Особенности диагностики инфекционных заболеваний кошек
Особенности диагностики инфекционных заболеваний кошек к. в. н. Бажибина Е. СВК «Свой Доктор» г. Москва
кто хорошо диагностирует — хорошо лечит «qui bene diagnostic bene curat» Бургав 18 век Разновидности диагнозов Предварительный Клинический Дифференциальный …………………. Окончательный
Ds: • ХПН • Иннициированная Полный (поликистозом, кальцинозом, реноваскулярными клинический диагноз растройсвами и т. д. ) • Ассоциированная с гепатозом, панкреатитом и т. д. - этиологический - патогенетический - морфологический КОМПОНЕНТЫ - функциональный Ds: • Протозойная инвазия • ПВЭ • Гастроэнтероколлит • Гиповолемический шок • Дисбактериоз • Некроз эпителия киш-ка
«кто хорошо диагностирует — хорошо лечит» «qui bene diagnostic bene curat» Бургав 18 век Выявление этиологического фактора возможно при тщательной дифференциальной диагностике! От этого зависит полнота окончательного диагноза и получение максимального эффекта от проводимых терапевтических мероприятий!
Методы диагностики заболеваний Прямые методы Косвенные методы Характеризуются выявлением: 1. самого патогена, его 1. продуктов иммунного ответа структурных элементов или его организма (выявление AT) генетического материала 2. функциональных изменений 2. морфологических органов (анатомических) изменений органа
АНАМНЕЗ Клин. осмотр Комплексная постановка диагноза Лабораторные исследования: Инструментальные - Клинический анализ крови исследования: - Клинический анализ мочи Рентген Биохимия крови, мочи УЗИ Копрограмма ЭКГ Серология, ИХА, ПЦР Гастроскопия Цитология, гистология прочие исследования
ИФА ПЦР ИХА
Иммуноферментный анализ Иммунологический метод качественного или количественного определения молекулярных соединений, в основе которого лежит специфическая реакция антиген-антитело.
Особенности постановки диагноза ИФА, ПЦР, ИХА Иммуноферментный анализ (ИФА) 2 -3 -х кратное Постановка диагноза увеличение титра антител при повторных исследованиях через 2 -3 недели.
Полимеразная цепная реакция • Метод прямого выявления возбудителя • Высокая чувствительность, основанная на экспоненциальном накоплении мишени НК • Высокая специфичность, основанная на выявлении уникальных для микроорганизма участков генетического материала • Применение технологии Real-time позволяет давать количественную характеристику возбудителю
Особенности постановки диагноза ИФА, ПЦР, ИХА Полимеразная цепная реакция (ПЦР) 1. Положительный результат возможен даже в случае ничтожно малых количеств возбудителя в организме или его фрагментов (ниже инфицирующей дозы, т. е. количества инф. агента, способного вызвать заболевание). возможная развитие инфекционной инфицированность болезни 2. Есть заболевания при которых выявление части вируса или бактерии сложно или не информативно (ИД, ВИП, коронавироз кошек, лептоспироз…) 3. Кроме того, выявление ДНК/РНК возбудителя не дает информации о его жизнеспособности.
Иммунная хроматография • основан на свойстве антител специфически связываться с антигеном • в результате реакции между антигеном и соответствующим ему антителом формируется иммунохимический комплекс Хромоген Детектор-реагент Биологический материал Y Иммунокомплекс Улавливающий реагент Мембрана
Особенности постановки диагноза ИФА, ПЦР, ИХА Иммунохроматографический анализ (ИХА) Выявление возбудителя в концентрациях, свидетельствующих о заболевании Выявление количеств Отслеживание динамики возбудителя ниже порога заболевания по титру чувствительности антител ПЦР ИФА
Иммуносупрессивные состояния кошек, вызванные "медленными" вирусными инфекциями Лейкемия кошек - (Fe. LV) Иммунодефицит кошек (FIV)
? Почему выявление животных, инфицированных возбудителями вирусной лейкемии кошек (Fe. LV) и иммунодефицита кошек (FIV), необходимо ветеринарным врачам
Fe. LV и FIV - контагиозные скрыто протекающие инфекции поэтому необходимо обследовать животных 1. Непосредственно перед • вязкой, • выставкой, • помещением в стационар или передержку, • переливанием крови (!) , • вывозом за границу (требование заводчиков). 2. При приобретении нового животного, если в доме уже есть кошки; карантин 28 дней. 3. При установлении диагноза «вялотекущий бактериальный процесс» (дерматит, гингивит и т. д. ). 4. При установлении прогноза при острых инфекционных и интоксикационных процессах (кровепаразиты, гепатит, ОПН …. ) Положительный результат НЕ всегда равносилен подписанию смертного приговора!
Fe. LV и FIV - скрыто протекающие контагиозные инфекции поэтому обязательно обследование животных 1. При выявлении нефрологических расстройств • один из ведущих факторов развития гломерулонефритов у кошек - вялотекущие вирусные инфекции (FIV, Fe. LV, FCo. V); • наличие скрытой инфекции – фактор непредсказуемого развития состояния животного, искажающий результаты терапии. 2. При планировании хирургического вмешательства • плохое заживление тканей; • иммунная провокация, в том числе медикаментозная. Положительный результат НЕ всегда равносилен подписанию смертного приговора!
План 1. Частота встречаемости 2. Инфекционные агенты 3. Патогенез 4. Клинические признаки 5. Диагностика / дифф. диагностика 6. Микст-инфекции 8. Лечение / прогноз 9. Профилактика
Частота встречаемости FIV Fe. LV 2, 5% США 2 -3% - домашние, до 10% - бездомные До 25% ВЕЛИКОБРИТАНИЯ До 18% ЯПОНИЯ 8 -9% 10 -12% В целом по миру инфицированность кошек в разных странах составляет от 2, 5% до 44%
Статистические результаты обследования кошек (2009 - 2010 г. г. ) Fe. LV или/и FIV Fe. LV + FIV 13, 7% 7, 6% FIV Fe. LV 45, 3% 47, 1% Выборка: 416 кошек Выборка: 53 кошки Доля инфицированных кошек Доля Fe. LV, FIV в группе и смешанной инфекции обследованных в группе инфицированных (Fe. LV – 6, 97%; FIV – 6, 7%) кошек
Анамнестические данные кошек, инфицированных Fe. LV и FIV Анамнестические данные Fe. LV-инфицированные FIV-инфицированные (n=29) (n=28) Квартирное 22 14 Содержание Бывают за 7 14 городом Возраст, лет 0, 5 -17 (6, 3) 2 -17 (9, 4) Самцы 25 Пол Самки 4 3 Продолжительность жизни 0 -16 0 -32 с момента постановки диагноза (мес. ) (8) (16) Распространенность не выявлено по породам (50% беспородных)
I • каждая 8 -я из обследованных кошек заражена FIV или Fe. LV • каждая 12 -я из инфицированных заражена сразу двумя вирусами – FIV + Fe. LV
Клинические проявления Fe. LV Миелопролиферативные и опухолевые процессы 38, 50% Увеличение лимфоузлов 30, 80% Бледность и/или иктеричность слизистых оболочек 35, 40% Воспаление кишечника 38, 50% Воспаления в ротовой полости 38, 50%
Клинические проявления FIV Асцит, плеврит, 4, 00% Опухолевые заболевания 50, 00% Конъюнктивит/ринит 37, 50% Увеличение лимфоузлов 50, 00% Поражения кожи 34, 6%
Гематологические изменения, характерные для кошек, инфицированных Fe. LV и FIV ЭРИТРОЦИТАРНЫЙ РОСТОК Макроцитарная нормо- и гиперхромная анемия Снижение Повышение Ускорение • гематокрита ретикулоцитов МСV, МСН, СОЭ • гемоглобина (< 1%) МСНС (20 -40 мм/ч) • эритроцитов Изменение гематокрита в крови кошек, инфицированных Fe. LV и FIV
Гематологические изменения, характерные для кошек, инфицированных Fe. LV и FIV Лейкоцитарный росток Характеризуется угнетением костномозгового кроветворения, торможением процессов пролиферации и дифференцировки клеточных элементов • дегенеративный • снижение эозинофилов лейкоцитарный сдвиг • базофилия • преобладание гиперсегментированных нейтрофилов • пикнотические ядра • токсическая зернистость лимфоцитов
Гематологические изменения, характерные для кошек, инфицированных Fe. LV и FIV Тромбоцитарный росток • снижение тромбоцитов ниже 250 тыс. и менее Изменение количества тромбоцитов в крови кошек, инфицированных Fe. LV и FIV
Изменения биохимических показателей, характерные для кошек, инфицированных Fe. LV и FIV Увеличение общего белка (на 20%) (за счет белков острой фазы и глобулинов) SAA (Serum amyloid A), Гамма-глобулинов (Ig. G) выполняющий в Фибриногена организме кошек роль C-реактивного белка Увеличение соотношения глобулин/альбумин более 1, 0 (норма 0, 6 -0, 8) На поздних стадиях заболевания - снижение
Изменения биохимических показателей, характерные для кошек, инфицированных Fe. LV и FIV • увеличение α-амилазы (в 2 -2, 5 раза) • увеличение АЛТ (в 2, 3 – 2, 4 раза) • увеличение щелочной фосфатазы (в 1, 5 -7 раз) • в 45% повышение креатинина в 1, 4 -1, 5 раза Изменение активности щелочной фосфатазы в крови кошек, инфицированных Fe. LV и FIV
! заболевания Fe. LV и FIV не имеют специфических клинических биохимических гематологических признаков
Данные комплексного обследований кошек (клиника «Центр» и ПЦР-лаборатория ВГНКИ) 95% случаев заболеваний Fe. LV и FIV сочетаются с другими инфекциями (!) M ixt-инфекции, имеющие на фоне иммуносупрессии острое течение, ярко выраженную клиническую картину, служат причиной обеспокоенности владельцев и обращения в ветеринарную клинику
Сочетанные (mixt) инфекции Паразитарные заболевания Бактериальные и грибковые инфекции (демодекоз, саркоптоз гемабартенеллез, токсоплазмоз) (микоплазмоз, хламидиоз) Вирусные инфекции (герпес-вирус, вирусный перитонит кошек, вирусные респираторные заболевания) Fe. LV + FIV Fe. LV, FIV + 5% Агенты 17% бактериальные и невыясненной 37% этиологии Fe. LV, FIV + 41% паразитарные Fe. LV, FIV + агенты Вирусные
Mixt – инфекции Fe. LV • Гемабартенеллез – 17, 7% • Вирусный перитонит кошек – 30, 9% (острая форма коронавироза) Массированная иммуносупрессия Острое течение вследствие подавления всех звеньев mixt инфекций кроветворения (лейкоцитарного, лимфоцитарного, тромбоцитарного, эритроцитарного) Меньшая продолжительность заболевания (жизни) До 16 (8) мес
Патогенез инфекции Fe. LV Per os Парентерально (слюна, истечения со - царапины, укусы; слизистых оболочек, хирургические инструменты) фекалии, моча) Эпителиальные клетки миндалин, слюнных желез, пейеровы бляшки (кишечник), Л/У Элиминация вируса репликация Выздоровление Костный мозг Латентная форма Активная форма репликация Стресс (? ) Нарушение гемопоэза Клинические проявления
ЛИМФОМА - самое распространенное злокачественное онкологическое заболевание кошек У кошек, инфицированных вирусом лейкемии, лимфома встречается в 60 -70 раз чаще, чем у неинфицированных mandibular mediastinal lymph node Возраст (лет) инфицированные неинфицированные кошки кошки
ЛИМФОМА - самое распространенное злокачественное онкологическое заболевание кошек Лимфома брыжеечного л/у Клиническое проявление зависит от локализации опухоли Костный мозг нейтропения, анемия Почки уремический синдром Лимфома селезенки Глаза увеит, вторичная глаукома Средостение плеврит Лимфома у кошек занимает 2 -е место по частоте индукции паралича тазовых конечностей Лимфома почки
Нарушение репродуктивной функции Нарушения воспроизводства при трансмиссивном инфицировании матери : • повторяющиеся аборты • рассасывание плодов • мертворождение • синдром угасающих котят
Mixt – инфекции FIV • Микоплазмоз, хламидиоз – 19, 3% • Коронавирозом – 30, 9% (в стадии носительства) Хроническое течение Нарушение иммунного ответа, mixt инфекций снижение кол-ва Т-лимфоциов, неспособность костного мозга справиться с потребностями организма Большая продолжительность заболевания (жизни) До 32 (16) мес
Патогенез инфекции FIV присоединение вируса Парентерально (ошибка распознавания) Т (слюна - царапины, укусы; -ЛИМФОЦИТЫ хирургические инструменты) репликация ЦНС Лимфоидная ткань (нейроны) (макрофаги, Т-лимфоциты…) Почки Латентная Активная форма форма репликация Стресс (? ) Клинические проявления Нарушение гемаформулы: скорость разрушения лимфоцитов выше FIV скорости воспроизводства
III в ветеринарной практике в 95% случаев Fe. LV и FIV выявляются в сочетании с другими инфекциями, кошки, инфицированные Fe. LV, имеют в 2 раза меньшую продолжительность жизни, чем инфицированные FIV
ЛЕЧЕНИЕ Рекомендации ABCD (Advisory Board on Cat Disease, Европейский консультативный совет по вопросам заболеваний кошек ) СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ТЕРАПИЯ 1. Иммуномодулятор Staphilococcus Protein A SPA - 10 мкг/кг, 2 раза в неделю, 10 недель. 2. Омега-интерферон - 100 тыс. ЕД /кг в день, 5 дней, три курса. 3. Азидодезокситимидин (АЗТ) - аналог нуклеозида - 5 -10 мг/кг, 2 р. в день, подкожно или per os. Рекомендация: сочетанием антиретровирусной терапии с иммунодепрессантами (циклоспорин А) удается более эффективно восстанавливать уровень Т-лимфоцитов по сравнению с монотерапией противовирусными препаратами.
ЛЕЧЕНИЕ По материалам Балтийского форума, 2010 Специфическое лечение: Зидовудин (АЗТ) 5, 0 мг/кг, 2 раза в сутки; - обязателен контроль гематологических показателей каждые 2 недели - ингибирует репликацию вируса, понижает содержание вируса в плазме; - обязателен контроль за гематологическими показателями. 2. AMD 3100* - избирательный антагонист рецепторов Т-хелперов CXCR 4; - молекула AMD 3100 служит для FIV основным ко-рецептором к Т- хелперам, поэтому, когда блокируется AMD 3100, вирус не может проникнуть внутрь клетки. - 0, 5 мг/кг, интервал 12 часов, п/к, пожизненно. 3. Интерферон (Feline Interferon Omega**) - имеет видовую специфичность; - можно использовать пожизненно; - по сравнению с терапией интерфероном человека, побочные эффекты не отмечены. * не лицензирован ** лицензирован в странах Европы и в Японии
ЛЕЧЕНИЕ Рекомендации ABCD (Advisory Board on Cat Disease, Европейский консультативный совет по вопросам заболеваний кошек ) НЕСПЕЦИФИЧЕСКАЯ ТЕРАПИЯ 1. Антибиотикотерапия (в частности, при сочетании ВЛК с бактериальными инфекциями и протозойными инвазиями хорошо работает Доксициклин). Комментарий: предпочтителен более длительный курс относительно традиционного. 2. Filgastrim (granulocyte colony-stimulation factor) и рекомбинантный человеческий цитоксин (r. Hu. G-CFR) используются у кошек со значительной нейтропенией. 3. Переливание крови при наличии анемии. При гематокрите < 20%, количестве тромбоцитов < 100 х106/л, лейкопении < 2, 0 х106/л. 4. Химиотерапия при лимфосаркоме (Винкристин, Циклофосфамид). Рекомендация: избегать лечения кортикостероидами (исключение – случаи сочетания ВЛК со злокачественными опухолями или иммуноопосредованными заболеваниями).
ЛЕЧЕНИЕ Частный случай: химиотерапия, прогноз при лимфоме • 79% животных достигают ремиссии. • В 25 -30% случаев животные достигают длительной ремиссии. • Средний период ремиссии – 5 месяцев. • Об эффективности свидетельствует только симптоматика. • Наиболее благоприятный прогноз имеют молодые животные с опухолями средостения.
ЛЕЧЕНИЕ «Последние новости» • Виферон, удобна форма ректальных свечей • Реаферон 150 мг/жив • L-lysine aescinat, 0, 22 мг/кг (1, 0 мл на 5 кг). Аминокислота, участвует в образовании гормонов, ферментов, АТ, подавляет репликацию вирусов, нормализует сосудисто-тканевую проницаемость, анти- эксудативный (противо-отечный) эффект, противовоспалительный • Пенцикловир, • Фамцикловир per os, Для лечения сопутствующих вирусных инфекций, вызванных иммуносупрессивным состоянием • Erythropoetin особенно эффективен у кошек с почечной недостаточностью (100 ЕД/кг, п/к, 48 ч. ). • Перфторан как правило, вызывает аллергические реакции у кошек с поражениями печени.
ЛЕЧЕНИЕ «Последние новости» Рекомендация: не применять препараты, супрессирующие функцию костного мозга: - гризеофульвин - левомицетин - триметоприм-сульфадиазин - НПВС - микотоксины - производные бензола - экзо- и эндогенные эстрогены
! Таким образом, терапевтический подход к кошкам с Fe. LV и FIV должен осуществляться с учетом: • клинических признаков, • стадии заболевания и • результатов лабораторных исследований
Клинический случай I VI 2000 год Возраст: все возрастные группы. Выездное сообщество кошек: Количество животных: 148. составлено из бездомных животных Пол: ♀, ♂. нескольких городов Содержание: вольерное, в группах. Причина обследования на Fe. LV: Участившаяся гибель кошек с симптомами: кахексия, иктеричность слизистых. Гингивит у 100% кошек. Метод исследования: ИФА Результаты первого исследования: у 40% кошек выявлен Fe. LV. Принятые меры: - кошки с Fe. LV изолированы от группы неинфицированных; - повторные обследования вся группа проходила в течении последующих 3, 5 лет, каждые 4 -6 месяцев. Лечение: не проводили.
Клинический случай I VI 2000 год Результаты наблюдений за кошками, инфицированных Fe. LV Количество животных: 59 Длительность наблюдений: 3, 5 года 2 группа 3 группа Клинически Первичное обследование: 1 группа положительный результат. здоровые животные Все повторные обследования: Летальный отрицательный результат исход с признаками ВИРУСОНОСИТЕЛИ САМОИЗЛЕЧИВШИЕСЯ гепатита Наблюдение: У некоторых кошек результат первого некоторые кошки ++++ обследования: ++++. выглядели лучше, Все кошки постоянно контактировали чем кошки ++. с больными животными группы 1 и вирусоносителями группы 2.
Клинический случай I VI 2000 год Заключение: А) Подтверждены сведения • о значительно более высокой инфицированности бродячих и скученно содержащихся кошек (40%, литерат. ) по сравнению с кошками одиночного содержания (10%, ориг. ); • о возможности переболевания кошек Fe. LV инфекцией, выработки активного иммунитета и элиминации вируса. Б) Развитие инфекции зависит от иммунного статуса животного.
Клинический случай II VII 2007 год Порода: сфинкс Возраст: 8 лет Кот (♂) Содержание: квартирное Контакты с кошками: постоянное проживание в группе Анамнез: неоднократно проведен курс лечения с диагнозом «рецидивирующее бактериальное поражение кожи» , в пяти клиниках, в течении 3 -х лет. Клиническая картина: бактериальный перерост( «сухой» дерматит). Исследования: ОКА крови WBC-19, 5; Ht-22, 6%; PLT-253 ретикулоциты -1% Б/Х без отклонений кокки ++++; малассезии ++; Цитология кожи макрофаги - единичные Vet. Expert Fe. LV Ag отрицательный Vet. Expert FIV Ab положительный Лечение: Зидовудин, 5 мг/кг; Цефалексин; Галавет; Себазол.
Клинический случай II VII 2007 год Заключение: С диагнозом «иммунодефицит» кот прожил около года. Не факт, что специфическое лечение было успешно, но … владельцы содержат 4 -х кошек, и уже в течении 3 -х лет обращаются за ветеринарной помощью только к нам … и кому не приятен статус грамотного доктора? … и кто не хочет привлечь постоянных клиентов?
Клинический случай IV VIII Порода: сибирская, Возраст: 3 года. Кошка (♀) Содержание: квартирное, с выгулом в летнее время Контакты с кошками: неконтролируемые, в пригороде Причина обращения в клинику: вакцинация. Анамнез: в течение последних 4 -х мес. ухудшение аппетита, снизился вес; без обеспокоенности владельцев. Клинический осмотр: увеличены региональные л/у, Б/Х и ОКА крови Без изменений, Исследования: Пункция л/у Гиперплазия лимфоидной ткани Отсутствие визуализации органов брюшной Рентген полости, признаков скопления жидкости нет FIV Ab, Fe. LV Ag, FCo. V Ab Результаты отрицательные Лечение: курс антибиотиков – Кобактан, Трихопол. Повторное обследование через месяц: клинический осмотр: улучшение состояния лимфоузлов; исследования: FIV Ab Результат слабо положительный
Клинический случай IV VIII Заключение: 1. Первичное обращение на стадии лимфоаденопатии - при общем клиническом здоровье кошки владельцы обычно увеличение лимфоузлов не замечают. 2. На начальных этапах заболевания антитела против FIV в крови еще отсутствуют или титр только начинает нарастать - в инкубационный период и на первой стадии патогенеза результаты исследований могут быть отрицательными, повторное исследование следует провести через 30 – 60 дней. 3. Появление слабоположительной реакции при повторном исследовании свидетельствует о начальном этапе прогрессирования поражения лимфоидной ткани вирусом иммунодефицита - третье исследование следует провести еще через 30 -60 дней.
Профилактика Меры по оздоровлению питомников 1. КОМПЛЕКСНОЕ обследование ВСЕХ животных 2. Выявление инфицированных животных 3. Изоляция инфицированных животных (исключение возможности ЛЮБЫХ контактов) 4. Профилактическое обследование ВСЕХ оставшихся в питомнике неинфицированных животных 2 -3 -х кратно с интервалом 2 месяца 5. Изоляция вновь выявленных животных с положительными результатами тестов 6. Приобретение новых животных только с отрицательными результатами исследований на Fe. LV и FIV
Рекомендации по вакцинации (Fe. LV) • Необходимо вакцинировать всех здоровых кошек с потенциальным риском заражения (доступ на улицу, эндемическая зона Fe. LV) • Всех кошек с неясным Fe. LV-статусом перед вакцинацией необходимо тестировать • Для Fe. LV-позитивных кошек необходима вакцинация против обычных патогенов неактивными вакцинами Схемы вакцинации • для кошек, не имеющих доступа к улице • для кошек, имеющих доступ к улице • для питомников и кошек, проживающих группами различны
Рекомендации по вакцинации (Fe. LV) • Вакцинация от Fe. LV в ходит в группу «рекомендуемых» • Котята: дважды – в возрасте 8 -9 недель и 12 недель с последующей повторной иммунизацией через год • С 3 -х летнего возраста повторная иммунизация: каждые 2 -3 года
Профилактика Вакцины против Fe. LV (лейкемии): • Лекат (France); • Эурифел (Merial, France); • Purevax (Merial, France); • Лейкоцел-2 + антиген FOCMA (Pfizer). Вакцины против FIV (иммунодефицита): • разработки Fel-O-Vax FIV (Fort Dodge) – 82% защиты от В и С подтипов FIV, но мало эффективна от FIV-А Противники вакцинации против лейкемии и бешенства в CША утверждают, что у 1 -3 из 10. 000 кошек развивается фибросаркома на месте введения вакцины.
Вакцино - ассоциированная саркома (VAS) • поствакцинальная фибросаркома развивается в месте инъекции • вероятность развития фибросаркомы составляет 1 на 10. 000 тыс. • вероятность развития фибросаркомы возрастает при введении вакцин содержащих адъювант (гидроксид алюминия) • рекомендации по введению вакцины в/м и п/к в область хвоста, ниже 3 -го хвостового позвонка
! Таким образом, терапевтический подход к кошкам с Fe. LV и FIV должен осуществляться с учетом: • клинических признаков, • стадии заболевания и • результатов лабораторных исследований
Распространенность инфекций FIV и Fe. LV Инфекции Fe. LV и FIV уже распространены на территории России Только общие усилия врачей и фелинологов смогут предотвратить распространение таких заболеваний как Fе. LV и FIV
Коронавироз кошек (FCo. V Ag) Вирусный перитонит кошек (FIP, FCo. V Ab) Диагностический подход
Варианты течения коронавирусной инфекции «Кишечная» форма коронавироза Контагиозность Патогенность «Генерализованная» форма коронавироза Патогенность Контагиозность
Патогенез инфекции FCo. V / FIP Per os (фекалии, слюна ) носоглотка тонкая кишка Кровь ЭПИТЕЛИЙ МАКРОФАГИ имму ический т ните репликация ециф Кровь Несп Неспецифический иммунитет Специфический Элиминация иммунитет Латентная вируса форма Инф екц р ит пер ионн Энте ито ы нит й Стресс (? ) Выздоровление / Носительство / Рецидивы Клинические проявления Асцит, перитонит / Диарея Системные нарушения
Особенности диагностики коронавирусной инфекции • Нет репликации вируса в кишечнике 50 -70% - выздоровление • Выявление вируса возможно только ПЦР • Вирус в кишечнике 20% - носительство реплицируется • Преобладание клеточного иммунитета над гуморальным • Выявление FCo. V Ag возможно ПЦР и ИХА 5 -10% - развитие FIP • Преобладание гуморального иммунитета над клеточным
Коронавироз на стадии поражения кишечника • Возможна умеренная диарея • Легкий энтерит ИСХОД • Элиминация вируса - выздоровление 50 -70% Перитонит не развивается - носительство 20% - ВИП 5 -10%
Коронавироз на стадии поражения кишечника ЛИТЕРАТУРНЫЕ ДАННЫЕ! • Возможна умеренная диарея • Легкий энтерит ИСХОД • Элиминация вируса - выздоровление 50 -70% Перитонит не развивается - носительство 20% - ВИП 10%
Собственные исследования кишечная форма коронавируса (FCo. V Ag) - ректальный мазок 2010 -2011 г. г. 2014 г. В/К «Центр» СВК «Свой Доктор» N = 712 N = 1091 Выявлен – Выявлен – 17, 6% кошек 80, 4% кошек
Собственные исследования кишечная форма коронавируса (FCo. V Ag) «Специфическая» симптоматика • Периодические диареи (раз в неделю/месяц) Клин. картина наблюдаемая у 90 • Фекалии с прожилками крови -95% • Периодическая рвота • Избирательность усвояемости корма • Склонность к аллергическим проявлениям • Повышенная восприимчивость к «Неспецифическая» вирусным/инвазионным заболеваниям симптоматика • Пациенты Ds: «панкреатит» , • Анемии «дисбактериоз» … • Коагулопатии (геморрагии, петехии и др. ) • Лейкопении (0, 1 -2, 2 тыс. ) Клин. картина • Иктеричность слизистых наблюдаемая у • Асцит, плеврит, лимфома 5 -10%
Собственные исследования Сочетанное носительство FCo. V Ag + Лямблии (Giardia) – 50% + Панлейкопения (FPV) – 12, 8% + Haemobartonella – анемии, титры ВИП до 1: 90 + Гельминты + Калицивирус • Усложняет диагностику • Ослабляет иммунитет • Усугубляет течение болезни • Повышает восприимчивость к инфекциям/инвазиям
Патогенетические факторы носительства FCo. V Ag • Нарушение перевариваемости и всасывания • Дисбактериоз, воспаление, как следствие - колит • Патологический рост условно-патогенной микрофлоры: кампилобактер, анаэробиоспирилла (АБС), клостридия • Сенсибилизация организма метаболитами и продуктами гибели паразитов Снижение: различных звеньев иммунного ответа, устойчивости к инфекциям/инвазиям Развитие инфекционного перитонита (FIP)
Перейдет ли коронавироз из стадии носительства (кишечная форма) в генерализованную стадию зависит от состояния гуморального и клеточного иммунитета животного Факторы, вызывающие дисфункции иммунной системы: Внешние 1. Стресс, 2. Оперативное вмешательство, 3. Вирусные и/или грибковые заболевания. Бирманская, мейн-кун, британская, персидская и др. Внутренние ВИП 1. Генетическая предрасположенность СД Поликистоз почек ГКМП Pesteanu-Somogyi LD, 2006; Спинально-мышечная атрофия Whincup PH, 2005 Дефицит пируваткиназы Атрофия сетчатки могут привести к массированному «лавинообразному» образованию комплексов АГ-АТ
Патогенез FIP
Патогенез инфекции FCo. V / FIP Per os (фекалии, слюна ) носоглотка тонкая кишка Кровь ЭПИТЕЛИЙ МАКРОФАГИ имму ический т ните репликация ециф Кровь Несп Неспецифический иммунитет Специфический Элиминация иммунитет Латентная вируса форма Инф екц р ит пер ионн Энте ито ы нит й Стресс (? ) Выздоровление / Носительство / Рецидивы Клинические проявления Асцит, перитонит / Диарея Системные нарушения
Иммунный ответ Образование комплексов АГ-АТ
Циркуляция и локализация иммунных комплексов
Механизм образования выпота Патологическая серозная жидкость (ВЫПОТНАЯ) образуется в результате непрерывно протекающих процессов транссудации плазмы крови из богатой кровеносными сосудами серозной оболочки и ее обратного всасывания (резорбции) в лимфатические капилляры ЛИМФА серозная полость мезотелий ПЛАЗМА
Особенности заболевания FIP! FIP 1. Образующиеся АТ не защищают кота; 2. АТ непосредственно играют роль в прогрессировании болезни; 3. FIP условно говоря не вирусное заболевание , FIP – иммуно-опосредованное заболевание индуцированное вирусом FCo. V!
Классическая форма ВИП Анамнез • вялость • анорексия Клиническая картина • иктеричность или бледность слизистых оболочек, • скопление жидкости в брюшной и/или грудной полости. Результаты лабораторных исследований • лейкоцитоз с признаками дегенеративных изменений нейтрофилов, • анемия разной степени выраженности, • снижение альбумина в сыворотке крови, • повышение альфа-амилазы в 1, 5 -3 и более раз.
Статистические результаты рентгенографического обследования кошек Выборка из клинически больных кошек с выявленными в крови антителами к FCo. V 42, 9% 18, 4% 38, 8% Отсутствуют признаки Присутствуют признаки Органы брюшной полости наличия выпотной гидроторакса дифференцированы слабо: жидкости в брюшной + ателектаз легких асцит или грудной полостях +уменьшение размеров сердца – скопление жидкости
КОМПЛЕКСНАЯ ДИАГНОСТИКА ВИП Специфическая клиническая картина Выявление вируса АТ (кровь, выпот) Глобулин Лимфопения/ плазмы ВИП нейтрофилез > 40 г/л Протеин в Альбумин выпотной Глобулин жидкости < 0, 4 > 35 г/л Нерегенеративная анемия Ds: по совокупности признаков!
ДОСТОВЕРНАЯ ДИАГНОСТИКА ВИП • Значимый рост титра антител в крови • Наличие вируса в выпотной жидкости Мало доступны при современном • Иммуногистохимия уровне развития лабораторий • Выявление вируса в клетках (макрофагах)
2010 -2011 г. г. Исследовано 436 кошек выявлены антитела против коронавируса у 96 (22%) 1 -я группа 2 -я группа 3 -я группа 31 кошка 54 кошки 11 кошек (32, 3%) (56, 25%) (11, 4%) специфические Неспецифические клинические признаки: клинические признаки Клинически • наличие выпота • вялость здоровые в брюшной / грудной • рвота / диарея животные полости • затруднение • гипертермия более 39, 50 мочеиспускания • иктеричность слизистых • гематурия • анорексия • астма • грибковые и бактериальные поражения кожи
2010 -2011 г. г. Специфическая клиническая картина 1 -я группа 31 кошка (32, 3%) Диагностика • Наличие антител # • Соотношение альбумин = 0, 7 [0, 31 -1, 03 ] глобулин Летальность 33, 3% • Глобулины = 50, 1 [38, 0 -83, 1] • Гемоглобин = 98, 7 [58 -141] • Гематокрит = 28, 2 [14, 2 -37, 1] • Выраженность лимфопении – 13, 5 [1 -31] 61% случаев – животные до года (1, 5 – 14 мес. ) 39% - старые животные (7 -15 лет), испытавшие стресс (переезд, оперативное вмешательство, наркоз)
2010 -2011 г. г. Классическая форма ВИП Полное отсутствие визуализации органов брюшной полости – асцит; скопление жидкости в перикарде.
2010 -2011 г. г. Неспецифическая клиническая картина 2 -я группа 54 кошки (56, 25%) Диагностика • Наличие антител # • Соотношение альбумин = 0, 95 [0, 5 -1, 43 ] глобулин Летальность 6, 3% • Глобулины = 41, 8 [26, 9 -60, 8] • Гемоглобин = 115, 8 [55 -151] • Гематокрит = 33, 1 [16, 4 -42, 9] • Выраженность лимфопении – 18, 9 [7 -36] Около 50% животных в настоящее время не имеют выпотов У 45% - не выявляются АТ (ИХА) АГ ? ? ?
Отсутствие признаков наличия выпотной жидкости в брюшной или грудной полостях Незначительная гепатомегалия, несколько увеличенные почки, сниженная дифференциация в области кишечных петель.
2010 -2011 г. г. КЛИНИЧЕСКИЕ ЗДОРОВЫ 3 -я группа 11 кошек (11, 4%) Диагностика • Наличие антител # • Соотношение альбумин = 1, 53 [0, 97 -2. 3] глобулин Живы • Глобулины = 35, 2 [22, 7 -63, 8] • Гемоглобин = 142, 5 [98 -177] • Гематокрит = 39, 2 [28, 0 -47, 9] • Выраженность лимфопении – 42 [34 -55] Однократное выявление титра антител, превышающего 1/50. В 70 -80% случаев дают более низкий титр при наблюдении в динамике.
Так, что же может служить основанием для постановки окончательного диагноза ВИП?
Алгоритм обследования методом ИХА клинически больных кошек с подозрением на ВИП Специфическая клиническая картина -- асцит, -- гидроторакс Тест FCo. V Ab • кровь, выпот + - ВИП Тест FCo. V Ag • фекалии + - интервал 1… 3 мес. Тест FCo. V Ab • кровь, выпот + - ВИП Другие заболевания Тесты FIV Ab / Fe. LV Ag • кровь
Алгоритм обследования методом ИХА клинически больных кошек с подозрением на ВИП Неспецифическая клиническая картина Тест FCo. V Ab • кровь - + Тест FCo. V Ag интервал 1… 3 мес. • фекалии 3 - + 1 Тест FCo. V Ab • кровь интервал 1… 3 мес. 2 Тест FCo. V Ab • кровь - + Другие ВИП заболевания Тесты FIV Ab / Fe. LV Ag • Диагноз • кровь • Прогноз • Терапия • Мониторинг
Алгоритм обследования методом ИХА клинически больных кошек с подозрением на ВИП Специфическая клиническая картина Неспецифическая клиническая картина -- асцит, -- гидроторакс Тест FCo. V Ab 1 Тест FCo. V Ab • кровь, выпот • кровь + - 2 4 - + ВИП Тест FCo. V Ag интервал 1… 3 мес. • фекалии 3 + - + 1 Тест FCo. V Ab • кровь интервал 1… 3 мес. интервал 1… 3 мес. Тест FCo. V Ab 2 Тест FCo. V Ab • кровь, выпот • кровь + - + ВИП Другие ВИП заболевания ИССЛЕДОВАНИЯ Тесты FIV Ab / Fe. LV Ag • Диагноз НА СОПУТСТВУЮЩИЕ ИНФЕКЦИИ • кровь • Прогноз • Терапия + - • Мониторинг FIV Ab / Fe. LV Ag - Другие сочетанные заболевания 1). Тест FCo. V Ab: выявление антител против коронавируса. 2). Тест FCo. V Ag: выявление антигена коронавируса. 3). Необходимо получить не менее двух одинаковых последовательных результатов (отрицательных или положительных) для подтверждения или опровержения предварительного диагноза. Отрицательный результат, последовавший за положительным при повторном тестировании, может быть связан с тем, что произошла естественная элиминация вируса, и выработка антител прекратилась (животное выздоровело). 4). Выявление антигена необходимо, поскольку на определенных этапах патогенетического процесса все антитела могут находиться в составе иммунохимических комплексов антиген-антитело, свободные антитела в крови отсутствуют.
Таким образом, мы считаем, что Диагноз FIP в условиях проведения исследований в ветеринарной клинике может быть поставлен • при обнаружении АГ и/или АТ в выпотной жидкости (однократное выявление); • при отсутствии выпотной жидкости – при условии наличия и/или роста титра антител в крови, при 2 -3 -х кратных исследованиях, повторяемых через 1 -2 мес.
Собственные исследования кишечная форма коронавируса (FCo. V Ag) - ректальный мазок 2010 -2011 г. г. 2014 г. В/К «Центр» СВК «Свой Доктор» N = 712 N = 1091 Выявлен – Выявлен – 17, 6% кошек 80, 4% кошек
Собственные исследования антитела против коронавируса (FCo. V Ab) - сыворотка крови 2010 -2011 г. г. 2014 г. СВК В/К «Центр» «Свой Доктор» N = 436 кошек N = 352 Выявлены – Выявлены– 22% кошек 27, 1% кошек
Собственные исследования Материал для ИФА/ИХА и ПЦР исследований Материал Титр антител жив. № 1 жив. № 2 • Сыворотка 1: 270 • Плазма 1: 810 1: 270 • Выпоты (асцит, плеврит) 1: 270 1: 90 Количественный результат Качественный результат 1: 30 – АТ отсутствуют 1: 90 – АТ присутствуют в 1: 270 - низких титрах 1: 810 – высокий титр АТ
Вакцинация и ее особенности • Живая, интраназальная • Вирус адаптирован к 34 -35 о. С • Не зарегистрирована и не рекомендована в большинстве стран Европы • Вакцинация не искажает рез-ты исследований выявления FCo. V Ag • Перед вакцинацией необходимо исключить вирусоносительство!
Клинический случай IVа Порода: б/п Возраст: 2, 5 года Содержание: квартирное, с выгулом в летнее время Кошка (♀) Контакты с кошками: неконтролируемые, в пригороде Вакцинирована по возрасту Причина обращения в клинику: признаки асцита. Анамнез: анорексия, вялость; за 3 месяца до обращения в клинику родила 5 котят, роды без осложнений. Исследования: скопление жидкости в брюшной Рентген полости FCo. V Ab Результат положительный Исход: летальный
Клинический случай IVb Количество: 5 (однопометники) Порода: б/п Возраст: 3 месяца Котята (♀, ♂) Содержание: квартирное Контакты с кошками: с матерью Причина обследования: гибель матери. Анамнез: в течение всех трех месяцев жизни клинически здоровы. Клинический осмотр: клинически здоровы. Исследования: Результаты положительный отрицательный FCo. V Ag (фекалии) 2 3 FCo. V Ab (кровь) 0 5
КРЫМ.ppt
- Количество слайдов: 99