Очистка белка Выполнил Филиппов Николай Группа фх-11 -3/ф7 -11 -2
Получение белка § Биологический материал содержит большое число белков.
Выбор исходного материала § Выбирают, тот который содержит большое кол. -во фермента § Обращают внимание на легкость выращивания § Из животных часто берут крыс или кроликов
Разрушение клеток и экстракция Способы разрушения клеток: -Мягкое воздействие; -Воздействие средней силы; -Сильное воздействие;
Методы очистки белка § § § Концентрирование; Диализ; Осаждение белков; Гидрофобная хроматография; Аффинная хроматография;
Концентрирование § Осаждение белка (NH 4)2 SO 4 C 3 H 6 O
Диализ и осаждение белков § § § Образец охлаждаю до 0˚С; Добавляют растворитель; Идет осаждение белка;
Гидрофобная хроматография - жидкостная хроматография на неполярных сорбентах, в которой в качестве подвижной фазы используются водные или водно-органические буферные растворы и разделение смеси веществ происходит в результате различия в их взаимодействии с гидрофобными группами сорбента в условиях убывающего градиента солей в элюенте. Схема гидрофобной хроматографии
Афинная хроматография (affinity – сродство), или биоспецифическая хроматография – наиболее распространенный метод выделения и очистки биологически активных веществ, предназначенных для целей молекулярной биологии и медицины.
Кристаллизация белка непосредственно в клетке
Рентгеноструктурный анализ белков
Спасибо за внимание
Скачать презентацию Очистка белка Выполнил Филиппов Николай Группа фх-11 -3 ф7
Очистка белка.ppt