроорганизмов

Культуральные свойства стафилококков стрептококков Культуральные свойства стафилококков стрептококков

Среда Клиглераплотная комбинированная среда. Двухсахарная, содержащая лактозу, (в скошенной части) и глюкозу (в столбике), Среда Клиглераплотная комбинированная среда. Двухсахарная, содержащая лактозу, (в скошенной части) и глюкозу (в столбике), позволяющая определить сахаролитическую активность. Лактоза Глюкоза

Среда Клиглера – плотная комбинированная среда. Протеолитическая активность определяется по образованию сероводорода 2 S) Среда Клиглера – плотная комбинированная среда. Протеолитическая активность определяется по образованию сероводорода 2 S) - черный осадок в (Н глубине среды.

Среда Олькеницкого плотная комбинированная среда. Трехсахарная, содержащая лактозу, сахарозу (в скошенной части) и глюкозу Среда Олькеницкого плотная комбинированная среда. Трехсахарная, содержащая лактозу, сахарозу (в скошенной части) и глюкозу (в столбике), позволяющая определить сахаролитическую активность. Лактоза, сахароза Глюкоза

Среда Олькеницкого плотная комбинированная среда. Протеолитическую активность определяют по образованию сероводорода 2 S) – Среда Олькеницкого плотная комбинированная среда. Протеолитическую активность определяют по образованию сероводорода 2 S) – черный осадок в (Н глубине среды и аммиака ( NH 4) при расщеплении мочевины – малиновое окрашивание среды.

Среда Клиглера – плотная комбинированная среда. Двухсахарная, содержащая лактозу (в скошенной части) и глюкозу Среда Клиглера – плотная комбинированная среда. Двухсахарная, содержащая лактозу (в скошенной части) и глюкозу (в столбике) позволяющая определить сахаролитическую активность. Протеолитическая активность определяется по образованию сероводорода 2 S) - черный осадок в (Н глубине среды. Лактоза Глюкоза

Среда Олькеницкого плотная комбинированная среда. Трехсахарная, содержащая лактозу, сахарозу (в скошенной части) и глюкозу Среда Олькеницкого плотная комбинированная среда. Трехсахарная, содержащая лактозу, сахарозу (в скошенной части) и глюкозу (в столбике), позволяющая определить сахаролитическую активность. Протеолитическую активность определяют по образованию сероводорода 2 S) – черный осадок в (Н глубине среды и аммиака ( NH 4) при расщеплении мочевины – малиновое окрашивание среды. Лактоза, сахароза Глюкоза

Приготовление питательных сред Сухие среды – порошки фабричного производства в различных упаковках с рецептурой Приготовление питательных сред Сухие среды – порошки фабричного производства в различных упаковках с рецептурой приготовления. Этапы приготовления: 1. Взвесить навеску сухого порошка 2. Варка среды в дистилированной воде 3. Установление р. Н среды 4. Разлив питательных сред Преимущества сухих сред: 1. Стандартность; 2. Стабильность; 3. Простота приготовления; 4. Удобная транспортировка.

Пластины Биохимические Дифференцирующие Энтеробактерии (ПБДЭ) Пластины Биохимические Дифференцирующие Энтеробактерии (ПБДЭ)

Системы Индикаторные Бумажные (СИБы) Системы Индикаторные Бумажные (СИБы)

Бакпечатки представляют собой небольшого размера чашки с питательной средой и крышкой для обеспечения стерильности. Бакпечатки представляют собой небольшого размера чашки с питательной средой и крышкой для обеспечения стерильности. Питательные среды могут быть нанесены на агаровые слайды, которые находятся в специальных контейнерах

Контроль качества лабораторных исследований Контроль готовых сред : 1. на стерильность. 2. биологический контроль. Контроль качества лабораторных исследований Контроль готовых сред : 1. на стерильность. 2. биологический контроль. 3. химический контроль.

1. Контроль стерильности питательной сре Питательные среды ставят в термостат на 2 суток При 1. Контроль стерильности питательной сре Питательные среды ставят в термостат на 2 суток При отсутствии на них признаков роста, их считаю стерильными. 2. Химический контроль питательной сред Устанавливается состав химических веществ и р. Н среды. 3. Определение роста эталонной культуры Несколько образцов среды засевают специально подобранными культурами микроорганизмами. По росту судят о питательных (ростовых) свойствах среды.