Микобактерии туберкулеза и лепры Актиномицеты Кыргызская Государственная Медицинская

Микобактерии туберкулеза и лепры Актиномицеты Кыргызская Государственная Медицинская Академия Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии Д. м. н. , проф. Адамбеков Д. А. 1

• Микобактерии – это бактерии в виде коротких палочек, которые окрашиваются с трудом, но после окраски выдерживают обесцвечивание кислотой или спиртом поэтому их называют «кислотоустойчивыми» бактериями 2

• Таксономия: семейство – Mycobacteriaceae род Mycobacterium • Виды микобактерий 1. Myc. tuberculosis 2. Myc. bovis 3. Myc. Leprae – возбудитель лепры (проказы) 4. Атипичные микобактерии (M. smegmatic, M. аvium) 3

• Туберкулез – это зоо-антропонозная хроническая инфекция, характеризующаяся специфическим поражением организма. • tuberculum – бугорок (лат. ) 4

5

• Туберкулез (от лат. tuberculum – бугорок) – первично хроническое заболевание человека и животных, сопровождающееся поражением различных органов и систем (органов дыхания, лимфатических узлов, кишечника, костей и других органов) 6

• Таксономия. Возбудители туберкулеза относятся к семейству Mycobacteriaceae, роду - Mycobacterium родовой признак микобактерий – кислото-, спирто-, и щелочеустойчивость. • Заболевание вызывается 3 видами микобактерий Mycobacterium tuberculosis – человеческий вид ( в 92 % случаев), Mycobacterium bovis – бычий вид (в 5% случаев), Mycobacterium africanum – промежуточный вид (в 3% случаев). 7

8

• История. Возбудитель открыт Р. Кохом в 1982 г. • 1890 г. получен туберкулин • 1911 г. за открытие возбудителя туберкулеза Р. Кох удостоен Нобелевской премии. • От туберкулеза погибли Шуберт, Шопен, Некрасов, Чехов 9

• Морфология – палочки – длина от 1, 5 до 3, 5 мкм, ширина 0, 3 мкм. Неподвижны. • Имеет слизистую капсулу (воск). • Химический состав: липиды до 40% (кислотоустойчивость), белки, углеводы. • Липиды, выделенные из вирулентных микобактерий с помощью эфира называют «кордфактор» 10

11

12

• Протеины – вызывают развитие туберкулиновой чувствительности (клеточный иммунитет) • Окрашивается методом Циля. Нильсена (карболовый фуксин, термическая обработка, обесцвечивание серной кислотой) 13

• 1. 2. 3. Изменчивость микобактерий: L-формы (без клеточной стенки) Фильтрующиеся формы Атипичные формы (трудность диагностики) 14

• Устойчивость: высокая t° 80° - 2 ч. t° 0° сохраняется до года • Хорошо сохраняется в высушенном состоянии (учебники, уличная пыль – до 6 мес. ) • Дезинфекция конц. растворы: • Хлорамин 1 -10% - 5 ч. • Хлор. известь 10 -20% - 2 -3 ч. 15

• Культивирование – прихотливы, аэробы, 37°С. • Медленно растут ( от 10 до 30 суток) • Глицериновый бульон. Обработка кислотой или щелочью мокроты • Среды. Яичная – среда Левенштейна. Йенсена • Среда Гельберга (зав. кафедрой микробиологии КГМА (1945 -1960 гг. ) (яйцо, молоко, малахитовая зелень) • Картофельно-глицериновая среда • Синтетическая среда Сотона 16 • Образуют R-формы 16 колоний

17

• • • Антигенная структура Липиды Полисахариды Корд-фактор Белки Иммунитет Клеточный (ГЧЗТ) и гуморальный (антитела – агглютинины, преципитины, лизины, опсонины, комплемент-связывающие ) Нестерильный 18

19

20

• Токсинообразование • Альттуберкулин • РРD (perified protenum derivat) очищенный белковый дериват – Проба Манту) 21

• Патогенность для животных • M. tuberculosis (человек, обезьяна, кошка) • M. bovis (крупный рогатый скот, свиньи, бараны, козы, человек) молоко, молочные продукты) морская свинка болеет даже от 1 микроба (M. tuberculosis, M. bovis) • Кролики чувствительны к M. bovis 22

• Эпидемиология • Источник инфекции: 1) больные туберкулезом (органов дыхания); 2) больные животные (крупный рогатый скот, свиньи, овцы, козы) молоко, мясо. • Механизм заражения: а) воздушнокапельный путь; б) воздушнопылевой; в) алиментарный; г) контактно-бытовой 23

• • 1. 2. 3. 4. 5. Патогенез. Входные ворота - органы дыхания, при заражении M. bovis – ж. к. т. Первичный туберкулез: Развитие лимфоаденита (воспаление лимфатических узлов) и лимфангоита (лимфатических протоков) Развитие некроза и обезыствление (очаг Гона) Положительная проба Манту Поражение органов (легких) Вторичный туберкулез возникает у людей инфицированных туберкулезом 24

• • 1. 2. 3. 4. Иммунитет Феномен Коха (ПЧЗТ – повышенная чувствительность замедленного типа (синоним клеточного иммунитета Сенсибилизация клеток (лимфоцитов) Размножение лимфоцитов (РБТЛ) Выработка медиаторов ПЧЗТ (интерферон, интерлейкины, фактор торможения миграции макрофагов) Положительная кожная туберкулиновая проба (Манту) развитие местного воспалительного процесса – гранулемы Эффекторная фаза (уничтожение антигена) 25 Иммунитет – нестерильный (БЦЖ, очаг Гона)

• Лабораторная диагностика 1. Бактериоскопический метод (колонии в 1 мл. мокроты 500 тыс. микобактерий) Обогащение мокроты а) флотация (ксилол, бензол) надосадок б) гомоинизация (добавляют кислоту, щелочь и центрифугируют) осадок Окраска по а) Цилю-Нильсену б) Люминесцентная микроскопия 26

2) Бактериологический • Преимущество выявить 10 -100 микробов на 1 мл. • Посев на среды Левенштейна-Иенсена, картофельно-глицериновый агар и другие среды. Обработка 10% H 2 SO 4 или 4 -6% КОН 3) Биопрепараты (морские свинки, кролики) 4) Серологические реакции РНГА, РСК, ИФА 5) ПЦР (полимеразная цепная реакция) – современный метод генодиагностики туберкулеза 6) Клеточные реакции (РБТЛ, РТМЛ, ППН) 27

• Лечение 1. Антибиотики – рифампицин, стрептомицин и др. 2. Химиопрепараты: фтивазид, канамицин, тубазид, ПАСК, тибон и др. 28

• Профилактика. БЦЖ (Bacilla Calmette Guerin) 13 лет выращивали на картофельноглицериновом агаре с добавлением бычьей желчи. • Вакцинация 3 -5 дней после рождения. Ревакцинация 7 лет, 14 до 30 лет. • Заболеваемость туберкулезом в КР 112 на 10 тыс. населения меньше 20 по СССР 29

Возбудитель лепры (Mycobacterium leprae) • Лепра – генерализованное первичнохроническое заболевание человека, сопровождающееся гранулематозными поражениями кожи и слизистой оболочки верхних дыхательных путей, а также периферической нервной системы. • Название заболевания происходит от греч. lepros – чешуйчатый, шероховатый, шелушащийся. Основу лепрозных поражений, как и при туберкулезе, 30 составляет специфическая гранулема.

• Возбудитель заболевания Mycobacterium leprae, был открыт норвежским врачом Г. А. Гансеном в 1874 г. при микроскопическом исследовании неокрашенных соскобов, полученных с поверхности разреза узла больного лепрой. 31

32

33

• • • Морфология Форма – палочки с колбовидными вздутиями Размер – 1 -8 мкм. Окраска – по Цилю-Нильсену Расположение – в виде сигар в ч. к. , в материале – шаров Устойчивость к кислотам, щелочам, спирту 34

35

36

• Антигенная структура. Особенностью антигенных свойств Mycobacterium leprae является более выраженная по сравнению с другими микобактериям способность суспензий микроорганизмов усиливать клеточные иммунные реакции без добавления адъювантов. Ряд антигенов Mycobacterium leprae являются общими для всех микобактерий, в том числе с вакцинным штаммом BCG, что используется для профилактики лепры. 37

• Показано наличие гетерофильных антигенов у Mycobacterium leprae и лиц с группой крови 0(I), M+, Rh, P+. Эти лица более восприимчивы к данному заболеванию, так как антигенная мимикрия способствует персистенции Mycobacterium leprae в макрорганизме. 38

• • • Источник инфекции Длительный контакт с больным Пути передачи Воздушно-капельный Контактный Клинические формы Лепроматозная Туберкулоидная Недифиринцированая 39

• Восприимчивость лабораторных животных. В экспериментальных условиях к M. leprae восприимчивы мыши и девятипоясные броненосцы. 40

• У мышей происходит медленное локальное размножение M. leprae при заражении в подушечку лапки (метод Шепарда). Генерализации процесса удается достичь подавлением клеточного иммунитета путем тимэктомии, сублетальным облучением и применением антилимфоцитарной сыворотки. 41

• Для научных и практических целей применяется классификация Ридли -Джоплинга, в основе которой лежит деление больных лепрой в зависимости от их иммунологической реактивности, отражающейся в клинических проявлениях, а также данных гистологических, бактериоскопических и иммунобиологических исследований. 42

• Лепрозный процесс рассматривается как непрерывный иммунологический спектр между ТТ - и LL-типами лепры, называемыми полярными, с выделением 3 основных промежуточных (пограничных) форм. 43

Лабораторная диагностика • Микроскопический • Биологический • Аллергическая проба Мицуды 44

• • • Актиномицеты Actis - луч Mycos – гриб Виды: сапрофитные, условнопатогенные, продуценты, антибиотиков • Морфология Форма – нитевидная Размер – до 600 мкм. Окраска – Грам+ 45

Actinomyces bovis naeslundii israelii 46

47

Актиномицеты (род Actynomyces) • Морфология. Ветвящиеся бактерии. В отличие от грибов не содержат в клеточной стенке хитина или целлюлозы, а сама стенка имеет строение грамположительных бактерий. Мицелий примитивен. 48

• Имеют вид тонких прямых или слегка изогнутых палочек размером 0, 2÷ 1, 0 x 2, 5 мкм, часто образуют нити длиной до 10 -50 мкм. Характерная особенность актиномицетов – способность образовывать хорошо развитый мицелий. 49

Культуральные свойства • Тип дыхания – факультативные анаэробы • р. Н – 4, 4 -9 мкм. • Питательные среды – кровяной агар + экстракт сердечной мышцы, сахарный бульон и агар, среда Сабуро 50

• • • Источник инфекции Носители и больные люди и животные • Пути передачи аэрогенный контактный Клинические формы актиномикоза шейно-лицевая 51

• • • кожно-мышечная ЦНС торакальная абдоминальная мочеполовой системы генерализованая 52

• Антигенная структура. В ИФА выделяют 6 серогрупп: A, B, C, D, E и F. • Экологическая ниша. Основная среда обитания – почва. Постоянно обнаруживаются в воде, воздухе, на различных предметах, покровах растений, животных и человека. Колонизируют слизистую оболочку полости рта человека и млекопитающих. • Устойчивость в окружающей среде. При попадании на воздух мгновенно погибают 53

• Чувствительность к антимикробным препаратам. Чувствительны к пенициллинам, тетрациклину, эритромицину и клиндамицину, но резистентны к антибиотикам. Чувствительны к действию обычно применяемых антисептиков и дезинфектантов. 54

• Эпидемиология. Источник инфекции – почва. Характерна множественность механизмов, путей и факторов передачи; хотя чаще всего механизм передачи – контактный, а путь передачи – раневой. Восприимчивость к актиномицетам, как ко всем УПМ, низкая у лиц с нормальным иммунным статусом и повышенная у иммунокомпромиссных хозяев. 55

• Патогенез. Вызывают оппортунистическую инфекцию. • Клиника. Актиномикоз – хроническая оппортунистическая инфекция человека и животных, вызываемая анаэробными и факультативно-анаэробными актиномицетами, которая характеризуется гранулематозным воспалением с полиморфными клиническими проявлениями. 56

• • • Лабораторная диагностика РИФ Микроскопический Культивирование Серологический Аллергическая проба 57

Лечение • Антибиотики • Сульфаниламидные препараты • Иммунотерапия – поливалентная вакцина 58

• Иммунитет изучен недостаточно. • Микробиологическая диагностика. Материалом для исследования служа мокрота, гной из свищей, пунктаты невскрытых очагов размягчения, соскобы с грануляций, биопсия и тканей. • Для диагностики используют бактериологический, серологический и аллергологический методы. 59

• Лечение. Удовлетворительных результатов можно достичь применением пенициллина, тетрациклина, эритромицина, клиндамицина. • Профилактика. Специфическая профилактика не разработана. Не специфическая профилактика направлена на повышение иммунного статуса. 60