Патогенные вибрионы кампилобактеры синегнойная палочка Патогенные коринебактерии бордетеллы

Патогенные вибрионы, кампилобактеры, синегнойная палочка. Патогенные коринебактерии, бордетеллы, легионеллы, гемофилы, листерии.

МОРФОЛОГИЯ ВИБРИОНОВ

классический биовар серовар O 1 подсеровары Эльтор Огава Инаба Гикошима V. cholerae фаготипы Род Vibrio non-O 1 – другие серовары НАГ-вибрионы нехолерные вибрионы другие виды V. parahaemolyticus – острый гастроэнтероколит V. vulnificus – раневые инфекции, сепсис V. alginolyticus – наружный отит, раневые инфекции

Классификация холерных вибрионов • Vibrio cholerae O 1 cholerae • Vibrio cholerae O 1 eltor • Vibrio cholerae O 139 (Bengal)

Дифференцирующие критерии холерных вибрионов Реакция V. cholerae O 1 cholerae V. cholerae O 1 eltor V. cholerae O 139 Лизабельность классическим бактериофагом + - - Лизабельность бактериофагом Эль Тор - + - Агглютинация куриных эритроцитов - +/- Чувствительность к полимиксину (50 ед/мл) + - - Лизис эритроцитов барана - + - Реакция Фогеса-Проскауэра - + -

Классификация вибрионов по Хайбергу Группа Биохимическая активность I II Арабиноза - Манноза к - Сахароза к к III IV V VI VIII к к к к -

Факторы вирулентности V. cholerae Факторы вирулентности Биологический эффект Белковый токсин Нарушение баланса электролитов, цитотоксический эффект (разрушение клеток эпителия тонкого кишечника) Эндотоксин Подавление иммунного ответа, сокращение гладкой мускулатуры тонкого кишечника Пили Адгезия к клеткам слизистой Муциназа, нейраминидаза Ферменты агрессии

Микробиологическая диагностика холеры Испражнения, рвотные массы, участки тонкого кишечника с содержимым, вода Бактериологический метод Посев на пептонную воду, щелочной агар или среду TCBS 6 -8 часов после начала исследования Изучение роста на пептонной воде: окраска по Граму, препарат висячая или раздавленная капля Пересев на 2 -ю пептонную воду и щелочной агар 12 -14 часов после начала исследования Ускоренная диагностика Иммунофлюоресцентная микроскопия, РНГА, реакция подавления подвижности

Микробиологическая диагностика холеры Изучение роста на плотных средах и пептонной воде: окраска мазка по Граму, висячая или раздавленная капля, оксидазная проба, агглютинация на стекле с O 1, RO и O 139 сыворотками Выделение чистой культуре на скошенном щелочном агаре или агаре Клиглера Идентификация культуры: агглютинация с O 1 (если “+” – реакция на стекле с сыворотками Огава и Инаба) и O 139 сыворотками, чувствительность к бактериофагам, гемолиз, агглютинация куриных эритроцитов, идентификация по биохимическим признакам, иммунофлюоресцентный тест Окончательный ответ 36 -48 часов после начала исследования

МОРФОЛОГИЯ КАМПИЛОБАКТЕРОВ

Электронограмма Helicobacter pylori

Классификация капилобактеров и хеликобактеров Семейство Род Вид Отношение к температуре C. jejuni Campylobacter Термофилы Diseases Диарейные инфекции C. coli Диарейные инфекции C. fetus Spirillaceae Сепсис, менингиты, эндокардиты Мезофилы Helicobacter H. pylori Язвенная болезнь желудка и 12 перстной кишки

Микробиологическая диагностика кампилобактериозов Кровь, спинно-мозговая жидкость, испражнения, рвотные массы Изучение препаратов, окрашенных по Граму, водным фуксином. Посев на среды с антибиотиками Выделение чистой культуры на скошенном агаре 48 часов культивирования Идентификация культуры: окраска по Граму, висячая или раздавленная капля (подвижность), оксидазная и каталазная проба, чувствительность к налидиксовой кислоте. Окончательный ответ

Микроскопическая диагностика инфекций, вызванных Helicobacter pylori

Pseudomonas aeruginosa (чистая культура)

Pseudomonas aeruginosa (мокрота)

Рост P. aeruginosa на среде Mac. Conkey

Микробиологический диагноз заболеваний, вызванных P. aeruginosa Кровь, гной, экссудат, мокрота, испражнения, моча, спинномозговая жидкость Бактериологическое исследование Серодиагностика (определение специфических антител - ИФА) Посев на элективные и универсальные среды Микроскопия мазка, окрашенного по Граму Получение чистой культуры Морфология колоний, пигмент, запах, продукция цитохромоксидазы Определение фаговариантов Изучение биохимических свойств Пигмент, запах, рост при 420 C и 50 C Определение чувствительности к антибиотикам Определение серовариантов

Заболевания, вызываемые коринебактериями Виды рода Corynebacterium Болезнь C. diphtheriae Дифтерия C. ulcerans Ангина у иммунодефицитных лиц C. jeikeium Септицемия, инфекции мягких тканей C. urealyticum Инфекции мочевого тракта (пиелонефрит, цистит и др. оппортунистические инфекции) C. minutissimum Эритразма, оппортунистические инфекции C. xerosis Оппортунистические инфекции C. pseudodiphtheriticum Эндокардит, оппортунистические инфекции C. striatum Оппортунистические инфекции Arcanobacterium (ранее Corynebacterium) hemolyticum Хронические тонзиллиты, поражения кожи

Морфология Corynebacterium diphtheriae

gravis Биотипы C. diphtheriae mitis intermedius

Факторы вирулентности C. diphtheriae Факторы вирулентности Биологический эффект Белковый токсин Нарушает синтез белка, (гистотоксин) состоит из А- и поражая клетки миокарда, В-субъединиц надпочечников, нервных ганглиев Гликолипид (6 -6’-диэфир. Нарушает фагоцитоз трегалозы) Гиалуронидаза Нейраминидаза Нарушают проницаемость ткани

Микробиологическое исследование при дифтерии I этап Мазки со слизистой оболочки зева и носа, плёнки, материал из кожных очагов и др. Бактериоскопическое исследование Мазок, окраска по методу Грама, Нейссера, Лёффлера и др. Мазок, окраска корифосфином (люминесцентная микроскопия) Ориентировочное заключение Бактериологическое исследование Первичный посев на элективные среды с теллуритом (Клауберга и др. ) и кровяной агар Экспресс-методы диагностики Биохимические и молекулярнобиологические исследования: ПЦР (обнаружение tox-гена) Предварительный ответ

Микробиологическое исследование при дифтерии II- III этапы Учёт результатов посева Мазок, окраска по методу Грама, Нейссера или Лёффлера Культуральные признаки. Восстановление теллурита Предварительный ответ Пересев типичных колоний на элективные среды с теллуритом (получение чистой культуры) Идентификация чистой культуры Мазок, окраска по методу Грама, Нейссера или Лёффлера По культуральным признакам По биохимическим признакам Определение чувствительности к антибиотикам Определение токсигенности: реакция преципитации в агаре, ИФА и др. ; ПЦР (обнаружение tox-гена) Окончательный ответ

Определение токсигенности C. diphtheriae

Морфология Bordetella pertussis

Факторы вирулентности B. pertussis Факторы вирулентности Биологический эффект Филаментозный гемагглютинин Связывается с гликолипидами мембран клеток мерцательного эпителия дыхательных путей, с R 3 -гликопротеиновым рецептором поверхности полиморфноядерных лейкоцитов и инициирует фагоцитоз Коклюшный токсин (токсин пертуссин) S 1 -субъединица пертуссина рибозилирует мембранный белок Gi; S 2 субъединица пертуссина связывается с гликолипидом поверхности клеток респираторного тракта; S 3 -субъединица пертуссина связывается с ганглиозидами поверхности фагоцитов Пили Адгезия к мерцательному эпителию дыхательных путей Пертактин Адгезия к мерцательному эпителию дыхательных путей Аденилатциклаза Подавляет киллинг-активность фагоцитов и миграцию моноцитов Дерматонекротоксин Повреждает кожу и является летальным фактором для лабораторных животных Трахеальный токсин Пептидогликановый фрагмент, разрушающий реснитчатые клетки дыхательных путей, стимулирует реализацию интерлейкина-1 (лихорадка) Эндотоксин (липополисахарид) Активирует комплемент и стимулирует выработку цитокинов

Микробиологическое исследование при коклюше и паракоклюше I этап Мазки из верхних отделов носоглотки, мокрота (метод «кашлевых пластинок» ) Бактериологическое исследование Посев на элективные среды (КУА, среда Борде-Жангу и др. ) Экспресс-методы диагностики Биохимические и молекулярнобиологические исследования: ПЦР Иммунохимические исследования: иммунофлюоресцентная микроскопия Предварительный ответ

Микробиологическое исследование при коклюше и паракоклюше II - III этапы Учёт результатов посева: мазок, окраска по методу Грама, культуральные признаки Сыворотка крови Пересев типичных колоний на основные и элективные среды (получение чистой культуры) Серодиагностика (ретроспективно): РА, РСК и др. Идентификация чистой культуры Мазок, окраска по методу Грама По культуральным признакам По биохимическим признакам Серологическая идентификация Окончательный ответ Определение чувствительности к антибиотикам

Морфология Legionella pneumophila

Колонии Legionella pneumophila

Факторы вирулентности L. pneumophila Состояние и факторы вирулентности Биологический эффект Факультативный внутриклеточный паразитизм Поражение альвеолярных макрофагов и моноцитов; ингибирование фаголизосомального слияния при фагоцитозе Главный белок наружной мембраны (порин) Видоспецифический белок, необходимый для связывания С 3 -рецептора макрофага, обладает иммуногенными свойствами Цитолизин или главный секреторный белок Zn-металлопротеаза с цитотоксической и гемолитической активностью Липополисахарид Эндотоксин Главный белок цитоплазматической мембраны Белок теплового шока Легиолизин Гемолизин, образующий коричневый пигмент на тирозинсодержащей среде Протеолитические ферменты: фосфатаза, липаза, нуклеаза Разрушение клеток хозяина Возможность нахождения и размножения в амёбах Длительное сохранение во внешней среде

Морфология Haemophilus influenzae

Колонии Haemophilus influenzae

Морфология Listeria monocytogenes

Колонии Listeria monocytogenes