METHOD VALIDATION ตรวจสอบความใชไดของวธทดสอ 1
ความห มาย • METHOD VALIDATION การยนยนโดยการทดสอบและมหลก ฐานแสดงวาวธทดสอบเหมาะสมกบความ ตองการเฉพาะ • METHOD VERIFICATION การยนยนโดยการทดสอบและมหลก ฐานแสดงวาเปนไปตามขอกำหนดทร ะบ 2
วธทดสอบทดจะตอง • ไดผลทถกตอง • เมอทดสอบซำ ยงไดผลทไมตางกน • ใชทดสอบสารทมความเขมขนนอยๆ ได • บอกไดวาความเขมขนตำสดทม 3
วธทดสอบทดจะตอง (ตอ ( • บอกไดถงชวงความเขมขนทสามารถ ทดสอบไดอยางถกตอง แมนยำ โดยทความสมพนธของคาทอานได กบความเขมขนมความเปนเสนตรง • สามารถทดสอบไดเฉพาะสารทตองการทด สอบ 4
ทำไมจงตองมการทำ • metho ขอกำหนดของ ISO/IEC 17025 • ความนาเชอถอของผ ลการทดสอบ • ทราบ conditions 5
วธทดสอบทตองทำ metho • วธทดสอบทใชไมใชว ธมาตรฐาน หองปฏบตการพฒนาขนเ อง 6
จะตองทำ method validatio • กอนนำไปใชจรง • เมอวธทเคย นนมการเปลยนแปลง เชน เปลยนเครองมอ validate condition เปนตน • เมอมการทดสอบนอกขอบขายจากท 7
สงทตองเตรยมในการทำ met • เครองมอ : ผานการสอบเทยบและเหมาะสมตอการใชง าน • วธทดสอบ : เขยนเปนลายลกษณอกษร • สารมาตรฐาน / สารเคม : ใบรบรอง สามารถสอบกลบได เหมาะสม • ผทดสอบ : ความสามารถ ประสบการณ วเคราะหขอมล 8
สงทใชในการทำ method Val • Blank : Reagent blank / Sample blank • Fortified sample / Spiked sample • Certified reference material (CRM) • Reference material (RM) • Interlaboratory comparison / Proficiency testing 9
Blank • Reagent blank ทดสอบทกขนตอนเชนเดยวกบการท ดสอบตวอยาง แตไมตองมตวอยาง • Sample blank --วตถทม จากสารเคม interfere matrix เหมอนกบตวอยาง แตไมมสารททดสอบอยในตวอย างนน 10
Fortified / Spiked sample • Fortified sample เตมสารทตองการทดสอบลงในต วอยาง • Spiked sample เตมสารใดๆ ลงในตวอยาง 11
Certified reference material (CRM วสดหรอสารทมสมบตอยางใดอ ยางหนงหรอหลายอยางซงไดรบ การรบรองโดยวธทถกตองตามหล -ม matrix กวชาการ เชนเดยวกบตวอยาง พรอมกบมใบรบรองทสามารถสอบก ลบได มการระบคาจรงและคาความไมแน นอน 12
Reference material (RM) วสดหรอสารทมสมบตอยางใดอ ยางหนงหรอหลายอยางซงมความ เปนเนอเดยวกนและจดเตรยมมาอ -ม matrix ยางด เพอใชประเมนวธทดสอบ เชนเดยวกบตวอยาง สอบเทยบเครองมอ หรอใชในการกำหนดคาใหกบวสด หองปฏบตการสามารถเตรยมเอง อน ผานการทดสอบอยางนอย 20 13
Interlaboratory comparison / Pro การเปรยบเทยบผลการทดสอบระหวางห องปฏบตการ โดยใชตวอยางเดยวกน แตอาจจะใชวธทดสอบแตกตางกน 14
Interlaboratory comparison • หองปฏบตการสามารถเตรยมตว อยางเอง • จำนวนหองปฏบตการทเขาร วมโครงการจะเปนเลขค และมกไมเกน 10 แหง • หองปฏบตการทเขารวมโคร งการ ควรจะ ไดรบการรบรอง ISO / IEC 15
Proficiency testing • มหนวยงานททำหนาท จดเต ยมตว อยาง ประเมนผลการทดสอบ และจดสงผลการประเมน • หองปฏบตการจะตองซอตวอย างมาทดสอบ • จำนวนหองปฏบตการทเขารว มโครงการมจำนวน 10 แหง ขนไป • มกเปนโครงการระดบนานาชาต 16
วธการคำนวณในการเตรยมสารละลา 17
สารละลาย(solution) ประกอบดวย ตวทำละลาย (solvent) กบ ตวถกละลาย (solute) ความเขมขนของสารละลาย (concen บงบอกจำนวนของตวถกละลายทมอย ในสารละลายจำนวนหนงสามารถบอกได หลายวธ ไดแก 1. %, ppm, ppb : - w/w, v/v, w/v 2. Molarity (Molar = M) : - โมล/ลตร 3. Normality (Normal = N) : - 18
สารละลายเขมขน 5% สารละลาย 100 ml มตวถกละลาย 5 กรม สารละลายเขมขน 5 ppm สารละลาย 1 ml มตวถกละลาย 5 ไมโครกรม ( g) หรอ สารละลาย 1 L มตวถกละลาย สารละลายเขมขน 5 ppb 5 มลลกรม สารละลาย 1 ml มตวถกละลาย 5 นาโนกรม (ng) หรอ สารละลาย 1 L 19
สารละลายเขมขน 5 M สารละลาย 1000 ml มตวถกละลาย 5 โมล สารละลายเขมขน 5 5 N สารละลาย 1000 ml มตวถกละลาย กรม สมมลย สารละลายเขมขน 5 m มตวทำละลาย 1 Kg มตวถกละลาย 5 โมล 20
Molar จำนวน โมล = นน. สาร / นน. โมเลกล Normal จำนวนกรม สมมลย = (นน. สาร / นน. โมเลกล ) x ประจ = จำนวน โมล x N ประจ x ประจ = M หรอ M = N / ประจ M 1 V 1 = M 2 V 2 เฉพาะกรณปฏกรยา N 1 V 1 = N 2 V 2 ใชไดทกกรณ 1: 1 21
สมการเคม กลมสตรเคมทเขยนขน เพออธบายการเปลยน แปลงทางเคมของสารในอตราสวนอยางต ำทสดของจำนวนโมเลกลของสารเหล านน โดยเขยนสารทเขาทำปฏกรยาเคม ไวทางดานซาย และสารทเกดขนใหมไวทางดานขวา ใชเครองหมาย + 22
กรณหาความเขมขนของสารละลายโด 23
สารละลายHCl 3 M จำนวน 15 ml ทำปฏกรยาพอดกบสารละลาย Ba(OH)2 จำนวน 10 ml จงหาความเขมขนของสารละลาย Ba(OH)2 2 HCl + Ba(OH)2 Ba. Cl 2 + 2 H 2 O เปน M และ N HCl 3 M = HCl จาก N 1 V 1 3 N = N 2 V 2 ดงนน N 1 = N 2 V 2 / V 1 = 3 x 15 / 10 = 4. 5 Normal จาก M = N / ประจ จะไดวา M = 4. 5 / 2 = 2. 25 Molar 24
กรณเตรยมสารละลายจากของเหลว 25
กรณทสารตงตนทนำมาเตรยมเป นของเหลวและระบคาความหนาแนน ใชสตร V = 100 M(MW) / pd โดยท V= ปรมาตรของสารทตองใชในการเตรยม M = ความเขมขนเปน Molar MW = นำหนกโมเลกล p= เปอรเซนตโดยนำหนกของสารทน 26
จงคำนวณหาปรมาตรของ HCl เขมขนทตองใช เพอเตรยมเปนสารละลายเขมขน 0. 1 M จำนวน 1 ลตร (MW ของ HCl = 36. 46, % โดยนำหนก = 37. 5 %, ความหนาแนน = 1. 19 จาก V = 100 M(MW) / pd = ( 100 x 0. 1 x 36. 46 ) / ( 37. 5 x 1. 19 ) = 8. 17 ml 27
กรณเตรยมสารละลายจากของแ 28
ตองการเตรยมสารละลายโซเดยมคลอ ไรด เขมขน 0. 1 M จำนวน 2000 ml จะตองใชโซเดยมคลอ ไรด หนกกกร สารละลายโซเดยมคลอไรด เขมขน 0. 1 M ม ( MW = 58 ) หมายถง สารละลาย 1000 ml ม Na. Cl 0. 1 โมล สารละลาย 2000 ml ม Na. Cl 0. 1 x 2000 / 1000 = 0. 2 โมล Na. Cl 1 โมล หนก กรม Na. Cl 0. 2 โมล หนก 58 29 58 x 0. 2 = 11. 6
ตองการเตรยมสารละลาย oxolinic acid เขมขน 50 ppm จำนวน 100 ml จะตองใช oxolinic acid กกรม สารละลายoxolinic acid เขมขน 50 ppm หมายถง สารละลาย 1 ml ม oxolinic acid 50 g สารละลาย 100 ml ม oxolinic acid 50 x 100 = 5000 g = 5000 / 10 6= 0. 005 g 30
กรณเตรยมสารละลายจากสารละลายคว 31
ตองการเตรยมสารละลาย oxolinic acid เขมขน 0. 1 ppm จำนวน 25 ml จะตองใชสารละลาย oxolinic acid เขมขน 10 ppm ก = ml และก l จาก M 1 V 1 M 2 V 2 0. 1 x 25 = 10 x V 2 = 0. 1 x 25 / 10 = 0. 25 ml จาก 1 ml = 1000 l ดงนน 0. 25 ml = 1000 x 0. 25 = 250 l 32
กรณเตรยม fortified sample ทคว 33
ตองการเตรยม fortified sample ทความเขมขน 10 g / g โดยในวธการทดสอบ ฮสตา มน ตองการเตรยม จะตองใชตวอยาง fortified sample 5 กรม ทความเขมขน 10 g / g หมายความวา ตวอยาง 1 กรม จะมฮสตา มน 10 g ดงนน ตวอยาง 5 กรม จะมฮสตา มน 10 x 5 = 50 g นนคอ จะตองเตม ฮสตา มนจำนวน 34
ซงการเตม ฮสตา มน ทำไดหลายอยาง เชน เตมสารละลาย ฮสตา มนเขมขน 50 g / ml จำนวน 1 ml ลงในตวอยาง 5 กรม หรอ เตมสารละลาย ฮสตา มนเขมขน โดยคำนวณจาก 500 g / ml จำนวน 0. 1 ml 500 g / ml สารละลาย ฮสตา มนเขมขน ลงในตวอยาง 5 กรม เปนตน หมายความวา มฮสตา มน 500 g ในสารละลาย 1 ml ดงนน มฮสตา มน 50 g 35
แบบฝกหดการเตรยมสารละลาย 1. ชง โซเดยมไฮ ดรอกไซด 80 กรม ละลายนำและปรบปรมาตรเปน 500 ml อยากทราบความเขมขน เปนโม ลาร ของส 2. ชงกรดเบนโซอก 1 กรม ารละลายน ละลายดวยเมธา นอลและปรบปรมาตรเป (นำหนกโมเลกลของ โซเดยมไฮ ดรอกไ น 100 40) อยากทราบความเขมขน เปน ml ซด = ppm ของสารละลายน 36
แบบฝกหดการเตรยมสารละลาย 3. มสารละลายคลอ แรมฟ นคอ ลเขม ขน 2 ppb อย 3 ml ตองการเตรยมเปนสารละลายคลอ แรมฟ น คอลเขม ขน 0. 3 ppb จำนวน 10 ml จะตองใชสารละลายคลอsample นคอ ลเขม 4. จะเตรยม fortified แรมฟ ขน 2 ppb ก ml 0. 2 g / g ไดอยางไร ทความเขมขน (ในวธการทดสอบ oxolinic acid จะตองใชตวอยาง 5 กรม ) 37
รายการทตอง Validate (Performance characteristic) 38
Range & Linearity • Range ชวงความเขมขนทสามารถทดส อบไดอยางถกตองและแมนยำ • Linearity ความสมพนธระหวางคาทอ านไดกบความเขมขนในชวงทกำห นด 39
Range • ทดสอบ reagent blank 1 ซำ • ทดสอบ fortified sample blank 6 ความเขมขน ๆ ละ 1 ซำ • เขยนกราฟระหวางความเขมขน X) กบคาทอานได (แกน Y) • correlation coefficient (r) 0. 995 40
Range คาทอานได x x x 1 2 x 3 4 5 6 7 ความเขมขน 41
แบบฝกหด ความเขม Fluores ขน cence ทเตม ( inten ug/g) sity Reagent blank 1 0 8 1 15 2 18 3 25 5 39 10 66 25 149 50 297 100 583 Range ทดสอบ reagent blank, sample blank และ fortified sample blanks ทความเขมขนตา งๆ ความเขมขนละ 1 ซำ ผลเปนดงตาราง ใหตรวจสอบชวงความ เขมขนทเปนเส นตรง 42
Linearity • ทดสอบ reagent blank 3 ซำ • ทดสอบ fortified sample blank 6 ความเขมขน ๆ ละ 3 ซำ (ภายในชวง range) • เขยนกราฟระหวางความเขมขน X) กบคาทอานได (แกน Y) (แกน 43
Linearity คาทอานได x x x 1 2 3 x x x 4 5 6 7 ความเขมขน 44
แบบฝกหด Linearity ความเขม Fluorescence intensity ขน ซำท ทเตม ( ซำท 1 2 3 ug/g) Reagent blank 0 1 1 0 9 7 8 1 13 14 15 2 19 19 18 3 25 25 25 5 40 38 39 10 64 65 66 25 147 148 149 50 293 289 297 ทดสอบ reagent blank, sample blank และ fortified sample blanks ทความเข มขนตา 45 งๆ
Outlier • คาทแตกตางจากคาอนๆ ในกลมขอมล • ทดสอบโดยใช Grubb’s test Tn = ( Xn – X ) / SD โดยท Xn = คาทสงสย X = คาเฉลยของกลมขอมล SD = 46
ตวอยาง Outlier ผลการทดสอบ ฮสตา มน 11 ซำ เปนดงน 35, 34, 37, 42, 31, 36, 34, 37, 36, 35 และ 34 ppm จงหาวามคาใดเปน outlier คาเฉลย = 35. 5 ppm SD = 2. 7 หรอไม Tc ท 11 ซำ = 2. 23 ppm คาสงสย = 31 และ 42 ppm Tn = ( 31 – 35. 5 ) / 2. 7 = 1. 66 ดงนน 31 ไมเปน outlier Tn = ( 42 – 35. 5 ) / 2. 7 = 2. 36 ดงนน 42 เปน outlier 47
Relationship between accuracy an Inaccurate imprecise Inaccurate precise Accurate imprecise Accurate Precise 48
Accuracy / Trueness • การแสดงความใกลเคยงกนระหวางคาเ ฉลยของผลการทดสอบทได (X) กบคาอางอง ( ) ของตวอยางนน • ทง X และ เปนคาเฉลยของกลมขอมล • เปนคาเฉลยของกลมขอมลใหญ แตกตางกนท (ประชากร) เชน ทดสอบ 50 ซำ • X เปนคาเฉลยของกลมขอมลเลก (ตวอยาง ) เชน ทดสอบ 10 ซำ 49
Accuracy / Trueness x x 2 x x 1 3 x 4 x 5 xi 6 N = 50 = (x 1 + x 2 + … + x 50) / 50 n = 10 X = (x 1 + x 2 + … + x 10) / 10 50
Accuracy / Trueness • ทดสอบ CRM 10 ซำ คำนวณคาเฉลยได = X 1 • ทดสอบ reagent blank 10 ซำ คำนวณคาเฉลยได = X 2 • คาเฉลยของ CRM ททดสอบได X 3 ) = X 1 – X 2 • ประเมน accuracy ได 2 วธ ไดแก ( 51
Accuracy / Trueness • ใชคา 100 / % recovery = ( X 3 ) x ความเขมขน % recovery 1 g/kg 50 -120 >1 g/kg 0. 01 mg/kg 60 -120 52
Accuracy / Trueness • ใชคา t - test t = ( X 3 - ) / ( SD / n 1/2 ) ; df = n - 1 • ประเมนวาผลการทดสอบไมแตกตา งจากคาอางอง ) ม accuracy ) เมอ t < tc 53
ตวอยาง Accuracy / Trueness CRM ของการทดสอบแคดเมยมมคาระบใน certificate เทากบ 1. 5 g /g เมอไดทดสอบดวยวธของหองปฏบ ตการจำนวน 10 ซำ พบวา มคาเฉลยของแคดเมยมเทากบ g /g และ SD เทากบ 0. 35 g /g 1. 0 54
ตวอยาง Accuracy / Trueness % recovery = ( 1. 0 – 0 ) x 100 / 1. 5 = 67 % เกณฑการยอมรบทความเขมขน 1. 5 ppm = 80 – 110 % แสดงวา ( 1. 0 – 1. 5 ) / ( 0. 35 / 101/2 ) = t = accuracy ไมด 4. 52 ; df = 10 – 1 = 9 คา tc ท 95% = 2. 26 นนคอ t > tc แสดงวา accuracy ไมด 55
แบบฝกหด ซ ความเขมขน ำ Reagent ท blank (ug/g) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 0 0 Accuracy / trueness ความเขมขน CRM (ug/g) 1. 023 1. 057 1. 028 1. 126 0. 990 0. 984 1. 011 1. 050 1. 066 1. 029 ทดสอบ reagent blank และ CRM อยางละ 11 ซำ ผลเปนดง ตาราง ใหตรวจสอ บ outlier 56
Accuracy / Recovery • ทดสอบ sample blank 10 ซำ คำนวณคาเฉลยได = X 1 • ทดสอบ fortified sample blank ทความเขมขนอยางนอย 3 ความเขมขน ๆ ละ 10 ซำ • ประเมน accuracy โดยใชคา % recovery = ( conc. FS – X 1 ) x 100 / คาท fortify 57
แบบฝกหด Accuracy / Recovery ทดสอบ ความเขมขน ซ ำ ความเขมขน fortified ท sample blank (ug/g) 1 1. 3 45. 7 2 1. 3 44. 5 3 1. 3 45. 6 4 1. 5 45. 1 5 1. 4 46. 1 6 1. 5 45. 8 7 1. 1 45. 1 8 1. 3 44. 5 9 1. 6 45. 2 10 1. 5 44. 6 sample blank และ fortified sample blank ทความเข มขน 50 ppm อยางละ 11 ซำ 58
Precision • การแสดงความใกลเคยงกนระหวางข อมลทไดจากการทดสอบซำ • ม 2 ประเภท ไดแก - Repeatability - Reproducibility 59
Repeatability - เปน precision ของผลการทดสอบทไดจากการทำซำโ ดยหองปฏบตการเดยวกน ผทดสอบคนเดยวกน เครองมอเดยวกน ภายในระยะเวลาทใกลเคยงกน - ซำในสภาพทเหมอนกน 60
Reproducibility - เปน precision ของผลการทดสอบทไดจากการทำซำโ ดยหองปฏบตการ หรอผทดสอบ หรอเครองมอ หรอระยะเวลาทแตกตางกน - ซำในสภาพทตางกน 61
Precision • การหา precision ทำเชนเดยวกบการหา 1. ทดสอบ reagent blank และaccuracy CRM นนคอsample อยางละไมนอยกวา blank ซำ fortified 10 และ 2. ทดสอบ sample blank อยางนอย 3 ความเขมขน ๆ ละไมนอยกวา 10 ซำ • ประเมน precision โดยใช HORRAT 62
HORRAT (Horwitz’s ratio) = %RSD / predicted RSD %RSD = RSD : Predicted ( SD / X ) x 100 repeatability : - PRSD = 0. 66 x 2 (1 - 0. 5 log C) reproducibility 0. 5 log C) : - PRSD = 2 (1 - C = concentration ratio เชน 10 ppm = 10 x 10 -6 = 105 10% = 10 x 10 -2 = 0. 1 63
ตวอยาง Precision CRM ของการทดสอบแคดเมยมมคาระบใน certificate เทากบ 1. 5 g /g เมอไดทดสอบดวยวธของหองปฏบ ตการจำนวน 10 ซำ พบวา มคาเฉลยของแคดเมยมเทากบ g /g และ SD เทากบ 0. 35 g /g 1. 0 64
ตวอยาง Precision C = concentration ratio X = 1. 0 ppm = 1. 0 x 10 -6 = 0. 000001 Predicted Horwitz RSD : repeatability): - PRSD = 0. 66 x 2 ( 1 - 0. 5 log 0. 000001 = 10. 56 %RSD = ( 0. 35 / 1. 0 ) x 100 = 35 HORRAT (Horwitz’s ratio) = 35 / 10. 56 = 3. 31 precision ไมด 65
แบบฝกหด Precision ความเขมขน ซ ำ ความเขมขน fortified ท sample blank (ug/g) 1 1. 3 45. 7 2 1. 3 44. 5 3 1. 3 45. 6 4 1. 5 45. 1 5 1. 4 46. 1 6 1. 5 45. 8 7 1. 1 45. 1 8 1. 3 44. 5 9 1. 6 45. 2 10 1. 5 44. 6 ทดสอบ sample blank และ fortified sample blank ทความเข มขน 50 ppm อยางละ 11 ซำ 66
LOD และ LOQ Limit of Detection ( LOD ) ความเขมขนตำสดทวธทด สอบนนๆ สามารถตรวจพบได Limit of Quantitation ( LOQ ) ความเขมขนตำสดทวธทด สอบนนๆ สามารถทดสอบและรายงานผลได โดยม accuracy และ precision 67
68
LOD สำหรบการวเคราะหเชงปรมาณ สามารถทำได 3 blank ไดแก วธ 1. กรณ sample มคา - ทดสอบ reagent blank คำนวณคาความเขมขนเฉลย ≥ 10 ซำ ( X 1 ) - ทดสอบ sample blank ≥ 10 ซำ คำนวณคาความเขมขนเฉลย ( X 2 ) - LOD = ( X 2 – X 1 ) + 3 SD 69
LOD 2. กรณ sample blank ไมมคา - ทดสอบ fortified sample blank ทความเขมขนนอยๆ ≥ 10 ซำ - LOD = 3 SD 70
LOD 3. ใช fortified sample blank 3 ความเขมขน - ทดสอบ fortified sample blank ทระดบความเขมขนภายใน range 3 ความเขมขน ๆ ละ ≥ 10 ซำ - คำนวณ SD ของแตละความเขมขน - เขยนกราฟระหวางความเขมขน (แกน X) กบ SD (แกน Y) 71
LOD SD LOD = 3 So x x x So 1 2 3 4 5 6 7 ความเขมขน 72
LOD สำหรบการวเคราะหเชงคณภาพ สามารถทำไดดงนfortified sample blank - ทดสอบ ทระดบความเขมขนตางๆ ระดบละ 10 ซำ - ตรวจสอบผลpositive และผล negative - LOD = ความเขมขนตำสดทใหผล 73
LOD ความเขมขน ผลทดสอบ ( ppm ) negative 200 0 100 0 75 LOD = 100 5 positive : 10 : 5 : 74
แบบฝกหด LOD ซ ความเขมขน ำ reagent ท blank (ug/g) ความเขมขน sample blank (ug/g) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1. 3 1. 5 1. 4 1. 5 1. 1 1. 3 1. 6 1. 5 5. 7 4. 5 5. 6 5. 1 6. 1 5. 8 5. 1 4. 5 5. 2 4. 6 ทดสอบ reagent blank และ sample blank อยางละ 11 ซำ ผลเปนดง ตาราง ใหหา LOD 75
Predicted LOQ สามารถทำได 2 วธ ไดแก 1. กรณ sample blank มคา - ทดสอบ reagent blank คำนวณคาความเขมขนเฉลย ≥ 10 ซำ ( X 1 ) - ทดสอบ sample blank ≥ 10 ซำ คำนวณคาความเขมขนเฉลย ( X 2 ) 10 SD - Predicted LOQ = ( X 2 – X 1 ) + 76
Predicted LOQ 2. กรณ sample blank ไมมคา - ทดสอบ fortified sample blank ทความเขมขนนอยๆ ≥ 10 ซำ - Predicted LOQ = 10 SD 77
LOQ - ทดสอบ sample blank ≥ 10 ซำ - ทดสอบ fortified sample blank ทมความเขมขนเทากบ Predicted LOQ ≥ 10 ซำ - ตรวจสอบ outlier, accuracy และ precision ของ fortified sample blank 78
LOQ Accuracy Precision P-LOQ x ----------------Accuracy Precision LOQ P-LOQ x 79
แบบฝกหด Predicted LOQ ซ ความเขมขน ำ reagent ท blank (ug/g) ความเขมขน sample blank (ug/g) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1. 3 1. 5 1. 4 1. 5 1. 1 1. 3 1. 6 1. 5 5. 7 4. 5 5. 6 5. 1 6. 1 5. 8 5. 1 4. 5 5. 2 4. 6 ทดสอบ reagent blank และ sample blank อยางละ 11 ซำ ผลเปนดง ตาราง ใหหา 80
แบบฝกหด LOQ ความเขมขน ซ ำ ความเขมขน fortified ท sample blank (ug/g) 1 5. 7 14. 5 2 4. 5 15. 8 3 5. 6 16. 1 4 5. 1 15. 3 5 6. 1 14. 0 6 5. 8 16. 0 7 5. 1 14. 1 8 4. 5 14. 0 9 5. 2 15. 7 10 4. 6 16. 3 ทดสอบ sample blank และ fortified sample blank ทความเข มขน 10 ppm อยางละ 11 ซำ 81
Specificity / Selectivity • ทดสอบโดย - เตมสารรบกวนลงในตวอยาง - นำไปวเคราะห ตรวจสอบวาสารรบกวนเหลานนทำให ผลการทดสอบแตกตางไปจากเดมหรอไ ม 82
Specificity • ความสามารถของวธทดสอบทจะตรวจ วดไดเฉพาะสงทตองการ Selectivity • ความสามารถของวธทดสอบทสามารถ แยกสงทตองการออกจากสงเจอป นอน 83
Specificity Selectivity 84
Robustn ess เปนคณสมบตทแสดงวาว ธทดสอบมความคงทนตอการเปลยนแป ลงสภาวะของการทดสอบเชน อณหภม p. H เวลาทใช เปนตน Rugged ness เปนคณสมบต reproducibility ของการทดสอบ ภายใตสภาวะการทดสอบปกต เชน เปลยนผทดสอบ 85
Robustness / Ruggedness - ทดสอบตวอยาง ( CRM ) โดยเปลยนแปลงปจจยครงละ 1 ปจจย เชน - ประเมนจาก accuracy และ เปลยนระยะเวลาทใชในการทำปฏก precision รยา 86
รปแบบรายงานการทำ • วตถประสงค • ขอบขาย • เอกสารอางอง • Performance characteristic • Tool • วธการทางสถต • ขอมล • วเคราะหขอมล • สรป method v 87
Скачать презентацию METHOD VALIDATION ตรวจสอบความใชไดของวธทดสอ 1 ความห มาย
35255e0098aefcbb2727a7934cc67354.ppt