МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ СТБ ISO 7218 -2010 доцент кафедры ФХМСП БГТУ Егорова З. Е. 1
ГИГИЕНИЧЕСКИЕ МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ n n n Чистая рабочая зона и отсутствие сквозняков; обеззараживание рабочей поверхности до и после проведения исследований; немедленно удаляют любые брызги зараженных и других продуктов ватным тампоном или др. , смоченным 70 -%-ным этанолом или др. дезсредством. доцент кафедры ФХМСП БГТУ Егорова З. Е. 2
ГИГИЕНИЧЕСКИЕ МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ n n При работе с патогенными микроорганизмами запрещается пиппетировать ртом. Надо помнить, что аэрозоли являются основной причиной заражения окружающей среды. доцент кафедры ФХМСП БГТУ Егорова З. Е. 3
ГИГИЕНИЧЕСКИЕ МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ n Аэрозоли образуются при: – открытии чашек Петри, флаконов, пробирок; – использовании смесителей, шприцов, центрифуг и т. д. ; – опорожнении пипеток выдуванием; – стерилизации петель и игл после влажной инокуляции; – открытии ампул, содержащих лиофилизированные культуры микроорганизмов. доцент кафедры ФХМСП БГТУ Егорова З. Е. 4
ПРИГОТОВЛЕНИЕ ИСХОДНОЙ СУСПЕНЗИИ n n Приготовление исходной суспензии и разведений - по ГОСТ 26669; Продолжительность между окончанием приготовления суспензии и посевом на питательную среду не должно превышать 45 мин. доцент кафедры ФХМСП БГТУ Егорова З. Е. 5
ПОСЕВ НА АГАР В ЧАШКАХ ПЕТРИ n n n чашки маркируют; вносят предусмотренные объемы разведений; наливают в каждую чашку предусмотренные объемы питательной среды (температура не выше 47°С); доцент кафедры ФХМСП БГТУ Егорова З. Е. 6
ПОСЕВ НА АГАР В ЧАШКАХ ПЕТРИ n n Незамедлительно и тщательно перемешивают для равномерного распределения посевного материала и последующего равномерного роста микроорганизмов; оставляют застывать на ровной горизонтальной поверхности ( не более 10 мин); доцент кафедры ФХМСП БГТУ Егорова З. Е. 7
ПОСЕВ НА АГАР В ЧАШКАХ ПЕТРИ n n При возможном «ползучем» росте на поверхность застывшего агара наносят слой голодного агара или идентичного залитому агара; при поверхностном посеве материал вносят в центр чашки Петри с застывшим агаром. доцент кафедры ФХМСП БГТУ Егорова З. Е. 8
ПОСЕВ НА АГАР В ЧАШКАХ ПЕТРИ n n Как можно быстрее распределяют посевной материал по поверхности с помощью стерильного шпателя до исчезновения видимых следов жидкости. Термостатируют в перевернутом виде; доцент кафедры ФХМСП БГТУ Егорова З. Е. 9
ПОСЕВ НА АГАР В ЧАШКАХ ПЕТРИ n n n при 55 °С чашки неплотно укладывают в пластиковый пакет; чашки анализируют немедленно после террмостатирования; допускается хранить чашки не более 24 ч в холодильнике. доцент кафедры ФХМСП БГТУ Егорова З. Е. 10
Общие требования n n Посев 1 чашки Петри 90 мм в диаметре на разведение; Max подсчитанное количество всех содержащихся в чашке колоний: 300 на чашку; Max общее количество колоний (типичных и атипичных), содержащихся в чашке, при подсчете типичных или предполагаемых колоний: предпочтительно 300 на чашку; Max подсчитанное количество типичных и предполагаемых колоний: 150 на чашку; доцент кафедры ФХМСП БГТУ Егорова З. Е. 11
Общие требования n n n Количество предполагаемых колоний, посеянных с целью идентификации или подтверждения в каждой выбранной чашке: в общем случае 5. При использовании чашек Петри с другим диаметром, отличным от 90 мм, максимальное количество колоний должно быть увеличено или уменьшено пропорционально площади чашки или мембраны. Требуется подсчет колоний не менее, чем в 1 чашке, которая содержала бы не менее 10 колоний (всех колоний, типичных колоний или колоний, отвечающих критериям идентификации). доцент кафедры ФХМСП БГТУ Егорова З. Е. 12
Подсчет колоний n N = ΣC / V× 1, 1×d, – ΣC - сумма колоний, подсчитанных на всех чашках в двух последовательных разведениях, из которых хотя бы одна чашка содержит не менее 15 кол. – V - объем посевного материала, внесенного в каждую чашку , см 3. – d - коэффициент разбавления, соответствующий первому разведению (d=1, если используется неразведенный жидкий продукт (проба для испытаний)). доцент кафедры ФХМСП БГТУ Егорова З. Е. 13
Подсчет колоний § Результат округляют до двух значащих цифр. – Пример: 10 -2 – 120 колоний; 10 -3 – 14 колоний; N = 120 + 14 = 1× 1, 1× 10 -2 = 12181, 8 = 1, 2 • 10 -4 кое/г (см 3) доцент кафедры ФХМСП БГТУ Егорова З. Е. 14
Подсчет колоний – Если во всех чашках на уровне исходной пробы (жидкие продукты) или исходного разведения (твердые продукты) содержится менее 10, но не менее 4, результат вычисляют по указанному выше. – Если общее количество колоний составляет от 1 до 3 указывают: количество микроорганизмов менее (4×d) на г или см 3. – Если на чашке не выросли колонии: – Менее 1/d микроорганизмов на см 3 или г. доцент кафедры ФХМСП БГТУ Егорова З. Е. 15
Вопросы? доцент кафедры ФХМСП БГТУ Егорова З. Е. 16
Скачать презентацию МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ СТБ ISO 7218
подсчет микроорганизмов.ppt