2077_1295771224_lektsiya_10.ppt
- Количество слайдов: 16
Лекція № 10 ТЕМА: РЕКОМБІНАЦІЯ План: 1. Загальна рекомбінація 2. Сайт-специфічна рекомбінація
Реплікація Репарація Рекомбінація
Рекомбинация • Рекомбінація - процес обміну генетичним матеріалом шляхом розриву і з'єднання різних молекул ДНК.
Рекомбінація Нерекомбінантні гетеродуплекси
Рекомбінація Генетичний обмін із кросинговером
Реакція, яка каталізується білком rec. BCD Білок Rec. BCD Приєднання до подвійної спіралі і наступне переміщення Сайт Рухаюча петля одноланцюгової ДНК пізнавання В сайті пізнавання виникає розрив Виникає одноланцюговий “вус”
Розрив + Вивільнен ня одного з ланцюгів Початковий одноланцюговий обмін між двома гомологічними подвійними спіралями ДНК в процесі загальної рекомбінації Обмін між ланцю гами
Білок rec. A дає можливість одиночним ланцюгам ДНК спарюватися з гомологічними ділянками подвійної спіралі ДНК Одиночний ланцюг ДНК, який несе білок rec. A Подвійна спіраль ДНК Комплекс із неспареними основами Комплекс із спареними основами, але без закручування ланцюгів (нестабільний) Комплекс із повним спарюванням + Етап 1 Етап 2 Етап 3
Білок rec. A
Обмін з перехрещуванням ланцюгів Дві гомологічні спіралі ДНК Розрив ланцюга та обмін Зшивання розірваних ланцюгів Рівноцінні структури Структура з перехрещеними ланцюгами
Рекомбінація відбувається в результаті фізичного розриву в хромосомах (М) і (F) та їх наступного з’єднання з утворенням двох нових хромосом (C 1 і C 2)
Гомологічні дуплекси Одноланцюгові розриви в кожному дуплексі Інвазія ланцюгів лігірування Структура Холідея Міграція ланцюга Структура Холідея Два можливі результати Обмін генів: без кросинговеру та з кросинговером
Генетичний обмін з кросинговером Ця частина залишається без змін Ця частина залишаєть ся без змін В цій площині відбувається поворот на 180 градусів
Ізомеризація структури з перехрещеними ланцюгами
Геном бактеріофага λ Специфічні послідовності , які вищначають місце інтеграції Інтегразний білковий комплекс каталізує координований дволанцюговий розрив і приєднання Інтегразний білок ДНК бактеріофага λ, що включився у хромосомну ДНК Сайт-специфічна рекомбінація, за допомогою якої ДНК бактеріофага λ впроваджується в хромосому клітини-хазяїна (Е. соli)
Хромосома мобільного генетичного елементу Хромосома мішень Два механізми, які використову ються різними класами ферментів сайтспецифічної рекомбінації Білковий комплекс, що каталізує дволанцюгов ий розрив і з’єднання ланцюгів Рівний розрив Ступінчастий розрив в хромосомі мішені Проміжна форма ДНК мобільного елементу, що включився в хромосомумішень А. Гомологія на невеликій ділянці необхідна Синтез ДНК для заповнення бреші Короткі повторюючі послідовності ДНК в хромосомі-мішені Б. Гомологія не потрібна
2077_1295771224_lektsiya_10.ppt