НОВЫЕ КЛЕТОЧНЫЕ ТЕХНОЛОГИИ Основные методы окрашивания мышечной ткани

НОВЫЕ КЛЕТОЧНЫЕ ТЕХНОЛОГИИ «Основные методы окрашивания мышечной ткани» Выполнили: Кабельков Антон Фарафонов Иван студенты 213 группы ФФМО специальности лечебное дело Проверила: Шеломенцева Ольга Викторовна

Гладкомышечные клетки и волокна произвольной (поперечнополосатой) мускулатуры хорошо выявляются с помощью многих обзорных методов, особенно трехцветных, которые обеспечивают контрастную окраску с коллагеновыми волокнами. Для выявления гладких мышц также лучше использовать трехцветные методы: по Маллори, азаном или др. В. Romeis (1989) рекомендует для окрашивания гладких мышц метод Найберта с ализариновым синим.

ОКРАШИВАНИЕ ЖЕЛЕЗНЫМ ГЕМАТОКСИЛИНОМ ПО ГЕЙДЕНГАЙНУ. Сначала производят окрашивание железным гематоксилином по Гейденгайну , затем срезы скелетной или сердечной мышечной ткани можно докрасить 0, 5% водным раствором тиазинового красного, далее осуществляются их ополаскивание дистиллированной водой, обезвоживание, заключение в ксилол, бальзам. Результат окрашивания: миофибриллы темно-синие, соединительная ткань и сарколемма интенсивнокрасные, вставочные диски и хроматин черные.

Кардиомиоциты (с верху) Поперечный срез пищевода взрослого кролика (справа)

ГЕЙДЕНГАЙН Мартин

ОКРАШИВАНИЕ ГЛАДКОЙ МЫШЕЧНОЙ ТКАНИ НА СРЕЗАХ АЛИЗАРИНОВЫМ СИНИМ ПО НЕЙБЕРТУ. Приготовление растворов. • 1. Раствор ализаринового синего: к 100 мл дистиллированной воды прибавляют 10 г химически чистого сульфата алюминия и 0, 5 г кислотного ализаринового синего, кипятят 5— 10 мин, затем доливают до 100 мл дистиллированной водой и фильтруют. • 2. Водный раствор ацетата меди (2, 5% или иной — концентрацию раствора и время пребывания в нем подбирают опытным путем). • 3. 5% раствор фосфорно-вольфрамовой кислоты. Результат: гладкая мышечная ткань окрашивается в синий цвет.

ОКРАСКА ПО МЕТОДУ ВАН ГИЗОНА Реактивы А. Железный гематоксилин по Вейгерту, раствор В, 18 мл В. Железный гематоксилин по Вейгерту, раствор А, 18 мл C. Пикрофуксин по Ван-Гизону, 30 мл Результат: 1)Ядра - черные 2)Коллагеновые волокна - пурпурно-красные 3)Цитоплазма, гладкая и поперечно-полосатая мышечная ткань, ороговевающий эпителий, нейроглия и эритроциты - желтые

Бронх страуса, окрашенный по Ван Гизону

НАБОР ДЛЯ ОКРАСКИ «АЗАНОМ» ГЕЙДЕНГАЙНА Реактивы: А. Азокармин по Гейденгайну, 100 мл В. Спиртовой раствор анилина, 30 мл C. Спиртовой раствор кислоты, 30 мл D. Спиртовой раствор фосфорно-вольфрамовой кислоты, 100 мл E. Полихромный раствор по Маллори, 100 мл. с подкрашиванием анилиновым синим Результаты: 1)Коллаген, ретикулярные волокна, базофильные гранулы клеток гипофиза, юкстагломерулярные гранулы, строма почечных клубочков темно-синий 2) Нейроглия темно-красный 3) Мышечная ткань- оранжевый 4)Хроматин, эритроциты, ацидофильные гранулы клеток гипофизакрасный 5) Цитоплазматические гранулы дельта клеток гипофиза- голубой

Яичник

Набор для окраски по Массону с анилиновым синим Реактивы: А. Железный гематоксилин Вейгерта, раствор В, 18 мл В. Железный гематоксилин Вейгерта, раствор А, 18 мл C. Спиртовой раствор пикриновой кислоты, 30 мл D. Кислый фуксин Понсо, 30 мл E. Раствор фосфомолибденовой кислоты, 30 мл F. Анилиновый синий по Массону, 30 мл Результаты: • Ядра и гаметы - черный • Цитоплазма, кератин, мышечные волокна, ацидофильные гранулы - красный • Коллаген, мукополисахариды, базофильные гранулы клеток синий • Гранулы клеток -синий • Эритроциты- желтый

Миокард

ПЕРЛЬС ВАН-ГИЗОН Реактивы: А. Раствор калия ферроцианида, 12 х10 мл В. Активирующий буферный раствор, 50 мл C. Пикрофуксин по Ван-Гизону, 30 мл Результаты: 1)Реактивные ионы трехвалентного железа синий 2)Коллаген пурпурно-красный 3)Цитоплазма, мышечная ткань, роговой слой эпителия, Нейроглия, эритроциты – желтый

Печень

P. T. A. H. ФОСФОРНОВОЛЬФРАМОВЫЙ ГЕМАТОКСИЛИН Реактивы А. Раствор перманганата калия, 18 мл В. Кислотный буфер, 18 мл C. Раствор щавелевой кислоты, 30 мл D. P. T. A. H. по Маллори, 80 мл Результаты • Ядра, фибрин (подавляющее количество), Миофибриллы, астроциты, некоторые эластические волокна, нейроглия, миелиновые волокна - темно-голубые • Коллаген, костный матрикс, хрящ - различные оттенки кирпично-красного

Мозжечек Поперечно-полосатая мускулатура

ШИК-РЕАКЦИЯ ПИКРОИНДИГОКАРМИН Реактивы: А. Раствор йодной кислоты, 30 мл В. Реактив Шиффа в модификации Хочкисса-Мак-Мануса, 30 мл C. Раствор метабисульфита калия, 30 мл D. Раствор фиксатора, 30 мл E. Раствор пикро-индигокармина, 30 мл Результаты: 1) ШИК-положительные субстанции - ярко красный Соединительная ткань- сине-зеленый 2) Мышечная ткань, роговой слой эпителия, волокна нейроглии, эритроциты - желто-зеленый

Желудок =)

п С с а б и з о в а и н ан м е! и !! !!