П И Чайковскій некрологъ Правительственный Вѣстникъ

П. И. Чайковскій (некрологъ). // «Правительственный Вѣстникъ» . 26 октября (7 ноября) 1893, № 235, стр. 2. 1

Смерть настигла Чайковского в расцвете творческих сил и славы: композитор заразился холерой через несколько дней после того, как дирижировал на премьере Шестой симфонии в Петербурге (премьера — 16 октября, начало болезни — 21 октября); Скончался в 3 часа пополуночи 25 октября (6 ноября по новому стилю) 1893 года от холеры «неожиданно и безвременно» в квартире своего брата Модеста, в доме 13 на Малой Морской. Распоряжение похоронами, с Высочайшего соизволения, было возложено на дирекцию Императорских театров, что явилось «примером единственным и вполне исключительным» П. И. Чайковскій (некрологъ). // «Правительственный Вѣстникъ» . 26 октября (7 ноября) 1893, № 235, стр. 2. 2

Лекция№ 10 Vibrio Основные вопросы 1. Классификация и свойства рода Vibrio. 2. Холерный вибрион. Основные свойства, лабораторная диагностика. НАГ вибрионы и НАГ инфекция. 3

По данным ВОЗ, во всём мире холера уносит жизни 120 тыс. человек ежегодно. Обложка книги Матвея Мудрого «Краткое наставление о холере» . - С-Пб. , 1830 4

ХОЛЕРА (лат. cholera) - острая кишечная антропонозная инфекция. Характеризуется фекально оральным механизмом заражения, поражением тонкого кишечника, водянистой диареей, рвотой, быстрейшей потерей организмом жидкости и электролитов с развитием различной степени обезвоживания вплоть до гиповолемического шока и смерти. 5

Возбудителем является холерный вибрион (Vibrio cholerae) – бактерия, похожая на запятую. 6

Очагом заболевания столетиями была Индия, но в 19 в. холера распространилась на все части света. Следуя за паломниками и торговцами она добралась до Европы впервые в 1830. 7

«Все холера виновата» (Павел Федотов, 1848 г. ). Художником показан случай сухой холеры (cholera sicca). У умершего цианотичный цвет лица, характерный для такого клинического течения болезни. Картина воспроизводит обстановку страха перед холерой, охватившего русское общество во время ее третьей пандемии. 8

Род Vibrio семейства Vibrionaceae Вибрионы эволюционно происходят из водных бактерий. Основной род Vibrio дифференцируют от других родов по биохимическим тестам. Основные виды • Vibrio cholerae, • V. parahaemolyticum, • V. vulnificus. 9

Морфология Холерный вибрион (запятая Коха) – подвижные, грам изогнутые палочки, имеют один полярный жгутик. Хорошо окрашиваются водным и карболовым фуксином, спор и капсул не образуют. 10

Биохимические свойства • Холерный вибрион сбраживает с образованием кислоты без газа многие углеводы. • Для дифференциации вибрионов используют триаду Хейберга, холерный вибрион разлагает сахарозу и маннозу, но не арабинозу. • Разлагает желатин, казеин, • свертывает молоко, образуя индол и аммиак. 11

Культуральные свойства. На 1% щелочной (р. Н 8, 6 9, 0) пептонной воде быстро размножаются, образуя голубоватую пленку. 1. Контроль 2. V. cholerae, 3. V. parahaemolyticum 12

Типоль подавляет рост Грамположительных бактерий. Глюкоза усваивается вибрионами, 3 % Na. Cl усиливает рост галофильных вибрионов 13

На плотных средах щелочной агар, желчно солевой агар, щелочной агар с кровью, TCBS агар – с тиосульфатом, цитратом, солями желчных кислот и сахарозой образуют гладкие стекловидные, прозрачные с голубым оттенком дисковидные колонии вязкой консистенции. 14

Желатиновый агар 15

Селективный TCBS агар – с тиосульфатом, цитратом, солями желчных кислот и сахарозой 16

Сахароза – источник ферментируемых углеводов. Тиосульфат натрия и цитрат железа – индикаторная система сероводород. Тиосульфат – источник серы. Китайский синий и крезоловый красный – индикаторы р. Н. Селективный агар для вибрионов 17

Селективный агар для вибрионов 18

Антигенная структура. • термостабильные О- антигены, • термолабильные Н- антигены. 19

Известно более 140 серогрупп Vibrio cholerae; их разделяют на – 1) агглютинирующиеся типовой холерной сывороткой О 1 (V. cholerae O 1), 2) не агглютинирующиеся типовой холерной сывороткой О 1 (V. cholerae non 01). они вызывают холероподобные заболевания (НАГ-инфекцию). 20

«Классическая» холера вызывается холерным вибрионом серогруппы О 1 (Vibrio cholerae O 1). Различают два биовара (биотипа) этой серогруппы: • классический (Vibrio cholerae biovar cholerae) • и Эль - Тор (Vibrio cholerae biovar eltor). Холерные вибрионы Эль-Тор в отличие от классических способны гемолизировать эритроциты барана (не всегда). 21

Биотипы по О антигену (соматическому) подразделяется на серотипы. • Инаба (Inaba) содержит фракцию С, • Огава (Ogawa) фракцию B, • Гикошима (правильнее Гикосима) (Hikojima) фракции B и С. Н антиген холерных вибрионов (жгутиковый) — общий для всех серотипов. 22

Факторы вирулентности: наружные белки мембраны – обеспечивают адгезию, жгутик и муциназа – проникновение через слизистую оболочку тонкого кишечника и прикрепление к энтероцитам, ферменты агрессии: -фибринолизин, - гиалуронидаза, - нейроминидаза. 23

Токсины: -холероген (англ. CTX) – белковый экзотоксин- функциональный блокатор- вызывает гиперсекрецию воды и хлоридов в просвет кишечника, нарушение обратного всасывания натрия, что приводит к диарее и обезвоживанию организма; облададает цитотоксическим действием на клетки эпителия тонкого кишечника. - ЛПС (эндотоксин), защищает от фагоцитоза. 24

Бруцеллез (лат. brucellosis) — зоонозная инфекция, передающаяся от больных животных человеку, характеризующаяся множественным поражением органов и систем организма человека. Синонимы — мальтийская лихорадка, лихорадка Кипра, лихорадка Гибралтара, волнообразная лихорадка. 25

Классификация Возбудитель болезни — группа микробов рода бруцелл. Род: Brucella Виды: Br. melitensis (овец и коз) мальтийская бруцелла Br. abortus (крупного рогатого скота) Br. suis (свиней) Br. canis (инфекционного эпидидимита баранов) 26

Патогенез возбудитель в организм проникает алиментарным и половыми путями; бруцеллы вначале размножаются в ближайших лимфатических узлах, далее проникают во внутренние органы, инфекция принимает генерализованный характер. Наиболее благоприятную среду для размножения бруцеллы находят в беременной матке, что приводит к эндометриту, нарушению питания плода и аборту; 27

oмелкие коккобактерии (0, 3 -0, 6 мкм ) или мелкие палочки (0, 6 -2, 5 мкм), располагаются одиночно, парами и небольшими группами); 28

грамотрицательные; oспор не образуют; капсулу не образуют; неподвижные. 29

На плотных средах – мелкие, прозрачные с ровным краем колонии. 30

31

микроаэрофилы; выращивают в атмосфере 10 -15% СО 2 (Br. bovis, Br. ovis в первой генерации); остальные виды бруцелл – аэробы; оптимальная температура 37 o. С; срок культивирования от 15 до 30 дн. 32

Факторы вирулентности: Эндотоксины ферменты агрессии – гиалуронидаза, каталаза, уреаза. 33

Лабораторный диагноз: Посев крови на питательные среды положителен в 50— 70 % случаев у больных бруцеллёзом: реакция Райта — положительна на 10 й день; реакция Кумбса — диагноз хронического бруцеллёза; 2 меркаптоэтанол аглютинитовый тест; реакция Хедльсона; кожная проба Бюрне. 34

Реакцию Райта ставят в пробирках с разведениями сыворотки крови больного физиологическим раствором (1 : 50, 1 : 100, 1 : 200, 1 : 400, 1 : 800); в каждую из пробирок добавляют по 1— 2 капли убитой культуры бруцелл (диагностикума) и ставят в термостат при температуре 37° на 20— 24 часа, после чего учитывают результат. За доказательный диагностический титр следует принимать положительную реакцию Райта в разведении сыворотки от 1 : 200 и выше. Реакция Райта может быть положительной в ряде случаев уже на 8— 9 -й день болезни в низких титрах, но обычно она обнаруживается в диагностических титрах лишь с 10— 11 -го дня болезни. 35

Агглютинация на стекле (реакция Хеддльсона) Берут из пальца около 1 мл крови; отстоявшаяся сыворотка должна быть совершенно прозрачной. Берут пластинку оконного стекла, тщательно обезжиренную спиртом и разграфленную на 6 квадратов. Сыворотку крови больного наливают при помощи градуированной пипетки в центр каждого квадрата в следующих количествах: 0, 08; 0, 04; 0, 02; 0, 01 мл. К каждой из- этих доз сыворотки добавляют по одной капле антигена Хеддльсона (убитая культура бруцелл, подкрашенная метиленовой синькой). Затем сыворотку, начиная с минимальной дозы, осторожно смешивают с антигеном при помощи стеклянной палочки. Контроль агглютинирующих свойств сыворотки производят в пятом квадрате стекла (0, 03 мл сыворотки и 0, 03 мл физиологического раствора), а контроль антигена— в шестом квадрате стекла (0, 03 мл антигена и 0, 03 мл физиологического раствора). Далее стекло равномерно подогревают в течение 2 минут над пламенем спиртовки. Если реакция положительна, то уже через 6— 8 минут в каплях сыворотки, к которым был добавлен диагностику» !, появляются хлопья, окрашенные в синий цвет (агглютинация). 36

37

Vibrio cholerae Классификация. Вид разделяют на биовары V. cholerae asiatica, V. cholerae eltor, по О антигену – на серогруппы (вызывают холеру вибрионы О 1 и О 139 групп) и серовары АВ Огава, АС Инаба, АВС Гикошима. Эль Тор вызывают гемолиз эритроцитов барана, агглютинируют куриные эритроциты, резистентны к полимиксину, более устойчивы во внешней среде. 38

Возбудители кишечного иерсиниоза и псевдотуберкулеза • • • Кишечный иерсиниоз острая инфекционная болезнь, характеризующаяся в первую очередь • поражением ЖКТ, тенденцией к генерализации с вовлечением в патологический процесс различных органов и систем. • Возбудитель кишечного иерсиниоза (Yersinia enterocolitica) описан в 1939 г. Д. Шлейфстейном и М. Колеманом. Таксономия. Y. enterocolitica относится к отделу Gracilicutes, семейству Enterobacteriaceae, роду Yersinia. Морфологические и тинкториальные • свойства. Возбудитель иерсиниоза полиморфен: имеет форму либо палочки с закругленными концами (длиной 0, 8 1, 2 мкм, шириной 0, 5 0, 8 мкм), либо овоидную с биполярным окрашиванием. Спор нет, иногда образует капсулу. Перитрих подвижен лишь при 18 20 °С, при 37 °С подвижность утрачивается. Некоторые штаммы имеют пили. Грамотрицателен. Культуральные свойства. Y. enterocolitica - факультативный анаэроб. Оптимальный р. Н для роста 7, 2 -7, 4. Наиболее благоприятная температура 22 28 °С, что является особеннос тью этого микроба. Возбудитель неприхотлив и растет на простых питательных средах. Биохимическая активность возбудителя высокая. В зависимости от ферментативных свойств различают 5 биохимических вариантов. Антигенная структура. Бактерии имеют О и. Я антигены, у некоторых штаммов обнаружен Л' антиген. По 0 анти гену различают более 30 серогрупп, из которых от больных чаще всего выделяют представителей серогрупп 03, 09, 05. Факторы патогенности. Y. enterocolitica образует эндотоксин, сходный с эндотоксином других энтеробактерий. Некоторые штаммы выделяют вещество, соответствующее экзо токсину и обладающее энтеро и цитотоксическим действием. У иерсиний обнаружены также инвазивный белок и белки, препятствующие фагоцитозу. 39

• • Адгезивная активность иерсиний связана с пилями и белками наружной мембраны. Действие факторов патогенности усиливается при низкой температуре. Резистентность. Возбудитель иерсиниоза чувствителен к высокой температуре, солнечным лучам, дезинфицирующим веществам, но очень устойчив к действию низких температур: хорошо переносит температуру морозильника (— 15— 20 °С), в холодильнике (4 °С) может размножаться. Эпидемиология. Y. enterocolitica широко распространена в природе: ее выделяют от многих видов животных и птиц. Обнаруживают иерсиний также в открытых водоемах, где они находятся в симбиозе с инфузориями, рыбами, что позволяет отнести кишечный иерсиниоз к сапронозным инфекциям. Источниками болезни для человека являются в основном крысы, мыши, обитающие в овощехранилищах, сельскохозяйственные животные и птицы, очень редко человек. • • Механизм заражения иерсиниозом фекально оральный, основным путем передачи является алиментарный: болезнь может возникнуть при употреблении фруктов, овощей, молока, мяса. Но возможны также контактный (при контакте людей с больными животными) и водный пути передачи. Болеют иерсиниозом люди всех возрастов, однако более восприимчивы дети. Болезнь регистрируется в холодное время года. Первые случаи кишечного иерсиниоза были описаны в начале 60 х годов во Франции и Бельгии. В настоящее время болезнь встречается во многих странах мира, в том числе и России. Заболеваемость в городах значительно выше, чем в сельской местности. Патогенез. Возбудитель попадает в организм через рот, в нижних отделах тонкой кишки (в илеоцекальном углу) при крепляется к эпителию слизистой оболочки, внедряется в клетки эпителия, вызывая воспаление. 40

• • Под действием токсинов усиливается перистальтика кишечника и возникает диарея. Иногда в патологический процесс вовлекается аппендикс, развивается аппендицит. Незавершенный фагоцитоз способствует генерализации процесса. У людей со сниженным иммунитетом могут развиться сепсис, септикопиемия с образованием вторичных гнойных очагов в мозге, печени и селезенке. Кл и н и к а. Клиническая картина иерсиниоза разнообразна как по тяжести (от бессимптомной до тяжелой форм), так и по клиническим проявлениям. Различают гастроэнтероколитическую, аппендикулярную и септическую формы. Инкубационный период составляет от 1 до 4 дней. Болезнь начинается остро с повышения температуры тела до 38— 39 °С, признаков общей интоксикации, рвоты, болей в животе, поноса. Затем появляется другая симптоматика (в зависимости от формы болезни). Течение достаточно продолжительное. • Иммунитет изучен мало. • Микробиологическая диагностика. Материалом для исследования служат кал, моча, кровь, цереброспинальная жидкость, удаленный аппендикс. Основной метод диагностики — бактериологический, целью которого являются идентификация возбудителя, определение антибиотикограммы, внутривидовая идентификация (установление серовара, биохимического варианта, фаговара). В качестве вспомогательного применяют серологический метод (РПГА). • Лечение. При иерсиниозе применяют антибиотики широкого спектра действия. • Профилактика заключается в соблюдении санитарно гигиенических правил, особенно при хранении и приготовлении пищи. 41