Оценка иммунной системы человека. Иммунный статус. Иммунограмма. Профессор

Оценка иммунной системы человека. Иммунный статус. Иммунограмма. Профессор Р.Я. Мешкова Лекция № 5 Стоматологический факультет 22 ноября 2012г

Иммунный статус- определение Иммунный статус человека - это комплекс количественных и функциональных показателей, отражающих конкретное состояние иммунной системы в данный момент времени

Иммунограмма Это карта обследования иммунного статуса, отражающая показатели лабораторных тестов оценки врожденного и адаптивного иммунитета

Анализ иммунограммы Проводится на основе знаний о функционировании иммунной системы Клинико-иммунологическое заключение выдает врач аллерголог-иммунолог

Врожденный и адаптивный иммунитет – это 2 звена иммунной системы человека Врожденный иммунитет Макрофаг Адаптивный иммунитет Т-лимфоциты В-лимфоциты

Т-цитотоксические лимфоциты (ЦТЛ или CD8+T-лимфоциты)

В-лимфоциты

Врожденный и адаптивный иммунитет – это 2 звена иммунной системы человека Врожденный иммунитет Начинает действовать сразу в первые минуты попадания АГ в организм Функции: а) неспецифическое распознавание АГ различными клетками (кроме Т- и В- лимфоцитов!) с помощью PRR (Toll-like и др.) б) фагоцитоз в ) цитолиз инфицированных или измененных клеток (NK-л, комплемент) в) бактериолиз (С3) г) воспаление Адаптивный иммунитет Начинает действовать после того, как произошла активация врожденного иммунитета Функции: а)специфическое (!) распознавание АГ Т- и В- лимфоцитами с помощью TCR и BCR б) Т-лимфоциты осуществляют «двойное распознавание : CD8+Тл распознают пептиды антигена + МНС-1(Th1) CD4+Tл распознают пептиды антигена +МНС-2 (Th2)

Врожденный и адаптивный иммунитет- это 2 звена иммунной системы человека Врожденный иммунитет: Клетки-эффекторы макрофаги, дендритные, нейтрофилы, эозинофилы, тучные, NK-лимфоциты Гуморальные факторы— комплемент, противомикробные пептиды (дефенсины кателицидины) белки острой фазы воспаления (СРБ, белки сурфактанта) Интерфероны альфа и бетта провоспалительные цитокины-ИЛ-1, ИЛ-6, ИЛ-8, ФНО-альфа Адаптивный иммунитет 1.Клеточный иммунитет: Клетки-эффекторы- Т-л цитотоксические (ЦТЛ или CD8+T лимфоциты) Направлен на уничтожение внутриклеточных микроорганизмов (вирусы, бактерии), гельминтов, опухолевых клеток 2. Гуморальный иммунитет: эффекторы –иммуноглобулины В-лимфоциты Тh 2 Направлен на защиту от внеклеточных патогенов, аллергенов и др.

Врожденный и адаптивный иммунитет- это 2 звена иммунной системы человека Врожденный иммунитет Свойства: Передается по наследству (около 100 генов PRRs) Клетки-эффекторы не образуют клоны себе подобных при ответе на АГ Нет ммунологической памяти на АГ Представляют антиген (АПК) Т- и В-лимфоцитам, тем самым инициируют адаптивный иммунитет Активированные клетки секретируют цитокины, участвующие в иммунном ответе Адаптивный иммунитет Свойства: Не передается по наследству Разнообразие TCR и BCR за счет соматической перегруппировки генов в период эмбриогенеза и постнатальный период Образуются клоны Т- и В-лимфоцитов, способных отвечать только на один АГ (один антиген-один лимфоцит) Сохранение иммунологической памяти после первой встречи с АГ (Т- и В-лимфоциты памяти, CD45+) Первичный (IgM) и вторичный (IgG) иммунный ответ

Методы исследования иммунной системы (в настоящее время известно более 50-ти методов) Врожденный иммунитет Методы исследования: Показатели фагоцитоза Определение Toll-рецепторов и их генов Активность комплемента Интерфероны альфа и бета Число NK-лимфоцитов (CD16+) Цитокины (ИЛ-1, ИЛ-6, ФНО-а) Белки острой фазы воспаления другие Адаптивный иммунитет Методы исследования: К-во Т-лимфоцитов (CD3+) К-во В-лимфоцитов (CD19+) Субпопуляции Т-лимфоцитов T-хелперов(CD3+CD4+) ЦТЛ (CD3+CD8+) Концентрация сывороточных иммуноглобулинов – IgM, IgG,IgA, IgA

Фагоцитоз – оценка врожденного иммунитета

CD8+Tлимфоцит (ЦТЛ) убивает опухолевую клетку – это Адаптивный клеточно-опосредованный иммунитет

Гуморальный иммунитет: основные эффекторные белки - иммуноглобулины Иммуноглобулин G – визуализация молекулы и схема

Иммунодиагностика Это проведение лабораторного и клинического исследования, которое позволяет выявить конкретные нарушения в иммунной системе Цель иммунодиагностики: выявить нарушения в том или ином звене иммунной системы, разработать алгоритм иммунотерапии и провести мониторинг состояния иммунной системы

Исследуемый материал кровь клеточные элементы крови сыворотка слюна зубодесневая жидкость спинно-мозговая жидкость слезная жидкость и др.

Основные методы исследования в иммунологии Определение CD-маркеров клеток – метод фенотипирования клеток иммунной системы (проточная лазерная цитометрия) Уровень иммуноглобулинов, специфические антитела- метод ИФА (иммуноферментный анализ) Методы молекулярной генетики – выявление экспресии генов рецепторов, цитокинов Радиоиммунный анализ – выявление молекул на поверхности клеток и растворимых молекул (маркеры клеток, цитокины и др.) Метод иммунофлюоресценции – выявление антигенов Молекулярной биологии – ПЦР (полимеразная цепная реакция): выявление в образцах вирусов, бактерий,простейших, грибов; типирование генов МНС, цитокины и их рецепторы и др. Методы биологического тестирования – выявление биологического действия ЦТЛ и многих цитокинов (ИЛ-1, ИЛ-4 и др. на стандартных клеточных линиях фибробластов человека, опухолевых клетках. Традиционные серологические методы определения специфических антител к бактериям и вирусам – реакция агглютинации, РСК, РНГА и др.

Подходы к оценке иммунного статуса По тестам 1-го уровня – ориентировочные тесты (число Т- и В-лимфоцитов, иммуноглобулинов, фагоцитоз) по тестам 2-го уровня- аналитические: -субпопуляции Th1, Th2, - экспрессия молекул активации лимфоцитов-CD25+, HLA-DR, - субклассы IgG1,IgG2,IgG3,IgG4, IgA1, IgA2 другие

Патогенетический анализ функционирования иммунной системы В основе – оценка стадий развития иммунного ответа 1.Стадия - распознавание АГ 2 . Стадия активации клеток врожденной и адаптивной иммунной системы: а) выделение макрофагами (АПК) провоспалительных цитокинов (ИЛ-1,ИЛ-6,ИЛ-8 ,ФНО-а) б) экспрессия клетками врожденного иммунитета генов Toll-рец. в) экспрессия лимфоцитами и др. клетками ИС маркеров активации- молекул CD25+,HLA-DR 3.Стадия пролиферации клеток ИС 4.Стадия дифференцировки и эффекторных функций (уровень иммуноглобулинов, к-во ЦТЛ и др)

Иммунорегуляторный индекс-ИРИ Это соотношение CD4+Tл (основные клетки гуморального адаптивного иммунитета) к CD8+Tл (основные клетки клеточного адаптивного иммунитета В норме ИРИ=CD4+Tл /CD8+Tл = 1,6-2,2

Принцип «иммунологического компаса» ИРИ повышается при аллергии, аутоиммунных заболеваниях, лимфопролиферативных заболеваниях (лимфомы) ИРИ снижается при иммунодефицитах врожденных и приобретенных ( в т.ч. СПИДе, онкопатологии, вирусных инфекциях и др.)

Аналитический принцип оценки иммунной системы Это комплексная углубленная оценка отдельных подсистем иммунной системы – рецепторов, генов, цитокинов внутри клеток, поверхностных клеточных молекул-маркеров и т.п. Используемые методы- генотипирование, биологическое тестирование, иммуногистохимия, иммунофлюоресценция и др. Доступно лишь отдельным иммунологическим лабораториям

Иммунограмма Это карта обследования иммунного статуса, отражающая показатели лабораторных тестов оценки врожденного и адаптивного иммунитета