Патогенные грибы Лабораторная диагностика микозов МК ВНМУ им

Патогенные грибы. Лабораторная диагностика микозов. МК ВНМУ им. Н. И. Пирогова Кафедра микробиологии

Классификация n n n Царство Mycota (Fungi) Отделы: Eumycota (истинные грибы) Myxomycota (грибы-слизевики) Классы: Совершенные грибы: Oomycetes Zygomycetes Ascomycetes Basidiomycetes Несовершенные грибы Deuteromycetes

Морфология грибов Дрожжи и дрожжеподобные грибы n Мицелиальные грибы n Диморфные грибы (при 25 -28 0 С – мицелиальные формы, при 37 0 С – дрожжевые формы) n

Морфология дрожжеподобных грибов

Морфология мицелиальных грибов

Ультраструктура клетки гриба ядро с оболочкой - эукариоты; n митохондрии, эндоплазматический ретикулум; n мембранные образования: лизосомы, фагосомы, хитосомы, сегресомы; n клеточную стенку, которая имеет хитин и эргостерол n

Биологические особенности n 1. 2. 3. 2 цикла развития: Половой (все грибы, кроме дейтеромицетов) Неполовой (все грибы) Способы размножения: Почкование (дрожжевые грибы) Дробление мицелия (вегетативный способ) Спорами

Виды спор n n 1. 2. 3. 4. 5. Половые споры (эндоспоры): зигоспоры, аскоспоры, базидиоспоры Неполовые споры или конидии (экзоспоры): Бластоспоры (дрожжи) Хламидоспоры (дрожжи) Артроспоры (дерматомицеты) Конидиоспоры (микро- и макроконидии) Алейрии (дерматомицеты)

Культуральные свойства Хемогетеротрофы n Факультативные анаэробы или аэробы n Оптимальная температура 25 -30 0 С n Оптимальное р. Н 6, 0 -6, 5 n Скорость роста – от 24 -48 ч (дрожжи) до 2 -4 недель (дейтеромицеты) n

Среды для культивирования грибов Среда Сабуро n Рисовый отвар n Овощные отвары n

Характеристика колоний Гладкие, белые (по типу бактериальных) – дрожжевые грибы и диморфные грибы при t=37 0 С n Кожистые, гладкие или ворсистые n Бархатистые n Гипсовидно-мучнистые дейтеромицеты n Бугристые n Пушистые – мицелиальные грибы n

Резистентность Чувствительны к высоким температурам n Чувствительны к действию кислот: 3 -7% уксусной кислоте, 1 -2% салициловой и бензойной кислоте n Чувствительны к 5% хлорной извести, 10% формалину n Споры умеренно устойчивы к действию УФО, высушиванию n

Факторы патогенности Ферменты патогенности (кератиназы, протеазы, липазы) n Токсины (термостабильные), напр. , афлатоксины, фузариотоксины n Аллергены ( вызывают формирование ГЧЗТ) n Капсула ( некоторые диморфные грибы) n

Эпидемиология микозов В зависимости от способа инфицирования микозы разделяют на 2 группы: n Экзогенные микозы – человек инфицируется спорами грибов из окружающей среды или при контакте с больным человеком или животным n Эндогенные микозы (оппортунистические) n

Факторы, способствующие развитию эндогенных микозов n n n n Нерациональное лечение антибиотиками, сульфаниламидами Длительный прием иммунодепрессантов Эндокринные заболевания (сахарный диабет) Опухолевые заболевания Иммунодефициты Хронические заболевания ЖКТ, гипо- и авитаминозы Профессиональные условия (повышенная влажность, травматизм)

Классификация микозов n Глубокие (висцеральные, системные микозы) ¨ Бластомикоз, n Подкожные микозы ¨ Мадуромикоз, n кокцидиоидоз, гистоплазмоз споротрихоз Эпидермомикозы ¨ Дерматомикозы n Кератомикозы (поверхностные) ¨ Белая n пьедра, черная пьедра Оппортунистические микозы слизистых оболочек, легких (кандидамикозы, аспергиллез, пенициллиноз)

Дерматомикозы n n Для людей патогенны около 40 видов. n Роды: Microsporum ( 16 видов ) Epidermophyton ( 2 вида ) Trichophyton ( 24 вида )

Эпидемиология дерматомикозов 3 группы дерматомицетов: 1. Антропофильные (T. rubrum, T. tonsurans)- человек инфицируется от больного человека 2. Зоофильные (M. canis) – человек инфицируется от больного животного 3. Геофильные (M. gypseum) человек инфицируется спорами из окружающей среды (почвы)

Патогенез Поражение кожи и ее придатков (волосы, ногти) n Формирование воспалительной реакции в коже n Формирование ГЧЗТ n Иммунитет n Нестойкий, n ненапряженный n

Виды дерматомикозов n Эпидермофития: поражение кожи межпальцевых промежутков стоп, ногтей, складок кожи ¨ руброфития (T. rubrum) ¨ эпидермофития паховая (E. flocсosum) ¨ эпидермофития стоп (T. interdigitalis)

Виды дерматомикозов n Трихофития: поражение кожи, волос, ногтей ¨ Антропофильные (T. tonsurans, T. violaceum) ¨ зоофильные (T. mentagrоphytis) n Микроспория: поражается кожа, волосы ¨ антропофильные n (M. ferrugineum) ¨ зоофильные (M. canis) Фавус (парша) : поражение кожи, волос ¨ T. schoenleinii

Лабораторная диагностика n n n Материал для исследования: чешуйки пораженной кожи, волосы, кусочки ногтей Микроскопический метод: обработка материала 5 -10% щелочью для растворения кератина микроскопия неокрашенных или окрашенных раствором Люголя мазков выявление мицелиальных форм и спор гриба (характерный вид для определенного рода)

Морфологические отличия n n Microsporum – мицелий тонкий, расположение спор в волосе мозаичное Epidermophyton – короткий, разветвленный мицелий в коже, наличие артроспор Trichophyton – тонкий, разветвленный или толстый сегментированный мицелий, споры в волосе располагаются параллельными цепочками Парша (фавус) – тонкий сегментированный мицелий, пузырьки воздуха, скопления липидов

Лабораторная диагностика n Культуральный (микологический) метод ¨ недостаток: длительность исследования (4 -6 нед. ) ¨ дифференциация грибов по морфологии, культуральным признакам, ферментативным свойствам Аллергический метод n Флюоресценция при УФО n ¨ Microsporum

Кандидозы Виды: C. albicans, C. tropicalis - около 20 видов n Вызывают эндогенные микозы (оппортунистические) n В норме входят в состав нормальной микрофлоры ЖКТ, верхних дыхательных путей, наружного слухового прохода, влагалища n

Классификация кандидамикозов n Поверхностные ¨ кандидозы слизистых оболочек ротовой полости или влагалища (молочница) ¨ кандидоз кожи (поражение крупных складок) ¨ кандидоз ногтей n Генерализованные: при иммунодефицитах n Висцеральный: кандидоз ЖКТ (дисбиоз) n Аллергическая форма

Кандидоз слизистой оболочки полости рта

Кандидоз кожи

Методы лабораторной диагностики поверхностных кандидозов Материал для исследования: налет Микроскопический метод ¨ мазок, окраска по Граму (Грам (+)) ¨ обнаружение псевдомицелия, почкующихся клеток Культуральный метод ¨ посев материала на среду Сабуро ¨ дифференциация кандид по сахаролитическим свойствам

Лабораторная диагностика генерализованных и висцеральных кандидозов Культуральный метод n Серологический метод (РСК, РА, РНГА) n Аллергический метод – внутрикожные пробы с кандида аллергеном n

Плесневые грибы n Роды: Penicillum n Mucor n Aspergillus n Вызывают оппортунистические микозы, преимущественно легочной локализации n

Морфология плесневых грибов

Морфология аспергилл

Культуральные свойства плесневых грибов

Лабораторная диагностика Культуральный метод Материал для исследования: мокрота, промывные воды бронхов Критерии микологического диагноза: многократное выделение плесневых грибов в большом титре из материала Идентификация возбудителя по морфологии, культуральным, биохимическим свойствам n n n Серологический метод (РА, РСК, РНГА)

Лечение Особенности лечения: n При поверхностных микозах лечение, преимущественно, местное n При глубоких микозах лечение пероральное или парентеральное n При хронических оппортунистических микозах (кандидамикозах) допускается применение аутовакцин n

Классификация противогрибковых препаратов Полиеновые антибиотики (нистатин, леворин) n Гризеофульвин n Флуцитозин n Производные имидазола (кетоконазол, клотримазол, метронидазол, миконазол, буфаназол, оксиконазол) n

Классификация противогрибковых препаратов Производные триазола (флуконазол, итраконазол) n Аллиламины (нафтиридин, толциклат, толнафтат, тербинафин) n Циклопирокс n Антисептики: антифунгин, препараты йода n Сангвиритин n Ундециленовая кислота n