10_lektsia_KM.ppt
- Количество слайдов: 30
ЛЕКЦИЯ • Тема: • • КЛИНИЧЕСКАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ проф. Акышбаева К. С.
Клиническая микробиология- этиология, патогенез и иммунитет инфекционных заболеваний в неинфекционной клинике - методы их лабораторной диагностики, специфической терапии и профилактики
• Объекты исследования КМ: • УПМ (патог. Д проявляется в особых условиях • Оппортунистические инфекции. • Задачи и методы КМ = мед. микробиологии. • Их специфичность вытекает их того, что возбудители рассматриваемых заболеваний, как правило, нормальные обитатели тела человека, которые обычно находятся с ним симбиотических, а не в конкурентных взаимоотношениях.
• КМ изучает заболевания, встречающиеся по существу во всех клинических специальностях (терапия, хирургия, акушерство, гинекология, педиатрия, травматология, ортопедия, нефрология, кожные болезни, отоларингология и др). • Кроме того: - ятрогенные инфекции ( заражение при получении мед. помощи) - НМФ, ДБ - АБ- чувствительность, к антиспетикам и дезинфектантам - методы клинико-микробиологических исследований.
Врачам всех специальностей постоянно приходится сталкиваться с патологией, вызванной различными микроорганизмами и каждый раз решать ряд стереотипных задач: • -оценить природу возможного возбудителя болезни • -определить, какой материал надо взять на исследование и как правильно это сделать • -корректно оценить результаты лабораторного исследования • -выбрать адекватную терапию до получения результатов лабораторного исследования и скорректировать ее сообразно с ними.
Микробиологические исследования МНОГОСТУПЕНЧАТЫЙ ПРОЦЕСС, ВКЛЮЧАЮЩИЙ: • - ПЕРВИЧНЫЙ ПОСЕВ на ПС для выделения возбудителя и получения ЧК • -ДИФФЕРЕНЦИАЦИЮ И ИДЕНТИФИКАЦИЮ выделенных культур • -определение ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ их к антибактериальным препаратам • -ЗАБОР ПРОБ клинического материала и транспортировку его в лабораторию
РЕЗУЛЬТАТЫ диагностических исследований в значительной степени зависят от: -ВИДА ПАТ. МАТЕРИАЛА - ВРЕМЕНИ И СПОСОБА ЕГО ВЗЯТИЯ.
ОСНОВНЫЕ ПРАВИЛА ВЗЯТИЯ ЛЮБОГО МАТЕРИАЛА НА ИССЛЕДОВАНИЕ: • -Материал собирают в КОЛИЧЕСТВЕ, достаточном для тщательного исследования • -Материал должен СООТВЕТСТВОВАТЬ ХАРАКТЕРУ ИНФЕКЦИОННОГО ПРОЦЕССА (учитывают особенности инфекционного процесса, место максимальной локализации возбудителя и пути его выделения в окружающую среду) • -При заборе материала использовать ТОЛЬКО СТЕРИЛЬНЫЕ ИНСТРУМЕНТЫ И ПОСУДУ, соблюдая правила асептики для предупреждения загрязнения
• -Собранный материал доставляют в лабораторию в МАКСИМАЛЬНО СЖАТЫЕ СРОКИ (1 -2 часа). При невозможности - в холодильнике, кроме крови и материала, исследуемого на наличие менингококка, которые необходимо хранить при температуре 35 -37 о. С. - целесообразно пользоваться транспортными средами (Стюарта, Амиеса и пр. ) -материал для исследования собирают ДО НАЧАЛА АБ-ТЕРАПИИ -микроорганизмы ЧУВСТВИТЕЛЬНЫ К ФАКТОРАМ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ, в связи с эти надо обращаться с собранным материалом, так, чтобы максимально сохранить жизнеспособность возбудителей.
• -При направлении на исследование обязательно писать СОПРОВОДИТЕЛЬНЫЙ ЛИСТ в котором указываются: - Ф. И. О. , возраст, отделение, - предварительный диагноз - вид материала - дата и время взятия материала.
НАИБОЛЕЕ ПРАВИЛЬНЫЙ СПОСОБ ВЗЯТИЯ • жидких материалов - объемно с помощью стерильного шприца. Отбор тампоном производят только при невозможности осуществления объемного метода (отделяемое женских половых органов, ушей, глаз и т. д ) • -При аспирации закрытых полостей кожу в месте прокола дезинфицируют антисептиками в течении 1 -2 мин. • -Свищи и фистулы первоначально очищают от отделяемого и забор материал производят из глубины. • -Жидкий материал из открытых ран при хирургических вмешательствах отбирают объемно шприцем • -Отделяемое из дренажей также берут шприцем и используют концы удаленных дренажных трубок. • -Биоптаты из ран - путем иссечения участка ткани из глубоких слоев раны и производят забор отделяемого тампоном после тщательной обработки раны физ. раствором и 70 этиловым спиртом для удаления поверхностно вегетирующей микрофлоры, а также антисептических и антибактериальных препаратов.
КРОВЬ. • Выявление бактерий в крови -один из наиболее ответственных и трудных микробиологических исследований. • ОСНОВНЫЕ ПОКАЗАНИЯ : - ЛИХОРАДКА (38 о. С и выше), ГИПОТЕРМИЯ ( 36 о. С и ниже), ЛЕЙКОЦИТОЗ (особенно со сдвигом влево) и ГРАНУЛОЦИТОПАТИЯ. • -Кровь на исследование отбирают на высоте температуры и озноба шприцем из вены после тщательной дезинфекции кожи (спиртом и антисептиком) над спиртовкой. и посев делают у постели больного • ЗАЧАСТУЮ ЛИХОРАДКУ ОПОСРЕДУЮТ НЕ САМИ БАКТЕРИИ, А ПРОДУКТЫ ИХ РАСПАДА, например ЭНДОТОКСИНЫ), поэтому у лихорадящих больных рекомендуется брать до или в начале озноба, что повышает частоту выделения возбудителя.
• Для анализа - только венозную кровь 12 -15 мл (20 -30 мл) - 5 -10 мл ( не меняя иглы) - в 50 -100 мл богатой питательной среды в соотношении 1: 10; - посев делают в 2 сосуда –один для исследования на аэробы, другой на анаэробы. - 1 -2 мл вносят в пробирку с 1, 0 мл цитрата натрия. Кровь (при сепсисе) необходимо брать 2 -3 раза в течении 5 -10 часов. • Гемокультуры - инкубируют 35 -37 о. С 7 дней ежедневно осматривают. - помутнение среды- на рост бактерий - при отсутствии роста- повторное исследование на 14 день. При выделении бактероидов исследование продолжают в течении 2 -3 недель.
• После 2 недель исследования гемокультуру признают (-) при отсутствии роста даже при подозрении на наличие бактерий. • При выделении бактерий следует немедленно назначить курс АБ-терапии, невзирая на выраженность клинических проявлений. • У детей - 1 -5 мл • Образцы крови НЕЛЬЗЯ ЗАМОРАЖИВАТЬ.
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ: • -У ЗДОРОВЫХ людей правильно взятая кровь ВСЕГДА СТЕРИЛЬНА. • - Представители НМФ могут периодически попадать в кровяное русло, но они быстро удаляются защитной системой. • Если из крови выделены микроорганизмы, необходимо ДИФФЕРЕНЦИРОВАТЬ ИСТИННО ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ от ошибок, связанных с загрязнением образцов. В пользу (+)результатов: • - повторное выделение одних и тех же микроорганизмов • - обильный рост одних и тех же микроорганизмов при проведении количественных исследований • - выявление патогенных микроорганизмов, как правило отсутствующих среди представителей НМФ.
МОЧА: • - при наличии признаков инфекции МВП - у больных с подозрением на системные инфекции - при лихорадках неясного генеза. Для исследования: - «среднюю» порцию утренней мочи при естественном мочеиспускании после тщательного туалета наружных половых органов. 5 -10 мл. Утренняя моча обычно задерживается в течение нескольких часов в мочевом пузыре, что способствует увеличению микробного числа. - из правой или левой почек и мочеточников (0, 5 -1, 0 мл) - катетером при проведении цистоскопии.
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ: • - Моча в неинфицированных почках и мочевом пузыре обычно стерильна. • - В уретре присутствует НМФ, поэтому при выходе из уретры может содержаться небольшое количество бактерий. Дифференцирование инфекционного процесса от контаминации (представителями нормальной микрофлоры) проводят с учетом ряда факторов.
Обнаружение в 1 мл/ > 105 бактерий свидетельствует об активном инфекционном процессе в МВС и подтверждает диагноз с вероятностью 95%. Наличие в 1 мл / < 103 бактерий- загрязнение мочи или попадание в нее представителей НМФ (повторное обследование). Обнаружение одного и того же вида бактерий в данном количестве может указывать на хроническую персистирующую инфекцию. Обнаружение 104 -105 /1 мл мочи - требует повторного исследования. • Наличие такого же количества микробов в новой пробе свидетельствует об инфекционном процессе.
Определить локализацию инфекции (в мочевом пузыре или почках) можно: - после опорожнения мочевого пузыря катетером и промывания его раствором антибиотика. Пробы мочи берут 3 раза с интервалом в 10 минут. Процесс локализован в почках (почечных лоханках) - во всех 3 пробах бактерии (+), причем их количество будет возрастать. При локализации в мочевом пузыре - моча остается стерильной.
СМЖ: • Шприцем при люмбальной пункции после тщательной дезинфекции кожи и немедленно доставляют В ТЕПЛОМ ВИДЕ в лабораторию. • 2 -3 стерильные пробирки по 2 -5 мл в каждую. • Такое количество материала позволяет провести необходимые исследования.
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ: • У здоровых людей: -БАКТЕРИЙ НЕТ - ЛФ 0 -5, белок 100 -450 мг/л; глюкоза 0, 28 -0, 47 ммоль/л. Если СМЖ мутная мазки готовят из нее Если СМЖ прозрачная- мазки готовят из осадка • Острый гнойный менингит (бактериальный)N. meningitides, Str. pneumonia, Streptococcus spp. , Haemophilus influenzae, • Staphylococcus spp. , Enterobacteriaceae • Вирусный менингоэнцефалит ( «асептический» )арена-, кокс-, эхо-, полио-, арбо- вирусы.
Материал из дыхательных путей: Из ВДП - тампоном из каждой миндалины, а затем с задней стенки глотки. На менингококк - изогнутым тампоном - из носоглотки - Ангина и при подозрении на дифтерию только с миндалин. Материал со слизистой носа - ватным тампоном из носовых ходов • Материал забирают натощак до чистки зубов и ополаскивания рта, носа и глотки.
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ: • В состав НМФ глотки входят разнообразные микробы и поэтому для определения этиологии заболевания необходимо выявить МАССИВНЫЙ РОСТ ПАТОГЕННЫХ ВИДОВ БАКТЕРИЙ. Незначительное ко-во - транзиторное носительство. • МОКРОТУ - утром после туалета полости рта в стерильную банку. Мокрота должна происходит из нижних отделов; нет необходимости в принуждении больного, если у него в данный момент она не отходит ( для облегчения можно предварительно провести ингаляцию горячего 0, 9% раствора Na. Cl. • При необходимости берут при бронхоскопии. • При оценке результатов необходимо учитывать , что только несомненное преобладание каких-либо бактерий в материале или одновременное выделение одних и тех же микроорганизмов из мокроты и крови могут достоверно подтверждать их роль в развитии патологического процесса.
МАТЕРИАЛ ИЗ АБСЦЕССОВ -ГНОЙ. • ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ: • Чаще выявляются возбудители одного вида, которые и являются возбудителями заболевания. • Если самопроизвольно вскрылся абсцесс, то за возбудителей могут быть приняты представители НМФ
ЖКТ РОТОВАЯ ПОЛОСТЬ: • -со слизистой оболочки щек, десен, языка, выходных отверстий протоков слюнных желез - ватным тампоном (оставить марлевый тампон- скудное отделяемое) • - зубнодесневых карманов - бак. петлей • -зубного канала - спец. стом. зондов, обернутых стерильной ватой, либо ватных или бумажных фитильков ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ: -частой причиной являются представители НМФ (увеличение их количества по сравнению с нормой)
ЖЕЛУДОК: • Микробиологическое исследование - редко, т. к. в нем микробы чаще отсутствуют и их количество не превышает 103 - 104 КОЕ/мл. Промывные воды исследуют немедленно. Или вносят 10% бикорбанат натрия, замораживают. Промывные воды центрифугируют - анализ осадка аналогично исследованиям мокроты.
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ: • -ПОВЫШЕНИЕ КОЛИЧЕСТВА бактерий в желудке является показателем СНИЖЕНИЯ УРОВНЯ СВОБОДНОЙ СОЛЯНОЙ КИСЛОТЫ • -Обнаружение бактерий рода Helicobacter, Campylobacter может указывать на ЯБЖ и гастрит.
ТОНКИЙ И ТОЛСТЫЙ КИШЕЧНИК: Фекалии из нескольких мест стеклянной, деревянной или металлической палочкой в стеклянный сосуд (можно гнойные , слизистые и кровавые включения). Из прямой кишки - тампоном, стеклянной палочкой или трубочкой с боковым отверстием При ректороманоскопии ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ: • - обнаружение патогенных М. • -исследования на дисбактериоз
ЖЕЛЧЬ. Забор желчи при зондировании (три порции-А, В, С). Колонизация желчных камней сальмонеллами тифо - паратифозной группы обуславливает стойкое носительство и требует немедленного удаления конкрементов (желчь- наиболее благоприятная среда для сальмонелл).
Исследования на вирусы. Соблюдая правила асептики, даже если материал сам по себе не является стерильным (фекалии) Многие вирусы во внешней среде очень нестойки, поэтому пробы нужно сохранять ВЛАЖНЫМИ НА ХОЛОДУ, НО НЕ ЗАМОРАЖИВАТЬ (ОРЗ) С целью сохранения жизнеспособности вирусов такие пробы, как мазки из носоглотки и соскобы кожных поражений, погружают в стабилизирующую среду.
10_lektsia_KM.ppt