Особенности морфологии спирохет риккетсий хламидий актиномицетов микоплазм Стерилизация

Особенности морфологии спирохет, риккетсий, хламидий, актиномицетов, микоплазм. Стерилизация. Дезинфекция.

Порядок Spirochaetales Семейство Leptospiraceae Род Leptospira Вид L. interrogans Серотипы: §L. icterohaemorrhagiae §L. canicola §L. pomona §L. grippotyphosa Семейство Spirochaetaceae Род Treponema Виды: §T. pallidum §T. pertenue §T. carateum §T. bejel Род Borrelia Виды: B. recurrentis B. persica B. caucasica B. burgdorferi

Морфологические признаки спирохет Род Borrelia Treponema Leptospira Количество и характер завитков Характер движения Окраска по методу Романовского. Гимзы • 3 -10 крупные неравномерные • Толчкообразное, • Синесгибательнофиолетовая поступательное • 8 -12 мелкие равномерные • Плавное, сгибательнопоступательное • Бледно-розовая • Многочисленные • Розово • Очень активное, сиреневая первичные завитки, вращательновторичные завитки поступательное образуют крючки с (s)-образная форма

УЛЬТРАСТРУКТУРА СПИРОХЕТЫ

СПИРОХЕТЫ В ПРЕПАРАТЕ КРОВИ

Treponema pallidum в мазке-препарате из содержимого твердого шанкра, окраска по методу Бурри

Порядок Ricketsiales Сем. Ricketsiacea Сем. Anaplasmataceae Род Роды: Ricketsia Orientia Wolbachia Ehrlichia Anaplasma Neoricketsia Виды: R. prowazekii R. typhi R. sibirica O. tsutsugamushi

Морфологические типы риккетсий

Особенности морфологии вегетативной (1) и покоящейся (2) форм риккетсий 1) 2)

РИККЕТСИИ В КЛЕТКАХ – ОКРАСКА ПО МЕТОДУ ЗДРОДОВСКОГО РИККЕТСИИ Окраску производят разведенным карболовым фуксином (10 -15 капель фуксина на 10 мл дистиллированной воды) в течение 5 минут. Окрашенный препарат промывают водой, а затем обесцвечивают в растворе органической или минеральной кислоты (0, 5% лимонная кислота, 0, 01% соляная кислота) в течение 2 -3 секунд. Затем препарат промывают водой и докрашивают 0, 5% раствором метиленовой синьки в течение 0, 5 минуты. Микроскопическая картина. Риккетсии окрашиваются в рубиново-красный цвет, в то время как клетка-хозяин обесцвечивается кислотой и дополнительно окрашивается в голубой (протоплазма) или синий (ядро) цвет.

Хламидии Порядок Chlamydiales Семейство Chlamydiaceae Роды: Виды: Chlamydia C. trachomatis Chlamydophila l. C. pneumoniae l. C. psittaci

!

Порядок Mycoplasmatales Сем. Mycoplasmataceae Род Mycoplasma Род Ureaplasma (около 100 видов) • M. pneumoniae • M. hominis • M. genitalium • M. species • M. incognita • U. urealiticum • U. parvum

Микоплазмы в эпителиоцитах Колонии микоплазм на плотной среде

Порядок Actinomycetales Сем. Actinomycetaceae Род Actinomyces Виды: • А. israelii • A. bovis • A. viscosus

Мазок из чистой культуры A. bovis. Окраска по методу Грама.

Протокол. Особенности морфологии спирохет, риккетсий, хламидий, микоплазм, актиномицетов. Исследуемый материал 1)Treponema pallidum в мазкепрепарате из содержимого твердого шанкра, окраска по методу Бурри Что сделать Результат Изучить морфологию (демонстрация), зарисовать. Рисунок

Исследуемый материал 2) Мазокпрепарат из вакцинного штамма риккетсий, окраска по методу Грама Что сделать Результат Изучить Рисунок морфологию (демонстрация), зарисовать.

Исследуемый материал 3) Агаровая культура Actinomyces viscosus Что сделать Приготовить мазокпрепарат, окрасить по методу Грама, изучить морфологию, зарисовать Результат Рисунок

МЕТОДЫ СТЕРИЛИЗАЦИИ

Стерилизация (обеспложивание) – совокупность способов полного уничтожения активных и покоящихся форм микроорганизмов на объектах внешней среды. Методы Физический Механический Химический

СТЕРИЛИЗАЦИЯ В ПЛАМЕНИ Механизм: пиролиз, сгорание до конечных продуктов

АВТОКЛАВИРОВАНИЕ 132 °C — 2 атмосферы(2 кгс/см 2) — 20 минут — основной режим. 120 °C — 1, 1 атмосфера(1, 1 кгс/см 2) — 45 минут — щадящий 110 °C — 0, 5 атмосферы(0, 5 кгс/см 2) — 180 мин — особо щадящий режим Механизм: деструктуризация – денатурация белков, нуклеиновых кислот, плавление и повышение текучести липидов

СТЕРИЛИЗАЦИЯ СУХИМ ЖАРОМ температура воздуха - 180° С – 60 минут. температура воздуха - 160° С – 150 минут. Механизм: деструктуризация – денатурация белков, нуклеиновых кислот, плавление и повышение текучести липидов

СТЕРИЛИЗУЮЩЕЕ РЕНТГЕНОВСКОЕ ОБОРУДОВАНИЕ рентгеновские лучи (частота 1018— 101 в Гц) и гамма-лучи (1020). ОБОРУДОВАНИЕ ДЛЯ γ-СТЕРИЛИЗАЦИИ изотоп кобальта-60, изотоп цезия-137 Механизм: мутации не совместимые с жизнеспособностью, нарушение обменных процессов

ПРИМЕНЕНИЕ УЛЬТРАФИОЛЕТА длина волны 200 -300 ммк Механизм: подавление репликации ДНК и повреждение нуклеиновых кислот (особенно м. РНК)

УЛЬТРАЗВУКОВАЯ СТЕРИЛИЗАЦИЯ на частотах 20 к. Гц и выше, при интенсивности более 0, 5 Вт/см 2 в кавитационном режиме облучения. Механизм: в микроорганизмах, находящихся в жидкой среде, образуется кавитационная полость, которая заполняется парами жидкости, в пузырьке возникает давление, что приводит к дезинтеграции цитоплазматических структур

ФИЛЬТРАЦИЯ ФИЛЬТРАЦИОННЫЕ НАСАДКИ НА ШПРИЦ Размер фильтрующей поверхности мембран варьирует от 3 мм до 30 мм, размер пор от 0, 1 мкм до 5 мкм. ФИЛЬТР ЗЕЙТЦА

ЛАМИНАРНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ

ХИМИЧЕСКАЯ СТЕРИЛИЗАЦИЯ ГАЗОВАЯ ЖИДКОСТНАЯ окись этилена Кислота+окислитель(например «Первомур» ) Альдегид(например формалин) Детергент(например хлоргексидина биглюконат) Галоид(например Повидон-йод) Механизм: хлорсодержащие вещества и окислители, проникнув в клетку, вступают в связь с протеинами, вызывая реакцию окисления; минеральные щёлочи и кислоты, действуют разрушительно на микробную клетку с помощью гидроксильных (ОН-) и водородных (Н-) ионов, вызывая гидролиз; фенолы при проникновении в клетку вызывают коагуляцию белков.

Дезинфекция - это комплекс мероприятий, направленных на уничтожение или снижение количества возбудителей инфекционных болезней, разрушение токсинов на объектах внешней среды.

Очаговая дезинфекция - избирательное уничтожение возбудителя конкретной инфекции если инфекционное заболевание уже возникло, или есть подозрение на его возникновение. Текущая дезинфекция – проводится в помещениях, где которых находится источник инфекции. Заключительная дезинфекция – предупреждение распространения инфекционных агентов через объекты, которые побывали в контакте с больным. Проведение инициируется сразу после исключения источника инфекции. Профилактическая дезинфекция проводится постоянно - независимо от выявления источника инфекции; прерывает возможный механизм передачи целой группы болезней, которые имеют один и тот же фактор передачи.

Протокол. Контроль стерильности шовного материала День исследования 1 день 2 день Исследуемый материал Хирургическая шовная нить после стерилизации Рост культуры в сахарном питательном бульоне Что сделать Результат Произвести посев: соблюдая правила асептики, внести отрезок нити в сахарный питательный бульон. Инкубировать при t=37ºC 24 часа Описать признаки роста в среде Приготовить мазок-препарат из полученной культуры, окрасить по Граму, изучить Граму морфологию, зарисовать Описание, рисунок, заключение