Основы медицинской микологии и протозоологии Т. А. Канашкова

Основы медицинской микологии и протозоологии Т. А. Канашкова

ГРИБЫ ДОМЕН – EUKARYA, ЦАРСТВО – FUNGI (МYCETES, МYCOTA) многоклеточные или одноклеточные нефотосинтезирующие (бесхлорофилльные) эукариотические микроорганизмы с клеточной стенкой. Широко распространены в природе, особенно в почве.

Общая характеристика грибов Грибы имеют ядро с ядерной оболочкой, цитоплазму с органеллами, цитоплазматическую мембрану и многослойную, ригидную клеточную стенку, состоящую из нескольких типов полисахаридов (маннанов, глюканов, целлюлозы, хитина), а также белка, липидов и др. Некоторые грибы образуют капсулу. Цитоплазматическая мембрана содержит гликопротеины, фосфолипиды и эргостеролы (в отличие от холестерина — главного стерола тканей млекопитающих). Грибы являются грамположительными микробами, вегетативные клетки - некислотоустойчивые. Различают гифальные и дрожжевые формы грибов.

Гифальные (плесневые) грибы • Образуют ветвящиеся тонкие нити (гифы), сплетающиеся в грибницу, или мицелий (плесень). Толщина гиф колеблется от 2 до 100 мкм. Гифы, врастающие в питательный субстрат, называются вегетативными гифами (отвечают за питание гриба), а растущие над поверхностью субстрата - воздушными или репродуктивными гифами (отвечают за бесполое размножение). • Гифы низших грибов не имеют перегородок. Они представлены многоядерными клетками и называются ценоцитными (от греч. koenos - единый, общий). • Гифы высших грибов разделены перегородками или септами с отверстиями.

• • Дрожжевые грибы (дрожжи) В основном, имеют вид отдельных овальных клеток (одноклеточные грибы). По типу полового размножения распределены среди высших грибов - аскомицет и базидиомицет. При бесполом размножении дрожжи образуют почки или делятся, что приводит к одноклеточному росту. Могут образовывать псевдогифы и ложный мицелий (псевдомицелий) в виде цепочек удлиненных клеток – «сарделек» . Грибы, аналогичные дрожжам, но не имеющие полового способа размножения, называют дрожжеподобными. Они размножаются только бесполым способом - почкованием или делением. В медицинской литературе понятие «дрожжеподобные грибы» часто идентифицируют с понятием «дрожжи» .

Диморфизм грибов. • • Многие грибы характеризуются диморфизмом - способностью к гифальному (мицелиальному) или дрожжеподобному росту, в зависимости от условий культивирования. Например, в инфицированном организме они растут в виде дрожжеподобных клеток (дрожжевая фаза), а на питательных средах образуют гифы и мицелий. Такая реакция связана с температурным фактором: при комнатной температуре образуется мицелий, а при 37 ОС (при температуре тела человека) - дрожжеподобные клетки.

Размножение грибов происходит половым и бесполым (вегетативным) способами Половое размножение: • образованием гамет • половых спор • других половых форм Половые формы называются телеоморфами

Бесполое (вегетативное) размножение • почкование • фрагментация гиф • бесполое спорообразование с образованием соответствующих форм, называемых • • анаморфами Эндогенные споры (спорангиоспоры) созревают внутри округлой структуры - спорангия. Экзогенные споры (конидии) формируются на кончиках плодоносящих гиф, так называемых конидиеносцах.

Основные типы конидий. • • • Артроконидии (артроспоры), или таллоконидии образуются путем равномерного септирования и расчленения гиф; Бластоконидии образуются в результате почкования. Одноклеточные небольшие конидии называются микроконидиями. Многоклеточные, большие конидии называются макроконидиями. К бесполым формам грибов относят также хламидоконидии, или хламидоспоры (толстостенные крупные покоящиеся клетки или комплекс мелких клеток) и склероции (твердая масса клеток с оболочкой) - покоящиеся органы грибов, способствующие их выживанию в неблагоприятных условиях.

Ботаническая классификация грибов (6 основных классов) 1. Хитридиомицеты – наиболее примитивные. Тело состоит из комочка протоплазмы без оболочки, мицелия не образуют. Живут в воде и почве, паразитируют на высших растениях. Патогенных для человека видов нет. 2. Оомицеты – водные и земные формы. Хорошо развитый одноклеточный несептированный мицелий. Паразитируют на высших растениях, патогенных для человека видов нет. 3. Зигомицеты – есть патогенные для человека 4. Аскомицеты – есть патогенные для человека 5. Базидиомицеты – есть патогенные для человека 6. Дейтеромицеты – есть патогенные для человека

3. Зигомицеты • Относятся к низшим грибам (фикомицетам) с несептированными гифами. • Роды: Mucor, Rhizopus, Absidia, Rhizomucor, Basidiobolus, Conidiobolus. • Широко распространены в почве, воздухе, пище, на гниющих растениях, плодах. Споры грибов проникают в организм аэрогенным механизмом или при контакте с травмированными тканями желудочно -кишечного тракта (алиментарным путем) и кожи (контактным путем). • Вызывают зигомикоз (фикомикоз) у иммунодефицитных лиц (инвазивный легочный зигомикоз, поражение желудочно-кишечного тракта, кожи, мозга и других органов).

Зигомицеты, морфология Грибы рода Mucor Грибы рода Rhizopus

4. Аскомицеты • Аскомицеты (сумчатые грибы) имеют септированный мицелий. Свое название они получили от основного органа плодоношения - сумки, или аска, содержащего 4 или 8 гаплоидных половых спор (аскоспор). • К аскомицетам относятся отдельные представители (телеоморфы) родов Aspergillus, Penicillium и др. Большинство являются анаморфами, то есть размножаются только бесполым путем.

У грибов рода Aspergillus (леечная плесень) на концах плодоносящих гиф, конидиеносцах, имеются утолщения - стеригмы, фиалиды на которых образуются цепочки бесполых спор (конидии). Некоторые виды аспергилл могут вызывать аспергиллезы и афлатоксикозы.

У грибов рода Penicillium (кистевик) плодоносящая гифа напоминает кисточку, т. к. из нее (на конидиеносце) образуются утолщения, разветвляющиеся на более мелкие структуры - стеригмы, фиалиды на которых находятся цепочки конидий. Пенициллы могут вызывать заболевания - пенициллиозы.

Представителями аскомицетов являются также дрожжи - одноклеточные грибы, утратившие способность к образованию истинного мицелия. Дрожжи имеют овальную форму клеток с диаметром 3 - 15 мкм. Они размножаются почкованием, бинарным делением на две равные клетки или половым путем с образованием аскоспор. Заболевания, вызываемые некоторыми видами дрожжей, получили название дрожжевых микозов. К аскомицетам относится и возбудитель эрготизма (спорынья Claviceps purpurea), паразитирующий на злаках. Многие виды аскомицетов являются продуцентами антибиотиков, используются в биотехнологии.

Аскомицеты, морфология Грибы рода Aspergillus Грибы рода Penicillium

5. Базидиомицеты • (шляпочные грибы) имеют септированный мицелий. Они образуют базидиоспоры путем отшнуровывания от базидия - концевой клетки мицелия, гомологичной аску. • К базидиомицетам относятся некоторые дрожжи, например, телеоморфы Cryptococcus neoformans.

6. Дейтеромицеты • (несовершенные грибы, Fungi imperfecti) являются условным, формальным классом грибов, который объединяет грибы, не имеющие полового размножения. • Они образуют септированный мицелий, размножаются только бесполым путем в результате формирования конидий. • Большинство грибов, вызывающих заболевания у человека (микозы), относится к дейтеромицетам.

Дейтеромицеты, морфология Грибы Candida albicans

КЛИНИЧЕСКАЯ КЛАССИФИКАЦИЯ ГРИБОВ üВозбудители поверхностных микозов (кератомикозов) üВозбудители эпидермофитий (дерматомикозов) üВозбудители подкожных или субкутанных микозов üВозбудители системных или глубоких микозов üВозбудители оппортунистических микозов üВозбудители микотоксикозов üНеклассифицированные грибы

Возбудители поверхностных микозов (кератомикозов) • Возбудителями являются кератомицеты – малоконтагиозные грибы, поражающие поверхностные отделы рогового слоя эпидермиса и поверхность волоса. • Malassezia furfur - Пестрый лишай, отрубевидный лишай – в роговом слое эпидермиса короткие, изогнутые гифы и дрожжеподобные клетки. • Exophiala werneckii - Черный лишай – в роговом слое эпидермиса темные септированные гифы и почкующиеся клетки. • Piedraia hortae - Черная пьедра – на волосе черные узелки, содержащие аски. • Trichosporon beigelii - Белая пьедра (трихоспороз) – желтые узелки вокруг волос, содержащие фрагменты мицелия и артроконидии.

Микробиологическая диагностика кератомикозов • Микроскопическим методом выявляют возбудителей в клиническом материале после обработки щелочью. • Препараты красят метиленовым синим и др. • Культивирование проводят на средах Сабуро, глюкозо-пептон-дрожжевом агаре и др. Рост отмечается через неделю.

Malassezia furfur (Pityrosporum orbiculare (ovale) – возбудитель пестрого (отрубевидного, разноцветного) лишая Культуру получают на среде с плацентарной кровью, кокосовым, оливковым маслом. Культура дрожжевидная, желтоватозеленая или коричневатая.

Пятна располагаются вокруг устьев волосяных фолликулов с преимуществе нной локализацией на коже шеи, груди, верхней части спины и живота.

Пятна имеют наклонность к периферическому росту и при слиянии образуют крупные очаги, обычно более интенсивно окрашенные.

Диагностическое значение имеет проба Бальцера: смазывание очагов 5 % раствором йода, что приводит к более интенсивному окрашиванию за счет разрыхления рогового слоя эпидермиса.

Exophiala werneckii – возбудитель черного лишая

Piedraia hortae – возбудитель черной пьедры

Trichosporon beigelii – возбудитель белой пьедры (трихоспороза)

Возбудитель белой пьедры довольно быстро растет, образуя колонии серовато-желтого или коричневого цвета. Trichosporon beigelii Возбудитель черной пьедры образует аски, колонии имеют зеленовато-черный или черный цвет. Piedraia hortai

На волосах образуются мелкие твердые узелки ( до 20 – 30 и более ), почти полностью охватывающие волос. Иногда они сливаются, образуя муфту, состоящую из крепко склеенного мицелия и спор гриба.

При черной пьедре узелки имеют буроватый или коричневый цвет, иногда имеют красноватый или сероватый оттенок. При белой пьедре узелки более светлые, сероватожелтоватые или молочно-матовые.

Возбудители эпидермофитий (эпидермомикозов, дерматомикозов) • Дерматофиты или дерматомицеты поражают кожу, ногти и волосы, вызывая трихофитию, микроспорию, фавус, эпидермофитию и др. • Около 40 видов дерматофитов вызывают болезни у человека. Обитают на ороговевших субстратах (кератинофильные грибы). Согласно способам споруляции относятся к З родам: Trichophyton, Microsporum, Epidermophyton. • Являются патогенными, высококонтагиозными грибами. • Путь передачи - контактный.

З группы дерматомицетов: • антропофильные - передающиеся от человека к человеку; • зоофильные - передающиеся от животного человеку; • геофильные - обитающие в почве и передающиеся при контакте с ней.

Морфология и физиология дерматофитов • Образуют септированный мицелий с артроконидиями, хламидоспорами, макро- и микроконидиями. • Макроконидии различны: у рода Trichophyton - крупные, гладкие, септированные; у рода Microsporum - толстостенные, многоклеточные, веретенообразные и покрыты шипами; у рода Epidermophyton имеется множество гладких дубинкообразных макроконидий. • Грибы размножаются бесполым путем (анаморфы). Некоторые из них могут размножаться половым путем (телеоморфы), образуя аски. • Растут на среде Сабуро и др. Колонии (в зависимости от вида) разноцветные, мучнистые, зернистые, пушистые.

Микробиологический диагноз дерматофитов • Применяют микроскопический. микологический (культуральный), аллергический, серологический и биологической методы диагностики. • Микроскопируют соскобы с пораженной кожи, чешуйки, ногтевые пластинки, волосы, обработанные в течение 10 -15 мин 10 -15% раствором КОН. Препараты окрашивают метиленовым синим, гематоксилин-зозином. Можно применять РИФ с помощью флюоресцирующих антител. • При микроскопии выявляют нити мицелия, артроконидии, макро- и микроконидии, бластоспоры. • При микологическом методе делают посев на питательные среды - сусло-агар, Сабуро и др. Рост грибов изучается через 1 -З недели культивирования при 25 градусах С. • В серологическом методе диагностики определяют антитела в сыворотке крови с помощью РСК, РПГА, РП, РИФ, ИФА. • При аллергологической диагностике ставят кожноаллергические пробы с аллергенами из грибов. • Биопробу ставят на лабораторных животных (морские свинки, мыши и др. ), заражая их в кожу, волосы и когти.

Epidermophyton Floccosum – возбудитель эпидермофитии

Возбудитель образует характерные колонии плоской или куполообразной формы, имеющие углубления в центре. Цвет молодых колоний лимонно-желтый или с зеленоватым оттенком, а более зрелых – серый. Epidermophyton floccosum

Trichophyton interdigitale Колонии с высоким белым пушком, в старых культурах – мелкопорошковатые; обратная сторона коричневая.

Trichophyton interdigitale Немного овальных, грушевидных, палочковидных микроконидий. Макроконидии многокамерные, тупые, нередко отсутствуют.

Выделяют интертригинозную форму, когда в III, IY межпальцевых складках стоп появляется краснота, шелушение, мацерация с четкими границами. В глубине складок образуются трещины, которые превращаются в эрозии

онихомикоз У 1/3 больных поражаются ногти стоп. Обычная локализация - I и V ногтевые пластинки. Ногти кистей эти грибы не поражают. Со свободного или бокового края ногтя появляются желтые пятна. Со временем развивается подногтевой гиперкератоз, пластинка становится ломкой, крошится. Поражение захватывает всю ногтевую пластинку до заднего валика. Ногтевая пластинка теряет блеск и может отслаиваться от ногтевого ложа. Диагноз ставится на основании клинических проявлений и подтверждается обнаружением септированного мицелия в соскобах с очагов поражения и выделением культуры гриба.

Trichophyton rubrum Колонии в первые дни роста могут быть кожистыми, фиолетового цвета, потом покрываются белым пушком. Через 8 -14 дней на обратной стороне колоний появляется пигмент красного цвета, который диффундирует в толщу ткани.

Микроскопия культуры: Септированные нити мицелия; овальные, грушевидные, палочковидные микроконидии (3 – 8 мкм). Иногда многокамерные (5 – 8 камер) макроконидии (до 30 мкм).

Микоз стоп. В межпальцевых складках появляется гиперемия, отрубевидное шелушение. Постепенно процесс распространяется на кожу сводов и боковую поверхность стоп. Кожа подошв становится застойногиперемированной. Отмечается сухость и умеренный гиперкератоз, муковидное шелушение в кожных бороздах.

Микоз кистей. Чаще поражается правая ладонь. Кожа застойногиперемирована, с отрубевидным шелушением, белесоватыми кожными бороздами, но может быть шелушение в виде колец с фестончатыми очертаниями. Часто процесс с ладони переходит на тыл кисти в виде эритемато-сквамозных очагов с периферическим валиком, состоящим из узелков, пузырьков, корочек. Такое поражение сочетается с поражением ногтей.

Онихомикоз. Поражаются все ногти кистей и стоп. Поражение начинается в виде беловатых, беловато-желтых продольных полос на боковой поверхности ногтевой пластины. Выделяют 3 типа поражения ногтя: 1. нормотрофический – изменение цвета ногтя или разрыхление со свободного края. 2. гипертрофический – ногти неровные, желто-серого цвета, крошаться. 3. атрофический – ноготь истончается, разрушается и отслаивается от ногтевого ложа.

Microsporum audounii – возбудитель микроспории

Микроспория • Антропофильные возбудители: – Microsporum audounii – Microsporum ferrugineum. • Зоофильные возбудители: – Microsporum canis – Microsporum gypseum – Microsporum nanum – Microsporum equinum. Класс: Fungi imperfecti

Морфология культуры: Колонии белые или серобелые, пушистые со звездчатым краем и пуговчатым возвышением в центре. Microsporum equinum

Microsporum nanum Microsporum gypseum Microsporum canis

Микроскопия культуры: Microsporum gypseum

Microsporum canis

Microsporum nanum Microsporum audounii

Микроспория антропонозная. Поражение располагается в пограничной зоне роста волос в виде мелких очагов без четко очерченных границ. Поверхность их гиперемирована, с умеренным шелушением. Волосы обломаны на разном уровне, пеньки окружены белой муфтой из спор гриба.

Микроспория зооантропонозная. На волосистой части головы появляются 1 -2 крупных овальных очага с гиперемией и муковидным шелушением. Все волосы обломаны на одном уровне. Волос окружен белой муфтой из спор. На гладкой коже имеются воспалительные пятна с валикообразным краем. Валик состоит из везикул и чешуек. В центре очага – отрубевидное шелушение.

Trichophyton tonsurans – возбудитель трихофитии

Морфология культуры: Колонии гладкие с возвышением в центре (acuminatum), кратерообразные (crateriforme), морщинистые (cerebri), с порошковатой поверхностью белого, кремового цвета. Trichophyton tonsurans

Микроскопия культуры: Тонкие нити мицелия, овальные, Грушевидные и палочковидные микроконидии. Trichophyton tonsurans

При поражении волосистой част головы или област подбородка, верхней губы и шек грибы вначале внедряются в кожу, а затем распространяются на волосы. Очаги эритемато-сквамозные неправильной округлой формы со слабо выраженными воспалительными явлениями. Волосы в очаге обламываются на разном уровне, чаще 1 -3 мм. Пеньки обломанных волос имеют вид запятых. Часть волос не обламывается и очаг скрыт под волосами. В центре поражений отмечается мелкопластинчатое шелушение.

Поражается гладкая кожа, волосистая часть головы, область усов и бороды. Очаг приподнимается над поверхностью кожи и имеет бугристую форму. Далее покрывается рыхлыми гнойными корками. При снятии корок отмечается выделение гноя из устьев волосяных фолликулов.

Trichophyton schoenleinii – возбудитель фавуса (парши)

Фавус (favus) Синоним: парша (tinea favosa). Род: Trichophyton Возбудители: -Trichophyton schonleinii -Trichophyton quinckeanum -Trichophyton gallinae

Морфология культуры: Колонии куполообразные, сморчковидные, сильно морщинистые, с древовидно врастающим в среду краем. Поверхность сухая, восковидная или порошковатая, цвет сероватожелтоватый. Trichophyton schonleinii Колонии куполообразные, пушистые; старые колонии порошковатые. Цвет белый, позднее желтый, коричневый. Trichophyton quinckeanum Колонии звездчатые, бархатистые, иногда пушистые, складчатые. Цвет белый, черный, розовый, в старых культурах красный. Обратная сторона кроваво-красная. Trichophyton gallinae

Микроскопия культуры: Мицелий широкий, сильно ветвистый, в виде рогов оленя, канделябра. В порошковатых культурах – редкие овальные микроконидии. Trichophyton schonleinii Тонкий септированный мицелий, микроконидии круглые, овальные; макроконидии – вытянутые, с 5 – 7 камерами. Trichophyton quinckeanum

Фавус (парша) На волосистой части головы различают скутулярную, сквамозную и импетигинозную формы. Скутулы – корки охряножелтого цвета с вдавлением в центре. Волосы серые, запыленные, не обламываются. На месте скутул, бляшек остаются атрофические рубцы или сплошная рубцовая атрофия. При сквамозной форме на волосистой части головы имеется обильное шелушение, очень напоминающее сухую себорею. При импетигинозной форме в очагах преобладают гнойные корки.

При фавозном заболевании гладкой кожи поражается кожа лица, верхней части туловища, верхних конечностей. Появляются резко очерченные шелушащиеся пятна. Иногда по периферии этих пятен виден воспалительный валик, состоящий из мелких папул, пустул, пузырьков. Но может быть и скутулярная форма фавуса гладкой кожи, когда появляются скутулы охряно -желтого цвета. Sporotrichum schenckii.

Фавозный онихомикоз начинается с появления коричневого или грязносерого пятнышка, которое захватывает весь ноготь. Деструктивные изменения выражены мало.

Формы онихомикоза Рис. 1. Дистальный онихомикоз. Рис. 3. Микотическая лейконихия. Рис. 2. Проксимальный онихомикоз Рис. 4. Тотальный онихомикоз.

Возбудители подкожных или субкутанных микозов • Распространены в почве, древесине или на отмирающих, гниющих растениях. • Внедряясь в местах микротравмы кожи, они вовлекают в процесс глубокие слои дермы, подкожные ткани, мышцы и фасции. • К подкожным микозам относятся споротрихиоз, хромобластомикоз, феогифомикоз и эумикотическая мицетома.

Sporothrix schenckii – возбудитель споротрихоза

Возбудители системных, или глубоких микозов • Распространены в почве, на разлагающихся органических субстратах, и иногда в фекалиях птиц. • Путь передачи аэрогенный. • У инфицированных лиц обычно симптомы заболевания отсутствуют; у некоторых больных развиваются поражения легких и системные поражения различных органов и тканей с тяжелыми формами болезни. • Большинство возбудителей - диморфные грибы: в тканях образуют дрожжевую форму; в окружающей среде, на питательных средах при 20 -250 С растут в мицелиальной форме, а при 37 о С - в дрожжевой форме.

Возбудители системных или глубоких микозов Название грибов Болезни Histoplasma capsulatum Гистоплазмоз Blastomyces dermatitidis Бластомикоз Paracoccidioides brasiliensis Паракокцидиоидомикоз Coccidioides immitis Кокцидиоидомикоз Cryptococcus neoformans Криптококкоз

Histoplasma capsulatum – возбудитель гистоплазмоза

Blastomyces dermatitidis – возбудитель бластомикоза

Coccidioides immitis – возбудитель кокцидиоидоза (кокцидиоидомикоз )

Бластомикоз Гилкриста ( blastomycosis Gilchrist) Синоним: североамериканский бластомикоз. Возбудитель: Blastomyces dermatitidis Gilchrist Класс: Fungi imperfecti Сем: Moniliaceae Род: Blastomyces

Blastomyces dermatitidis На кровяном агаре при температуре 37° – морщинистые восковидные колонии. На среде Сабуро при комнатной температуре – белые пушистые колонии, со временем становятся коричневыми.

В дрожжевой фазе почкующиеся дрожжевые клетки, сходные с таковыми в патологическом материале. В клетчатой фазе – короткие нити мицелия и овальные или круглые микроконидии (2 -3 мкм).

Гистоплазмоз (Histoplasmosis) Синоним: болезнь Дарлинга ретикулоэндотелиальный цитомикоз Возбудитель: Histoplasma capsulatum Класс: Ascomycetes Семейство: Gymnoascaceae Род: Histoplasma На среде Сабуро при комнатной температуре – белые пушистые колонии, со временем становятся коричневыми. На кровяном агаре при температуре 37° – колонии пленчатые, морщинистые, вначале бежевые, потом коричневые.

На среде Сабуро – тонкий мицелий, круглые, грушевидные микроконидии (2, 5 – 3 мкм) и характерные макроконидии: шаровидные (7 – 15 мкм) с шиповатой поверхностью. На кровяном агаре – мелкие, почкующиеся клетки.

Возбудители оппортунистических микозов • Условно-патогенные грибы родов Аspergillus, Mucor, Penicillium, Fusarium, Candida и др. • Вызывают заболевания на фоне ослабленного иммунитета, у лиц с трансплантатами, при нерациональной длительной антибиотикотерапии, гормонотерапии, использовании инвазивных методов исследования. • Грибы находятся в почве, воде, воздухе, на гниющих растениях; некоторые входят в состав факультативной микрофлоры человека (напр. , грибы рода Саndida).

Кандидоз (Сandidosis) Синоним: кандидамикоз (Candidamycosis) Возбудители: грибы рода Candida Класс: Fungi imperfecti Семейство: Cryptococcaceae Виды: Candida albicans Candida tropicalis Candida krusei Candida parapsilosis

Кандиды (род Саndida) • Они имеют овальную форму, диаметр 2 – 5 мкм, делятся почкованием, образуют псевдогифы (псевдомицелий) в виде цепочек из удлиненных клеток, иногда образуют гифы. Для Candida albicans характерно наличие бластоспор (почек) - почкующихся клеток и образование хламидоспор. • Род содержит около 200 видов. Объединяет ряд несовершенных дрожжеподобных и совершенных дрожжевых грибов. Ведущее значение в развитии кандидоза имеют С. albicans и С. tropicalis. • Обитают в почве, на растениях, являются частью нормальной микрофлоры млекопитающих и человека.

Кандиды (род Саndida) • Вызывают кандидоз слизистых оболочек, кожи, ногтей и внутренних органов. • Могут вторгаться в ткань (эндогенная инфекция) и вызывать кандидоз у пациентов с ослабленной иммунной защитой. • Реже возбудитель передается детям при рождении, при кормлении грудью • При передаче половым путем возможно развитие урогенитального кандидоза.

Микробиологическая диагностика кандидоза • Микроскопический метод: в мазках из клинического материала выявляют псевдомицелий (клетки соединены перетяжками), мицелий с перегородками и почкующиеся бластоспоры. • Культуральный метод: посевы клинического материала проводят на агар Сабуро, сусло-агар и др. Колонии беловато-кремовые выпуклые, круглые. Выросшие грибы дифференцируют по морфологическим, биохимическим и физиологическим свойствам. • Кандидозная уроинфекция устанавливается при обнаружении более 105 колоний Сandida spp. в 1 мл мочи. • Можно также проводить ПЦР, серологическую диагностику (реакция агглютинации, РСК, РП, ИФА) и ставить кожно-аллергическую пробу с кандида-аллергеном.

Грибы рода Candida – овальные почкующиеся дрожжевые клетки, псевдогифы и септированные гифы

Морфология культуры: Колонии сметанообразные, гладкие или морщинистые, белые, кремовые, со временем коричневые, врастающие в среду. Candida albicans

Candida tropicalis Candida parapsilosis Candida krusei

C. albicans T. glabarata C. tropicalis C. parapsilosis

Микроскопия культуры: Истинный или ложный почкующийся мицелий, круглые, овальные почкующиеся клетки (0, 5 – 5*8 – 10 мкм), у C. albilicans – хламидоспоры Candida albicans

Candida albicans (хламидоспоры)

Candida parapsilosis Candida albicans

Candida krusei Candida tropicalis

Candida parapsilosis

Candida parapsilosis Candida albicans

Кандидоз слизистых оболочек Cлизистая приобретает темнокрасную окраску, на которой появляются беловатые, точечные налеты, сливаясь образуют пленки белого, сероватого, реже желтоватого цвета, различной величины и формы. Кандидозный стоматит

В углах рта появляются эрозии малинового цвета с четкими границами, покрытые белым легко снимающимся налетом. Кандидоз углов рта

Кандидозный глоссит Язык темнокрасного цвета, увеличен в размере, испещрен бороздками, по линии смыкания зубов на боковой поверхности - отпечатки зубов. На спинке языка - белые налеты.

Губы, особенно нижняя, значительно утолщены, отечны, гиперемированы, сухие, с наслоением чешуек и серозных корочек, имеются множественные поперечные глубокие трещины Кандидоз красной каймы губ

Кандидоз кожи Характерны высыпания мельчайших пузырьков на слегка гиперемированном основании, очень поверхностных, без наклонности к слиянию, а также красных папулы величиной с просяное зерно. Кандидоз гладкой кожи

Первичными элементами являются мелкие плоские, поверхностные пузырьки, пустулы; отмечается поверхностное шелушение на фоне гиперемии, небольшой отечности и мацерации кожи Кандидоз ладоней

Пневмоцисты (Pneumocystis carinii) • Условно-патогенные грибы с внеклеточным циклом развития. • Вызывает пневмоцистоз (син. — пневмоцистная пневмония), характеризующийся развитием пневмонии у лиц с ослабленным иммунитетом (недоношенность, иммунодефицит, ВИЧинфекция). • Возбудитель передается от человека к человеку главным образом воздушно-капельным путем. Некоторые виды пневмоцист выделяются от животных (мышей, крыс, кроликов, собак, коров. свиней, голубей). • Цикл развития пневмоцист включает образование трофозоитов, предцист, цист и внутрицистных телец. Трофозоиты - клетки, покрытые пелликулой, имеют овальную или амебоидную форму, размер 1, 5 -5 мкм. Они с помощью выростов пелликулы прикрепляются к эпителию альвеол (внеклеточный паразит). Трофозоит округляется, приобретает клеточную стенку, превращаясь в предцисту и в цисту. Циста - размером 4 -8 мкм, имеет толстую, трехслойную, стенку. Внутри цисты образуется 6 -8 дочерних внутрицистных тел (спорозоитов). которые имеют 1 -2 мкм в диаметре, мелкое ядро и окружены двухслойной оболочкой. После выхода из цисты они превращаются во внеклеточные трофозоиты.

Микробиологическая диагностика пневмоцистоза • Микроскопия мазка из мокроты, биоптата, легочной ткани, окрашенного по Романовскому. Гимзе: цитоплазма паразита - голубого цвета, а ядро - красно-фиолетового. • Для диагностики применяют также РИФ, ИФА. Обнаруженне Ig. М-антител или нарастание уровня Ig. G-антител в парных сыворотках свидетельствует об острой инфекции. • Ставят ПЦР.

Пневмоцисты в легких (окрашивание по Романовскому-Гимзе)

Диагностика микозов 1. Микроскопия 2. Микологические исследования 3. Серологический метод 4. Кожная проба

Микроскопия - в нативном состоянии (висячая, раздавленная капли) - окраска по Граму - обработка 10% едким КОН - окраска по Романовскому-Гимзе - окраска по Гомори - окраска по Гридли - окраска по Хочкинс-Манусу - прямая иммунофлюоресценция

Микологические исследования - агар Сабуро - SABHI – агар - дрожжевой агар - сусло – агар - селективные среды ( с пенициллином, стрептомицином, левометицином )

Простейшие (Protozoa) • Одноклеточные животные организмы • Имеют ядро и клеточные органеллы, выполняющие функции, свойственные отдельным тканям и органам высокоразвитых организмов • Для человека бывают: – Патогенные (вызывают протозойные болезни – инвазии) – Комменсалы – обитают в полости рта и просвете кишечника)

Общие морфологические черты • Клетка окружена трехслойной мембраной • Под мембраной – тонкая оболочка, состоящая из фибрилл, вместе с мембраной образующая пелликулу • Ядро заключено в двухслойную мембрану, нередко содержит одно или несколько ядрышек или вместо них – эндосому. У большинства паразитических простейших – 6 или меньше хромосом.

Общие морфологические черты • Цитоплазма – 2 части: – Эктоплазма – коллоидный гель – Эндоплазма – коллоидный золь • Органеллы: – Рибосомы – у всех – Эндоплазматический ретикулум – почти у всех – Митохондрии – у многих – Сократительные вакуоли – у некоторых

Питание простейших • Простая диффузия • Активный транспорт • Фагоцитоз (основной способ) и пиноцитоз (захват макромолекул) – через временные инвагинации мембраны или через постоянное образование (цитостом) • Энергия заключена в АТФ, основной путь её получения – анаэробный гликолиз; у имеющих митохондрии – окислительное фосфорилирование (цикл Кребса) • Переваривание – в эндоплазме или в пищеварительной вакуоли (у некоторых)

Размножение простейших • Бесполое: – бинарное деление – множественное деление (шизогония и спорогония) • Половое (копуляция) – у споровиков и инфузорий

Классификация простейших Домен Eukarya Царство Animalia Подцарство Protozoa Типы 1. Sarcomastigophora Подтипы Mastigophora Sarcodina 2. Apicomplexa 3. Ciliophora 4. Microspora. Всего 7 типов.

Mastigophora (жгутиконосцы) - передвигаются с помощью жгутиков или ундулирующей мембраны Sarcodina - псевдоподиями Apicomplexa - имеют апикальный комплекс для проникновения в клетку Ciliophora (ресничные или инфузории) - поверхность клетки покрыта рядами ресничек, которые обеспечивают их спиральное движение вперед

Места обитания Полостные паразиты: • В полости рта: – Entamoeba gingivalis – Trichomonas tenax • В тонком кишечнике: – Lamblia untestinalis • В толстом кишечнике: 4 вида жгутиковых, 6 видов амеб и 1 вид ресничных. Патогенные: – Entamoeba histolytica – Balantidium coli

Места обитания Тканевые паразиты: • Передающиеся без переносчиков: – Изоспоры – Криптоспоридии – Токсоплазмы – Саркоцисты • Передающиеся переносчиками – Малярийный плазмодий – Трипаносомы – Лейшмании – Бабезии

Для полостных характерно • Колонизация полостей тела • Прямые простые жизненные циклы без смены хозяина • Могут сохраняться как антропонозы, только Balantidium coli вызывает развитие зоонозов (у свиней) • Не имеют митохондрий и обитают в анаэробных условиях • Обнаруживаются в фекалиях в виде трофозоитов или цист.

Пути заражения • Фекально-оральный: амебиаз, балантидиаз, лямблиоз, криптоспоридиоз, токсоплазмоз • Контактный (трихомоноз – половой контакт) • Трансплацентраный: токсоплазмоз • Трансмиссивный: малярия, лейшманиоз, трипаносомоз

Атигенная структура • Эндогенные антигены – поверхностные и антигены внутренних структур • Экзогенные антигены – вещества, выделяющиеся в процессе нормального роста и развития паразита • Стадийные антигены • Антигены мимикрии – похожие на структуру Аг хозяина

Естественный иммунитет • Не имеют значения барьерные свойства кожи и слизистых • Не имеет значения лизоцим и нормальная микрофлора • Большое значение имеет первичная ареактивность органов и тканей • Небольшое значение имеет комплемент и фагоцитоз

Приобретенный иммунитет Гуморальный – наиболее эффективен против паразитов, размножающихся в крови. Пути элиминации: – Комплемент-зависимый лизис – Опсонизация и усиление фагоцитоза – Подавление инвазии путем агглютинации тканевых паразитов (когда они накапливаются в крови) – Иммобилизация жгутиковых – s. Ig. A – повреждение паразитов в кишечнике

Приобретенный иммунитет Клеточный – для тканевых паразитов • Т-киллерный: – непосредственно на паразит – на клетки с измененными Аг (при внутриклеточной локализации паразита) • Т-эффекторный – формирование инфекционной гранулемы

Персистенция простейших Длительная при ослаблении иммунных механизмов хозяина: • Внутриклеточная локализация • Локализация в полостных органах • Антигенная изменчивость • Локализация внутри цисты • Подавление иммунного ответа • Иммунопатологическое повреждение тканей: – Нефротический синдром (ИК) – Перекрестные антигены – Иммуносупрессия повышает чувствительность к бактериальным и вирусным инфекциям

Малярия • Протозойная болезнь, которая передается человеку при укусе комаров рода Anopheles, сопровождается: – Лихорадкой – Ознобами – Анемией – Спленомегалией – Нарушениями кровообращения. • Характеризуется хроническим рецидивирующим течением.

Возбудители малярии простейшие рода Plasmodium Тип Apicomplexa Класс Sporozoae Отряд Eucoccidiida P. vivax - возбудитель 3 -дневной малярии P. malariae - 4 -дневной P. falciparum - тропической P. ovale - малярии овале (типа 3 -дневной)

Цикл развития – сложный, протекает со сменой 2 хозяев: • Промежуточный хозяин – человек. В его организме – шизогония: – Тканевая (в гепатоцитах) – Эритроцитарная • Основной хозяин – самка комара. В его организме – спорогония. • У P. vivax спорогония начинается при температуре окружающей среды не ниже 15 ОС. У других видов – не ниже 18 ОС.

Патогенез малярии • Инкубационный период – в зависимости от вида возбудителя от 8 до 25 суток, соответствует длительности тканевой шизогонии. • Эритроцитарная шизогония – 2 суток (при 4 -дневной – 3 суток) • Проявления болезни развиваются при разрушении эритроцитов периферической крови.

Патогенез малярии • Лихорадка – следствие выделения из Эр эндогенного пирогена, а также ИЛ-1 и ФНО-α - из Мф при фагоцитозе Эр • Анемия – следствие массивного лизиса Эр • Нарушение кровообращения: – – – – Повышение температуры Расширение сосудов Снижение АД Спазм сосудов Повышение вязкости крови Закупорка капилляров остатками Эр Ишемия органов

Осложнения • Аллергические реакции (гломерулонефрит) • Нередко отек мозга • Выраженный геморрагический синдром • Прогрессирующая гемолитическая анемия. При отсутствии лечения тропической малярии – прогноз тяжелый

Иммунитет • Восприимчивость у неболевших – всеобщая • Приобретенный иммунитет – слабый, строго специфичен: – Вырабатываются Ig M, G, A – Повышается активность Фц как самого паразита, так и эритроцитов. Наибольшее значение имеют Мф селезенки, печени, костного мозга. – Без лечения может развиться нестерильный иммунитет (равновесие). – При отсутствии повторного заражения иммунитет угасает.

Популяции людей, невосприимчивые к малярии • Новорожденные (материнский иммунитет 2 -3 месяца) • С недостаточностью изоантигена Даффи (невосприимчивы к P. vivax) • С серповидноклеточной анемией • С аномальным S-Hb (невосприимчивы к P. falciparum) • С дефицитом фермента глюкозо-6 фосфат дегидрогеназы

Препараты для химиотерапии I группа – гистошизотропные (на тканевые формы): – Примахин – Хлорохин Применяются при 3 -дневной малярии. II группа – гематошизотропные (на эритроцитарные формы): – Хинин – Амлдиахим – Хлорохин – Хлоридин Применяются при всех формах малярии.

III группа – гамотропные (на половые формы): – Хлоридин – Хиноцид – Примахин Применяются при тропической малярии, т. к. возбудитель долго сохраняется в крови в виде гаметоцит.

Возбудитель токсоплазмоза – Toxoplasma gondii Тип Apicomplexa Класс Sporozoae Отряд Eucoccidiida

Жизненный цикл • Половой (гаметогония) – в организме кошачьих • Бесполый (шизогония, спорогения) – у основных и промежуточных хозяев. В организме любого теплокровного токсоплазмы могут достигать стадии тканевых псевдоцист, в которых бесполым путем обрадуются цистозоиты (мерозоиты)

Пути заражения • Первичной заражение кошачьих – при поедании мяса промежуточных хозяев. • Из организма кошачьих выделяются ооцисты с испражнениями. • Заражение промежуточных хозяев, в т. ч. человека – при заглатывании ооцист.

Патогенез токсоплазмоза • Из ооцист выходят спорозоиты, • Активно поглощаются Мф, фагоцитоз не завершен, спорозоиты диссеминируют по лимфотоку • В Мф первый этап шизогонии. Мф погибают, паразиты (тахизоиты) инвазируют клетки хозяина (любые ядросодержащие)

Патогенез токсоплазмоза • В острой стадии инфекции в клетках образуются псевдоцисты в виде скоплений токсоплазм. • При их разрушении – инвазирование соседних клеток и повторение цикла. • Паразитемия – только в острой стадии. • При хронических процессах образуются истинные цисты с плотной оболочкой, содержащие более 100 паразитов (брадизоитов). Сохраняются 10 -летия.

Патогенез токсоплазмоза • Проникновение токсоплазм в регионарные лимфоузлы приводит к развитию воспалительногранулематозного процесса • Гематогенное диссеминирование в различные органы. • Воспалительные и дегенеративные изменения в тканях – следствие непосредственного действия паразита, его метаболитов и сенсибилизации организма. • При внутриутробном инфицировании плода – различные поражения в зависимости от сроков беременности и массивности инвазии

Проявления • Большинство случаев протекает бессимптомно • Инкубационный период – 3 -14 суток • У лиц без сопутствующей патологии может развиться: – умеренная лимфаденопатия (обычно шейных л/у) – Фарингит, лихорадка, сыпь, – гепатоспленомегалия и атипичный лимфоцитоз

Проявления • У лиц с ИД (в т. ч. СПИДом) – тяжелое течение, преимущественно летальный исход: – Активация латентной инфекции – Энцефалит (90% всех летальных исходов) – Эндокардит – Пневмония

Врожденный токсоплазмоз • Гибель плода или • Симптомы врожденного токсоплазмоза: – Интоксикация – Лихорадка – Желтушность кожных покровов – Поражения печени, селезенки, л/у и ЦНС. • Нарушения более выражены при заражении с 1 триместре беременности.

Криптоспоридиоз - кишечная инвазия, вызываемая простейшими рода Cryptosporidium: C. muris, C. parvum Тип Apicomplexa Класс Sporozoae Отряд Eucoccidiida

Цикл развития • Ооцисты, содержащие сферические спорозоиты, поступают с пищей и водой • В клетках эпителия тонкого кишечника: – спорозоиты трансформируются в мерозоиты Мерозоиты инфицируют другие клетки – Некоторые мерозоиты образуют половые клетки, которые сливаются с образованием ооцист • Ооцисты образуются двух типов: – толстостенные, выделяются в окружающую среду (инфекционные частицы) – тонкостенные, разрушающиеся в кишечнике и высвобождающие новые порции спорозоитов (аутоинфекционные частицы)

Эпидемиология • Заболевание – зооноз (кошки, собаки, свиньи, крупный рогатый скот и др. ) • Распространено на всех континентах, чаще в странах с жарким климатом и низкой санитарной культурой • Механизмы передачи: – фекально-оральный (чаще от человека к человеку) – контакты с животными – возможно, аэрогенный

Проявления • У человека место обитания – проксимальный отдел тонкой кишки, но может поражаться весь кишечник, желчные протоки, респираторный тракт • Основной синдром – диарея, нарушение водносолевого обмена • У людей с нормальной иммунной системой – острая кишечная инвазия (гастроэнтерит, длится 1 -2 недели, выздоровление) • У людей с ИД (СПИД) – тяжелая диарея с хроническим течением, иногда летальный исход

Амебиаз • Инфекционное поражение толстой кишки, вызываемое дизентерийной амебой. • У большинства инвазированных – бессимптомное носительство. • В ряде случаев – поражения кишечника (от хронических, легких форм до тяжелых случаев дизентерии) и внекишечные осложнения.

Возбудитель амебиаза – Entamoeba histolytica Тип Подтип Класс Отряд Sarcomastigophora Sarcodina Zoomastigophora Amoebida

Морфология • Паразит крупных размеров (до 60 мкм) • Ядро пузырькового типа • Структура ядра другая, чем у сапрофитных амеб кишечника: зерна хроматина расположены равномерно по краю ядра, ядрышко – в центре. • Цитоплазма разделена на 2 слоя: – Эктоплазма – Эндоплазма • ЦПМ покрыта мукополисахаридной оболочкой • Движение – с помощью псевдоподий

Питание • • Простая диффузия Активный транспорт Фагоцитоз В лабораторных условиях культивируется в бесклеточных питательных средах с добавлением бактерий

Жизненный цикл • Размножение – бинарное деление • 2 формы существования: – Вегетативная (4 формы): • Тканевая (патогенная, амебовидный трофозоит) • Большая вегетативная (форма magna) • Просветная (малая, форма minuta) – основная форма существования при всех формах заболевания • Предцистная – Циста – образуется в нижних отделах кишечника. Встречается у носителей.

Жизненный цикл • Возбудитель попадает в ЖКТ с водой или пищей, загрязненной фекалиями в форме цисты • В желудке и 12 -перстной кишке – эксцистирование • Деление 4 ядер, образование 8 малых просветных форм • По мере продвижения к нижним отделам кишечника – образование цисты.

Факторы, способствующие развитию острой дизентерии I. Со стороны возбудителя: • • Вирулентность Количество II. Со стороны организма: • Состояние слизистой кишечника (хр. колиты) ИДС (чаще у детей до 1 года) Дисбактериоз: • • - • При нерациональной а/б-терапии У новорожденных Характер питания человека

Патогенез амебиаза • Инкубационный период – от 3 -4 дней до нескольких месяцев • Проникновение в ткани за счет протеолитических ферментов • Некроз тканей, образование язвы • Если язва поверхностная, возможно выздоровление • В более тяжелых случаях – язва колбовидная, возможна перфорация стенки кишечника

Кишечные осложнения • Амебома (опухолевидная гранулематозная масса) с развитием кишечной непроходимости • Амебный аппендицит • При перфорации - перитонит • Переход в хроническую форму

Внекишечные формы амебиаза: • • • Амебный гепатит Поддиафрагмальный абсцесс Гнойный плеврит Перитонит Тампонада сердца

Клинические проявления • При кишечной форме – бессимптомное течение • При острой форме – диарея, понос, схваткообразные боли внизу живота, стул полуоформленный, может быть слизь, кровь, иногда «малиновое желе» (много крови)

Эпидемиология • Заболевание - антропоноз • Основной – больные бессимптомными и хроническими формами • Заражение – фекально-оральный механизм: с водой и пищей, загрязненной цистами • Чаще летом, но регистрируется в течение года постоянно. • Профилактика: – Уровень санитарной культуры – Активное выявление и лечение больных

Лямблиоз (гиардиаз)Паразитарная инвазия, протекающая в виде латентного паразитоносительства и манифестных форм, преимущественно в виде нарушений функций кишечника. Распространена повсеместно, особенно в регионах с низкой санитарной культурой

Возбудитель лямблиоза Giardia lamblia (Lamblia intestinalis) Тип Подтип Класс Отряд Sarcomastigophora Mastigophora Zoomastigophora Diplomonadida

Общая характеристика • Трофозоиты грушевидной формы • 2 ядра (в сочетании с парабазальным телом «лицо с гримасничающим ртом» ) • 4 пары жгутиков, расположенные сверху, снизу, сзади и на боковых поверхностях • В верхне-переднем отделе – присасывательный диск, окруженный фибриллами • Питание – путем диффузии • Размножение – продольное деление

Жизненный цикл • Трофозоиты обитают в верхних отделах тонкой кишки • В желчных протоках быстро погибают под действием желчи • В нижних отделах кишечника образуются цисты, выделяемые с испражнениями

Патогенез лямблиоза: • Резервуар и источник инвазии – человек обезьяны и свиньи • Основной механизм заражения – фекально -оральный • Вероятность развития поражений зависит от вирулентности возбудителя, инфицирующей дозы, образования HCl в желудке и иммунного статуса индивидуума

Патогенез лямблиоза: • Инфицирующая доза – около 10 цист • В организме человека лямблии размножаются в огромных количествах (до 1 млн. паразитов на 1 см 2 слизистой), нарушая пристеночное пищеварение и двигательную активность тонкой кишки • Нарушение всасывания жиров, углеводов, витаминов С и В 12

Проявления • Синдром мальабсорбции (нарушение всасывания): • Диарея, метеоризм, боли в животе (иногда в правом подреберье) • Усталость, отёки, апатия • Снижение массы тела, пониженный аппетит, бледность • Склонность к кровотечениям, парестезиям и мышечным подергиваниям.

Трихомоноз (трихомониаз) - Венерическое заболевание, проявляющееся комплексным воспалительным поражением различных участков мочеполовой системы. Относится к группе широко распространенных инвазий. Заболеваемость в РБ на 100 000: 2005 г. – 166, 35; 2006 г. - 149, 64

Возбудитель трихомоноза Trichomonas vaginalis Тип Подтип Класс Отряд Sarcomastigophora Mastigophora Zoomastigophora Trichomonadida

Общая характеристика • Грушевидное тело 14 -30 мкм • Вытянутое ядро, смещенное в передний конец • Вакуолизированная цитоплазма • На переднем конце 4 жгутика и ундулирующая мембрана (до середины тела) • Сквозь все тело проходит аксостиль, выступающий на заднем конце в виде шипика • Культивируется на питательных средах в анаэробных условиях, клеточных культурах и куриных эмбрионах

Патогенез и проявления • На слизистой оболочке мочеполового тракта – серозно-гнойное воспаление • Клинически характерны зуд, жжение, боли при половых контактах • В 75 % серозно-гнойные выделения • У женщин – клиника острого или подострого вагинита • У мужчин – уретрит, простатит, иногда эпидидимит. При хронизации процесса – в 100 % случаев хронический простатит