Масс-спектрометрия к. б. н. Павел Семенюк отдел физических методов измерений НИИ ФХБ им. А. Н. Белозерского МГУ
2 Принцип метода Ионизируем молекулы, переводим ионы в газовую фазу и делим их по отношению m/z
3 Разрешение
4 Разрешение
5 Из истории 1912 – 1920 – первые масс-спектрографы Джозеф Томсон Фрэнсис Астон Артур Демпстер Джозеф Джон Томсон Вольфганг Пауль Ханс Демельт квадрупольный масс-анализатор и ионные ловушки Джон Фенн электроспрей Коити Танака мягкая лазерная десорбция
6 Принцип метода Ионизируем молекулы, переводим ионы в газовую фазу и делим их по отношению m/z
7 Способы ионизации твердая фаза газ ESI Нано. Электроспрей Nano. ESI Nano Electrospray Ionization Химическая ионизация при атмосферном давлении APCI Atmospheric Pressure Chemical Ionization Фотоионизация при атмосферном давлении жидкость Электроспрей Electrospray Ionization APPI Atmospheric Pressure Photo Ionization Матрично-активированная лазерная MALDI десорбция/ионизация Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Бомбардировка быстрыми атомами FAB Fast Atom/Ion Bombardment МС вторичных ионов SIMS Secondary ion mass spectrometry Электронная ионизация EI Electron ionization Химическая ионизация CI Chemical ionization
8 Способы ионизации Электронная Химическая Используется для ионизации небольших частиц
9 Электроспрей Размер ионов – до 70 -100 к. Да
10 Электроспрей
11 Десорбция
12 MALDI Матрично-активированная лазерная десорбция/ионизация 2, 5 -дигидроксибензойная кислота синапиновая кислота Размер ионов – до 1000 к. Да феруловая кислота
13 Масс-анализоторы Магнитный секторный SI Sector Instrument Квадрупольный QMS Quadrupole Mass Analyzer Времяпролетный TOF Time Of Flight Q-TOF Quadrupole TOF Квадрупольный времяпролетный Ионная ловушка: Квадрупольная ионная ловушка Ion Trap Paul Trap QIT Quadrupole ion trap Орбитальная ионная ловушка Ион-циклотронного резонанса с преобразованием Фурье Orbitrap FTMS Fourier Transform Mass Spectrometry
Электромагнитный секторный масс-анализатор 14
Электромагнитный секторный масс-анализатор 15
Электромагнитный секторный масс-анализатор 16
Электромагнитный секторный масс-анализатор 17
18 Квадрупольный масс-анализатор
19 Времяпролетный масс-анализатор
20 r. TOF
21 MALDI-TOF MALDI – Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization TOF – Time of Flight § мягкая ионизация § большие массы § легко интерпретировать, заряд ± 1 § высокая чувствительность § быстро
Ионные ловушки Квадрупольная: Линейная – Paul Trap Вольфганг Пауль, Ноблевская премия 1989 3 D – Quadrupole ion trap, QIT 22
Ионные ловушки Квадрупольная: Траектория иона 23
24 Ионные ловушки Ион-циклотронного резонанса с Фурье-преобразованием – Fourier transform ion cyclotron resonance MS, FT-ICR MS Позволяет разделить частицы с разницей масс до 2 ppm сульфатирование: ΔM = 79. 9568 Да фосфарилирование: ΔM = 79. 9663 Да
25 Ионные ловушки Орбитальная – Orbitrap
26 Ионные ловушки Ig. G 1 pmol March, R. E. International Journal of Mass Spectrometry 2000, 285– 312.
27 Тандемная масс-спектрометрия MS/MS, MS 2 Тройной квадрупольный масс-анализатор
28 Тандемная масс-спектрометрия Фрагментация пептидов:
29 Тандемная масс-спектрометрия Q/TOF TOF/TOF Orbitrap etc.
30 HPLC-MS Хроматография + МС Seibert, C. ; Sakmar, T. P. Peptide Science 2008, 90, 459– 477.
31 HPLC-MS
32 HPLC-MS Fonslow, B. R. et al. Worm. Book 2014, 1– 18.
33 Количественный анализ Ускорительный масс-спектрометр (AMS) Accelerator mass spectrometer Радиоуглеродный анализ 14 С 13 С
34 Macek, B. ; Mann, M. ; Olsen, J. V. Annual Review of Pharmacology and Toxicology 2009, 49, 199– 221.
35
36 Количественный анализ Walther, T. C. ; Mann, M. J Cell Biol 2010, 190, 491– 500.
37 Принцип метода Ионизируем молекулы, переводим ионы в газовую фазу и делим их по отношению m/z
Скачать презентацию Масс-спектрометрия к б н Павел Семенюк отдел физических
Масс-спектрометрия.ppt