Методы разделения белков и аминокислот Хроматография

Методы разделения белков и аминокислот

Хроматография – метод разделения смесей веществ, основанный на распределении веществ между двумя фазами: подвижной и не подвижной.

Хроматография – метод разделения смесей веществ, основанный на распределении веществ между двумя фазами: подвижной и не подвижной. хроматография Газовая Жидкостная

Хроматография – метод разделения смесей веществ, основанный на распределении веществ между двумя фазами: подвижной и не подвижной. хроматография Аналитическая Препаративная

Хроматография – метод разделения смесей веществ, основанный на распределении веществ между двумя фазами: подвижной и не подвижной. хроматография ионнообменная афинная эксклюзионная

Хроматография Задание 1. Разделение аминокислот хроматографией на бумаге

Хроматография Задание 1. Разделение аминокислот хроматографией на бумаге Окраска аминокислот: Нингидриновая реакция

Хроматография Задание 1. Разделение аминокислот хроматографией на бумаге Окраска аминокислот: реакция Паули

Хроматография Задание 2. Разделение смеси белков с помощью гель-хроматографии

Хроматография Задание 2. Разделение смеси белков с помощью гель-хроматографии Этапы работы: • Нанесение пробы • Элюция • Сбор фракций • Измерение концентраций белков во фракция • Промывка колонки

Диализ – освобождение растворов высокомолекулярных веществ от низкомолекулярных веществ при помощи полупроницаемых мембран.

Диализ – освобождение растворов высокомолекулярных веществ от низкомолекулярных веществ при помощи полупроницаемых мембран. пробы буфер

Диализ Задание 3. Диализ смеси голубого декстрана и бихромата калия Этапы работы: • Погружение диализного мешка со смесью в буферный раствор • Наблюдение за изменением окраски растворов

Электрофорез – метод разделения смесей заряженных молекул под действием внешнего электрического поля.

Электрофорез с додецилсульфатом натрия Додецилсульфат Na = ДДС Na Sodium Dodecyl Sulfate = SDS

Электрофорез с додецилсульфатом натрия гидрофобная часть гидрофильная часть

Электрофорез с додецилсульфатом натрия цвитерион гидрофобная часть гидрофильная часть

Электрофорез с додецилсульфатом натрия до гидрофобные участки молекулы Заряды на поверхности молекулы

Электрофорез с додецилсульфатом натрия после SDS

Электрофорез Диск-электрофорез

Электрофорез Состав гелей агарозные полиакриламидные

Электрофорез Состав гелей агарозные полиакриламидные (ПААГ)

Электрофорез Полимеризация полиакриламидного геля акриламид метиленбисакриламид

Электрофорез Полимеризация полиакриламидного геля тетраметилэтилендиамин (ТЕМЕД) персульфат аммония (ПСА)

Электрофорез Задание 4. Электрофорез проб, содержащих хромосомальные белки Этапы работы: • Подготовка проб с ДДС Na и меркаптоэтанолом • Приготовление разделяющего и концентрирующего гелей • Нанесение на гель проб и стандартов молекулярной массы • Разделение белков под действием электрического поля • Фиксация белков геле после разделения • Окраска геля