Основные группы микроорганизмов Типы микроскопов Методы микроскопии Тема

Основные группы микроорганизмов. Типы микроскопов. Методы микроскопии Тема 1

Предмет и задачи медицинской микробиологии № 1

Микробиология – раздел биологии, изучающий закономерности жизни и развития микроорганизмов в их единстве с окружающей средой. В истории микробиологии выделяют: I период – «микрографический» - описательный. 1590 г. – братья Ганс и Захарий Янсены впервые сконструировали прибор, позволяющий получать увеличение предметов в 32 раза. 1878 г. –Ч. Седийо – предложил все невидимые глазом живые существа называть «микробами» . Термин «микробиология» ввел П. Дюкло, Л. Пастер использовал термин «микробия» .

Медицинская микробиология включает: Ø Бактериологию – науку о бактериях; Ø Вирусологию - науку о вирусах; Ø Иммунологию – науку о механизмах защиты организма от патогенных и непатогенных агентах; Ø Микологию – науку о грибах; Ø Протозоологию – науку об одноклеточных патогенных микроорганизмах; Ø Паразитологию – науку о гельминтах

Оснащение и режим работы бактериологической лаборатории № 2

Разновидности микробиологических лабораторий Бактериологическая (по степени опасности) Вирусологическая (по степени опасности) Микологическая Иммунологическая

Материал для обработки в лаборатории выделения из организма человека: объекты внешней среды: моча, кал, мокрота, гной, а также кровь, спинномозговая жидкость и трупный материал; вода, воздух, почва, продукты питания, лекарственные препараты, смывы с предметов инвентаря, рук и т. п.

ГРУППЫ ПАТОГЕННОСТИ ( по классификации ВОЗ –обратный порядок) I группа – возбудители особо опасных инфекций (Y pestis) II группа - возбудители высококонтагиозных эпидемических заболеваний человека (B. anthracis, Brucella spp. , F. tularensis, V. cholera O 1(O 139) и др. ) III группа – возбудители инфекционных болезней, выделяемых в самостоятельные нозологические группы (B. pertussis, C. botulinum, C. diphteriae, N. meningitidis, N. gonorrhoeeae, S. typhi и др. ) IV группа – условно-патогенные микроорганизмы (Campylobacter spp. , Staprylococcus spp. и др. )

Правила работы: В помещения бактериологической лаборатории нельзя входить без специальной одежды — халата и белой шапочки или косынки. Запрещается выходить за пределы лаборатории в халатах или надевать верхнее платье на халат.

Правила работы: В помещении бактериологической лаборатории категорически запрещается : • курить, • принимать пищу, • хранить продукты питания.

Правила работы: • Весь материал, поступающий в рассматриваться как инфицированный. лабораторию, должен • При распаковке присланного материала необходимо соблюдать осторожность: банки, содержащие материал для исследования, при получении обтирают снаружи дезинфицирующим раствором и ставят не прямо на стол, а на подносы или в кюветы.

Основные приборы и оборудование микробиологических лабораторий. Микроскопы Ламинарный бокс Термостат Холодильник Автоклав Сухожаровой шкаф Центрифуги р. Н метр Спектрофотометр Водяная баня Весы и т. д. Газово-жидкостной хроматограф ИФА-анализатор Оборудование для ПЦР Анализатор бактериологический СО 2 -инкубатор Автоматическая средоварка

План бактериологической лаборатории Грязная зона Помещение для приема анализов Лаборантские для работы с материалом Лаборантские с диагностическим оборудованием Чистая зона Термостатируемые комнаты Холодильники Обработка результатов анализов

Назначение некоторых комнат микробиологической лаборатории: средоварочная комната; моечная комната; автоклавная комната : автоклавы и сушильные шкафы; термостатная комната. бокс-комната, бокс оборудуется предбоксником;

АВТОМАТИЧЕСКАЯ СИСТЕМА ДЛЯ ПОДГОТОВКИ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД

Стерилизация с помощью автоклава

Культивирование культур микроорганизмов в термостатах

Системы для культивирования анаэробов

ИФА анализатор

ПЦР диагностика Exicycler™ 96 Real-Time PCR

Типы микроскопов и методы микроскопии № 3

Микроскопический метод – исследование микроорганизмов с помощью специального прибора – микроскопа (micros – малый, scopein- рассматривать, наблюдать). Позволяет исследовать объекты от 0, 2 мкм (световая микроскопия) и более мелкие (электронная микроскопия) объекты. В медицинской микробиологии кроме того используют фазово-контрастная, темнопольная, люминисцентная и др. виды микроскопии.

А. Левенгук (1632 – 1723 г. г. ) Одним из первых изучал и описывал микроскопические организмы «маленькие зверушки» . Освоил шлифовку стекол, создал прообраз микроскопа (увеличение в 300 раз) через который рассматривал различные предметы и субстанции. 1674 г. –описал эритроциты человека, лягушек и рыб. 1675 г. – описал простейших, 1677 г. - сперматозоиды, кроме того описал строение глаз насекомых и мышечных волокон – всего более 200 видов растений и животных. Свои наблюдения оформлял в виде писем в Лондонское королевское общество действительным членом которого его избрали в конце его жизни.

Микроскоп МБР-1: 1 — башмак; 2 — макрометрический винт; 3 — коробка с микромеханизмом; 4 — тубусодержатель; 5 — головка тубусодержателя; 6 — монокулярный тубус; 7 — окуляр; 8 — винт для крепления тубуса; 9 — винт для фиксации револьвера; 10 — револьвер; 11 — объективы; 12 — предметный столик; 13 — конденсор; 14 — стопорный винт конденсора; 15 - рукоятка ирисовой диафрагмы; 16 - винт для перемещения конденсора; 17 — зеркало; 18 — микрометрический винт; 19 — стопорный винт верхней части столика; 20 — центрировочный винт для установки препарата

Схема микроскопа и осветительной системы Формула разрешающей способности где R - предел разрешения; λ - длина волны; NA - числовая апертура

Преломление среды

Принцип различных типов микроскопии

Световая микроскопия ( «раздавленная капля» )

Иммерсионная микроскопия

Темнопольная микроскопия

Фазово-контрастная микроскопия

КП при фазовоконтрастной микроскопии

Интерференция

Люминесцентный микроскоп

Свободная флюоресценция

Флюоресценция

РИФ

ЭЛЕКТРОННАЯ МИКРОСКОПИЯ , совокупность электроннозондовых методов исследования микроструктуры твердых тел, их локального состава и микрополей (электрических, магнитных и др. ) с помощью электронных микроскопов (ЭМ) - приборов, в к-рых для получения увелич. изображений используют электронный пучок. Э. м. включает также методики подготовки изучаемых объектов, обработки и анализа результирующей информации. Различают два гл. направления Э. м. : трансмиссионную (просвечивающую) и растровую (сканирующую), основанных на использовании соответствующих типов ЭМ. Они дают качественно разл. информацию об объекте исследования и часто применяются совместно. Известны также отражательная, эмиссионная, лоренцова и иные виды Э. м. , реализуемые, как правило, с помощью приставок к трансмиссионным и растровым ЭМ.

Электронный микроскоп

Установка для напыления Auto 306 R & D с вакуумной камерой из борсиликатного стекла.

Ультрамикротом (ультратом) - прибор для получения ультратонких (0, 01 -0, 1 мкм) срезов объектов с помощью стеклянных или алмазных ножей.

Ультрамикротом 1905 -1915 гг 1995 г

Просвечивающая и сканирующая ЭМ

Клетка кишечной палочки под электронным микроскопом (темная область – клеточная ДНК)

Плазмиды, визуализированные с помощью электронного микроскопа.

Бактерии гнездятся между вкусовыми сосочками языка. Начало кариеса.

Капиллярная сеть и эритоциты, находящиеся внутри кровеносных сосудов.

Принципы классификации микроорганизмов № 4

ОСНОВА КЛАССИФИКАЦИИ строение РНК (Dr. Carl Woese, 70 -е годы XX века) ДНК (The Institute for Genomic Research) 2001 – 2009 гг.

Систематика - распределение микроорганизмов в соответствии с их происхождением и биологическим сходством. Систематика занимается всесторонним описанием видов организмов, выяснением степени родственных отношений между ними и объединением их в различные по уровню родства классификационные единицы- таксоны. Основные вопросы, решаемые при систематике : Ø классификация, Ø идентификация Ø номенклатура микроорганизмов.

Классификация - распределение (объединение) организмов в соответствии с их общими свойствами (сходными генотипическими и фенотипическими признаками) по различным таксонам. Таксономия - наука о методах и принципах распределения (классификации) организмов в соответствии с их иерархией. Наиболее часто используют следующие таксономические единицы (таксоны)- штамм, вид, род. Последующие более крупные таксоны - семейство, порядок, класс. Нумерическая (численная) таксономия основывается на использовании максимального количества сопоставляемых признаков и математическом учете степени соответствия.

Номенклатура - название микроорганизмов в соответствии с международными правилами. Для обозначения видов бактерий используют бинарную латинскую номенклатуру род/вид, состоящую из названия рода (пишется с заглавной буквы) и вида (со строчной буквы). Примеры- Shigella flexneri, Rickettsia sibirica.

Царство Класс прокариоты (бактерии) эукариоты (грибы, простейшие, Порядок Семейство Род Вид (морфовары, биовары, хемовары, серовары, фаговары)

Вид - совокупность микроорганизмов, имеющих общее эволюционное происхождение, близкий генотип (высокую степень генетической гомологии, как правило 95%) и максимально близкие фенотипические характеристики. Штамм – выделенная культура данного вида бактерий со сходными характеристиками, выделенная из разных источников или из одного источника в разное время ( «конкретный образец данного вида» )

Эукариоты. Простейшие Амебиаз Трихомониаз

Грибы плесневые (мицелиальные) Aspergillus sp. 1 -конидии 2 -стеригма 3 стебель Аспергиллез носа

Прокариоты. Бактерии Campylobacter Кампилобактериоз (колоноскопия)

Спирохеты Leptospira Лептоспироз

Микоплазмы Mycoplasma ВЗОМТ

Риккетсии Rickettsia Сыпной тиф

Хламидии Chlamydophila Пневмония

Вирусы (virus с лат. - яд, ядовитое начало) Rubivirus Краснуха

Актиномицеты Nocardia Нокардиоз