Лекарственная устойчивость возбудителя туберкулеза в Кемеровской области и новые возможности ее определения Drug resistance of M. tuberculosis in the Kemerovo region and new opportunities for determining Пьянзова Татьяна Владимировна Кафедра фтизиатрии Кемеровской государственной медицинской академии Кемерово 2013
• «Мир на пороге кризиса, вызванного устойчивостью микроорганизмов к антибиотикам. Человечество имеет дело с таким уровнем антибиотикорезистентности, что эта ситуация может означать конец медицины в привычном понимании. Мы вступаем в постантибактериальную эпоху» WHO, Dr. Margaret Chan, 2012 Комплексный План действий по профилактике и борьбе с МЛУ/ШЛУ-ТБ Цель: Сдержать распространение ЛУ туберкулеза путем достижения всеобщего доступа к профилактике, диагностике и лечению МЛУ/ШЛУ-ТБ во всех государствахчленах Европейского региона ВОЗ к 2015 г.
Цель исследования: Изучить состояние проблемы лекарственной устойчивости М. tuberculosis в Кемеровской области и возможности улучшения диагностики МЛУ
Материал и методы Проведен анализ эпидемиологических показателей по ЛУ ТБ в РФ, СФО, КО. Изучены сведения о ЛУ 5904 больных ТБ органов дыхания с бактериовыделением, жителей Кемеровской области, взятых на ДУ в 20052009 гг. новые случаи (n=5178) и рецидивы (n=726). Для оценки результатов молекулярно-генетической диагностики проведено обследование 656 пациентов, выявленных в 2012. Всем пациентам проводилась люминесцентная микроскопия 3 -х образцов мокроты и посев на твердые питательные среды Левенштейна. Йенсена и Финна II ЛЧ M. tuberculosis определялась методом абсолютных концентраций В соответствии с критериями чувствительности на агаризованных питательных средах резистентными считались штаммы, растущие при следующих или больших концентрациях ПТП: R 40 мкг/мл, H 1 мкг/мл, E 8 мкг/мл, S 10 мкг/мл. Выявление ДНК M. tuberculosis в мокроте и выявление лекарственной устойчивости к R проводилось на автоматическом IV-модульном ПЦР анализаторе Gene. Xpert MTB/RIF
Заболеваемость туберкулезом 150 140 130 120 110 100 90 80 70 60 50 40 131. 1 137. 7 133. 1 114. 9 116. 9 115. 7 114. 3 68 67. 7 68. 4 67. 7 2004 2005 2006 2007 КО 127. 4 118. 1 130 115. 3 68. 9 128 66. 8 69. 6 2008 СФО 2009 РФ 116. 6 2010 117. 6 106. 3 107. 2 105. 7 64. 6 2011 61. 2 2012
Количество впервые выявленных пациентов с МЛУ и не-МЛУ штаммами (из обследованных на ЛУ) 1400 1332 1200 1309 1307 1293 1285 1272 1165 1041 1000 800 600 400 200 0 220 2005 245 2006 266 2007 263 2008 Пациенты с без МЛУ 363 2009 339 2010 Пациенты с МЛУ 326 2011 358 2012
Доля больных с MDR-TB среди контингентов пациентов с бациллярными формами туберкулеза 50 45 41. 9 40 36. 7 35 25. 8 24. 5 30. 2 25. 8 18. 7 19. 9 30 25 20 15 23. 5 18. 3 16. 5 25. 3 21. 4 36. 7 27 23. 4 30. 3 26. 4 45. 1 33. 6 30. 3 45. 7 37. 6 34. 2 46. 1 39. 9 37. 5 КО СФО РФ 10 5 0 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012
Характеристика спектра ЛУ в зависимости от классификации случая 60 56. 6 50 40 43. 6 36. 7 49. 6 47. 2 41. 1 35. 5 50. 9 34. 2 27 30 46. 5 29. 9 22. 4 22. 3 20 10 0 S H Новый случай E Ранний рецидив R Поздний рецидив • ЛЧ к S среди МЛУ-штаммов обнаружена у 54 чел. (4%) • ЛЧ к E – у 202 чел. (15%). • ЛУ к R у 1346 чел. (91, 6%) сочеталась с ЛУ к H МЛУ 28
Около 95% резистентных к рифампицину (R) штаммов M. tuberculosis содержат точечные мутации, делеции или вставки в гене rpo. B, кодирующем b субъединицу РНКполимеразы. [Telenti A. , et al. , 2003]. R-резистентные штаммы M. tuberculosis, не имеющие мутаций в указанном районе, встречаются в среднем с частотой 5% от общего числа резистентных [Kapur V. , et al. , 2004]. В 2011 году Всемирная организация здравоохранения рекомендовала использование системы Gene. Xpert MTB/RIF, поддержав ее как предпочтительный диагностический тест при подозрении на МЛУ-ТБ.
Молекулярно-генетический метод выявления ДНК микобактерии туберкулеза и ЛУ к ПТП
Технические аспекты Пробоподготовка (лаборант) – 5 мин. Деконтаминация (авт. ) – 25 мин. Выделение ДНК и амплификация(авт. ) – 90 мин. Внесение данных пациента, загрузка картриджа в анализатор, регистрация результата (врач) – 3 мин. Не требуется ПЦР-лаборатория и специально обученный персонал PAGE | 11
Характеристика результатов исследования патологического материала традиционными методами и системой Gene. Xpert MTB/RIF Xpert 3 -х кратная люминесцентная MTB/R микроскопия с окрашиванием IF флюорохромными красителями Всего + Xpert MTB/RIF Рост культуры М. Tuberculosis (3 -х кратный посев на твердые питательные среды) Всего - Абс % Абс 337 246 86, 3 91 24, 2* ДНК- 319 41 14, 3 278 75, 4* ПЦР- диагностика (Gene. Xpert MTB/RIF) позволила подтвердить диагноз ТБ у 24, 6% пациентов с отрицательной 3 -х кратной бактериоскопией - Абс % ДНК+ + % Абс % ДНК+ 337 285 77, 4 52 18, 0* ДНК- 319 83 22, 5 236 81, 9* Среди пациентов с отсутствием роста культуры с невозможностью постановки ТЛЧ у 18% при ПЦР получена ДНК МБТ и определена ЛЧ к R
МЛУ - 173 Результаты ТЛЧ 408 чел. НRSE - 146 HR - 2 HRE - 1 НRS - 24 Не-МЛУ - 7 RSE - 1 R-3 RE - 0 RS -3 ЛУ по ПЦР 111 чел. (61, 6%) ЛУ к R 180 чел. (44, 1%) ЛЧ по ПЦР 25 чел. (13, 8%) ЛЧ к R 228 чел. (55, 9%) ДНК не выделена 39 чел. (21, 6%) Чувствительность методики Gene. Xpert MTB/RIF для диагностики МЛУ МБТ - 84, 7% Специфичность методики Gene. Xpert MTB/RIF для диагностики МЛУ МБТ 90, 1% ЛУ к Н 52 чел. (12, 7%): НSЕ – 13 НS – 28 Н-9 Результаты ПЦР ЛЧ к R – 149 ЛУ к R – 14 ДНК не найдено – 14 ЛУ не определена - 6
3 мес. 2 дня 11, 6 ДНЕЙ Сроки назначения адекватной химиотерапии Бак. исследование Посев мокроты Молекур Генетич. Пациенты с МБт (+) ПТП по I, IIА режиму ПТП согласно ЛЧ Тест на ЛУ ПТП по IIб режиму ПТП согласно ЛЧ
Выводы (2) • В настоящее время на фоне стойкого снижения заболеваемости ТБ отмечается увеличение доли МЛУ -ТБ среди контингентов пациентов с бациллярными формами туберкулеза, которое происходит в КО более медленными темпами, чем в целом по СФО и РФ (за последние 2 года средний прирост составил 0, 5; 2, 3; 3, 3% соответственно) • В последние годы в КО отмечается значительное снижение заболеваемости не. МЛУ-ТБ, однако обнаружена стойкая тенденция к увеличению МЛУ среди новых случаев ТБ • Уровень МЛУ среди новых случаев составил 22, 3%, тогда как у рецидивов. Он значительно различался у «ранних» и «поздних» 46, 5%, 28, 0% соответственно
Выводы (2) • • • Использование молекулярно-генетического метода Gene. Xpert позволяет осуществлять раннее выявление МЛУ МБТ с чувствительностью 84, 7% и с 90, 1% специфичностью Средний срок перевода с эмпирической ХТ на адекватную составил 11, 6 дней. Применение ПЦР-диагностики МЛУ позволяет значительно уменьшить использование эмпирических схем химиотерапии и разделять потоки больных (МЛУ/не-МЛУ) уже на входе в стационар. У 18% больных ТБ с отсутствием роста культуры и невозможностью проведения ТЛЧ, метод позволил не только подтвердить диагноз, но и получить сведения антибиотикорезистентности Для оптимизации расходов на ПЦР-диагностику метод целесообразно в первую очередь применять у пациентов с ММ+ для выявления МЛУ Тест на резистентность к R в КО может являться маркером МЛУ, т. к. ЛУ к R в 91, 6% случаев сочеталась с ЛУ к H
Благодарю за внимание!
Скачать презентацию Лекарственная устойчивость возбудителя туберкулеза в Кемеровской области и
Пьянзова_эпидемиология.pptx