ОСОБЕННОСТИ КЛЕТОЧНЫХ ЭЛЕМЕНТОВ ГЕМОЛИМФЫ МУХ А. Г Бесшапошникова , студентка 3 курса биолого-химического факультета Введение Синантропные мухи являются переносчиками различных заболеваний, что требует организации истребительных мероприятий для более успешного их осуществления необходимо знать в какие этапы онтогенеза насекомые могут быть более чувствительны к поражающему фактору, но при этом важную роль может сынрать изучение клеточного иммунитета и его слабых звеньев в ходе развития окрыленных форм. бинокулярной лупой в чашке Петри, содержащей физиологический раствор, производится вскрытие насекомого и выделяются яичники. Далее производится определение фаз развития фолликулов в яичниках и установление физиологического возраста. Стадии развития яйцевых фолликулов и физиологический возраст у мух (по Дербеневой. Уховой, 1974)(рис. № 1) (рис. № 2), эноцитоиды (рис. № 3), фагоциты (рис. № 4), и прогемоциты (рис. № 5) (что подтверждает литературные данные Флоренсов, 1986; Курючкин, 1992). Цель и задачи работы Рисунок № 4. Фагоцит Цель: Освоить методики необходимые для прохождения летней практики. Задачи: 1. Изучить схему строения яичников, определить фазы развития фолликула и физиологический возраст 2. Научиться определять различные форменные элементы гемолимфы мух. Рисунок № 4. Фагоцит Новизна работы Рисунок № 2. Плазмоцит Впервые для выявления клеточных элемпентов гемолимфы примененна окраска по Граму, Определяется оксифильное ядро и базофильная цитоплазма. Предпосылки Изучение механизмов иммунного ответа у насекомых вызывает большой научный интерес , так как многие вопросы иммунитета в том числе гемоцитарная формула и активность у короткоусых двукрылых изучена недостаточно и материалы встречаются по ее изменению в онтогенезе и изменению активности гемоцитов с возрастом насекомого крайне редко ( журн. Russian Journal of Immunology). Рис № 1. Фазы развития фолликулов и физиологический возраст А-фаза Nо; Б- фаза I; В-фаза IIа; Г-фаза IIб; Г 1 - фаза IIб(поздняя); Д-фаза III; Е-фаза IV; Ж- фаза V; З- самка, проделавшая 1 яйцекладку; И- самка, проделавшая 2 яйцекладки; К-самка, проделавшая 3 яйцекладки. 1 яйцевая клетка; 2 ядра питающих клеток; 3 фолликулярный эпителий; 4 -концевая камера; 5 концевая нить; 6 - начало образования следующего фолликула; 7 - зерна желтка; 8 -скопления желтка; 9 желтое тело; 10 -желтые тела Плазмоциты- амебоидные клетки с многочисленными уроподиями. Размер клеток 5, 3 ± 0, 3 мкм. Размер ядра 4, 0 ± 0, 2 мкм. Ядро и цитоплазма ацидофильно окрашены. Цитоплазма имеет мелкозернистую структуру и частью вакуолизированна. Наблюдаются мелкие гранулы. Фагоциты- амебоидные клетки длиной 19, 3 ± 0, 3 мкм и шириной 9, 7± 1, 4 мкм. Ядро имеет округлую или вытянутую форму, ацидофильно окрашено, размер ядра 4, 5 ± 0, 4 мкм. Цитоплазма базофильно или амфифильно окрашена. В ней встречаются базофильные гранулы или вакуоли. Иммунологические методы исследования Полученная в процессе вскрытия капля гемолимфы в объеме 0, 025 мкл с помощью Пастеровской пипетки помещается в каплю физиологического раствора, находящегося в лунке предметного стекла. Затем стекло помещается в термостат на пол часа, в дальнейшем надосадочная жидкость удаляется из лунки, а осадок клеток ресуспендируется физиологическим раствором такого же объема. На плоском предметном стекле делается мазок и окрашивается по Граму. Производится анализ форменных элементов. Методы исследования Энтомологические методы исследования Отловленные мухи усыпляются эфиром, декапитируются для дальнейших иммунологических исследований. С помощью препаровальных игл под Форменные элементы гемолимфы В результате микроскопирования полученных препаратов и их окраске по Граму было выявлено 4 типа клеточных элементов крови мух : плазмоциты Рисунок № 4. Рисунок № 3. Эноцитоиды- клетки вытянутой, овальной или полигональной формы, длиной 29, 9 ± 1, 8 мкм и шириной 20, 9 ± 1, 3 мкм. Ядро имеет инвагинацию и выступы, ацидофильно окрашено, размер ядра 4, 6± 0, 5 мкм. Цитоплазма окрашена нейтрально или амфифильно, в ней отмечаются многочисленные гранулы и лентовидные митохондрии. Прогемоциты- небольшие округлые клетки размером 4, 8 ± 0, 2 мкм. Ядро круглое, диаметром 4, 0 ± 0, 1 мкм, ацидофильно окрашено и занимает практически всю клетку, вследствии чего цитоплазма имеет вид тонкого светлого ободка. Способны к розеткообразованию. Заключения 1. Изучили схему строения яичников, определили фазы развития фолликула и физиологический возраст. 2. Научились определять различные форменные элементы гемолимфы мух.
Скачать презентацию ОСОБЕННОСТИ КЛЕТОЧНЫХ ЭЛЕМЕНТОВ ГЕМОЛИМФЫ МУХ А Г Бесшапошникова
стенд.pptx