Лейкозы ВВЕДЕНИЕ В ПРОБЛЕМУ Тема

Лейкозы ВВЕДЕНИЕ В ПРОБЛЕМУ

Тема лекции 1. Введение в лейкозы 2. Острые лейкозы 3. Хронические лейкозы

Определение лейкоза Лейкоз – злокачественная опухоль системы крови, характеризующаяся неконтролируемой клональной пролиферацией одного типа незрелых кроветворных клеток. Возможно поражение любых клеточных линий или стволовой клетки, общей для нескольких линий. Делятся на 2 большие группы: Хронические – постепенное развитие симптомов, менее агрессивное течение, поражение на уровне более зрелых клеток; Острые – быстрое начало, очень агрессивное течение, недифференцированные ранние клетки - бласты.

Типы Острые и хронические лейкозы классифицируются в зависимости от клеточной линии: Если поражен миелоидный росток – это миелоидный лейкоз, если лимфоидные клетки – лимфоцитарный лейкоз Выделяют 4 основных типа лейкозов: Острый миелоидный лейкоз – ОМЛ (включая миелобластный, промиелоцитарный, моноцитарный, миеломоноцитарный, эритробластный и мегакариоцитарный) Острый лимфобластный лейкоз – ОЛЛ (включая Т и В- линейный) Хронический миелолейкоз – ХМЛ (миелолейкоз и миеломоноцитарный лейкоз) Хронический лимфолейкоз – ХЛЛ (включая пролимфоцитарный, волосатоклеточный, из больших гранулярных лимфоцитов и др. )

Этиология не известная, но идентифицирован ряд предрасполагающих факторов: «Внутренние» факторы Некоторые пациенты имеют семейную предрасположенность Ряд наследственный заболеваний (синдром Дауна и др. ), характеризующиеся хромосомной нестабильностью. Иммунодефицитные состояни (синдром Нейменгена, атаксия- телеангиоэктазия) Хроническая дисфункция костного мозга – миелопролиферативные болезни, МДС, апластическая анемия и пароксизмальная ночная гемоглобинурия. «Внешние» факторы: Ионизирующая радиация Канцерогены и некоторые лекарственные препараты Вирусные инфекции

Частота Острые лейкозы бывают в любом возрасте: ОЛЛ чаще у детей ОМЛ чаще у взрослых Хронические лейкозы – чаще у взрослых ХЛЛ– только после 40 лет ХМЛ бывает у детей, пик 30 -50 лет

Острый лейкоз – Является результатом: Малигнизации стволовой клетки, приводящей к нерегулируемой пролиферации и Блоку созревания на уровне примитивной бластной клетки. Бласт – незрелая клетка, для которой морфологически нельзя распознать к какой клеточной линии она принадлежит Клинические признаки Лейкемическая пролифераци, накопление, инвазия нормальных тканей, включая печень, селезенку, л/узлы, ЦНС, кожу (сыпь или опухоли).

Эволюция лейкоза Нарастающая недостаточность костного мозга и нарушения гемтопоэза могут приводить к панцитопении с последующей смертью от геморрагических осложнений или инфекций Лабораторная картина Два ведущих признака Значительное увеличение числа незрелых клеток в костном мозге включая бласты, промиелоциты, моноциты (>20% бластов – диагностически значимо) Идентификация клеточной линии

Эволюция лейкоза Периферическая кровь: Анемия (нормохромная, нормоцитарная) Тромбоцитопения Различное количество лейкоцитов: Три варианта вовлечения периферической крови: Лейкемическое – гиперлейкоцитоз за счет бластемии Сублейкемический – бластемия без лейкоцитоза Алейкемический – лейкопения без бластемии

Морфология лейкемических клеток, включает описание размера бластов, количество цитоплазмы, ядерного хроматина, наличия нуклеол, органел и т. п. ОМЛ – миелобласт – большая бластная клетка с умеренным количеством цитоплазмы, неплотным хроматином и различимыми нуклолами. 10 -40% миелобластов содержат палочки Ауэра.

Созревание миелоидных клеток myeloblast promyelocyte metamyelocyte band neutrophil СОЗРЕВАНИЕ Adapted and modified from U Va website

Миелобласты с палочками Ауэра

Лимфобласты ОЛЛ – в противоположность миелобластам, лимфобласт меньшего размера со скудной цитоплазмой, плотным хроматином, без палочек Ауэра

Лимфобласт

ОМЛ

ОМЛ: палочки Ауэра

ОЛЛ

Цитохимия (миелопероксидаза) Цитохимия – помогает дифференцировать линию лейкемических клеток (миелоидную против лимфоидной ) Миелопероксидаза – находится в первичных гранулах клеток гранулоцитопоэза начиная с «поздних» бластных клеток. Моноциты могут быть слабо позитивными.

Судан черный окрашивает фосфолипиды, нейтральные жиры и стеролы, находящиеся в первичных и втроичных гранулах клеток гранулоцитопоэза и в меньшей степени в лизосомах моноцитов. Лимфоидные клетка иногда могут быть позитивными.

Неспецифическая эстераза – используется для идентификации клеток моноцитоидного ряда, которые дают диффузную позитивную реакцию. T-лимфоциты могут давать фокусное окрашивание.

Кислая фосфатаза может обнаруживаться в как миелобластах, так и лимфобластах. T-лимфоциты могут иметь высокую активность кислой фосфатазой – характерный признак Т-клеткочного острого лимфобластного лейкоза.

Иммунологические маркеры (иммунофенотипирование) – используется в основном для дифференцировки клеток лимфоидной направленности, например чтобы отличить В-клетки от Т-клеток. Исследование проводится с помощью антител (меченных флуоресцентной меткой) против специфических поверхностных клеточных маркеров. С помощью проточной цитометрии определяют количество клеток, которые несут флуоресцентную метку и таким образом являются позитивными на наличие исследуемого маркера.

Цитогенетика лейкозов Цитогенетические исследования – диагностические инструмент и метод оценки прогноза гемобластозов. Многие лейкозы (и лимфомы) характеризуются специфическими хромосомными нарушениями, включая специфические транслокации и количественные нарушения числа хромосом. Отдельные варианты лейкозов могут быть идентифицированы на основании характерных поломок. Хромосомные поломки можно идентифицировать с помощью: Исследования хромосом в фазе митоза; С помощью специфических праймеров к ДНК (FISH, ПЦР) Нормальный кариотип часто ассоциируется с промежуточным прогнозом.

Хромосомные транслокации

FAB классификация ОЛ Острый лимфобластный лейкоз– На основании цитологической характеристики выделяют 2 типа лимфобластов; L 1 - чаще у детей, хороший прогноз. Мелкие клетки с компактным плотным хроматином. L 2 – чаще вариант наблюдается у взрослых. Крупные клетки с гетерогенным хроматином.

ОЛЛ-L 1

ОЛЛ-L 2

Острые лейкозы L 3 – редкая форма ОЛЛ (лейкоз Беркитта). Крупные клетки, с ясным гомогенным ядерным хроматином, содержащим нуклеолы. Ядра правильной округлой или овальной формы.

ОЛЛ-L 3 (Лейкоз Беркитта)

G-banding 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 x Y

Молекулярные методы диагностики Флуоресцентная гибритизация in situ (FISH) t(9; 22) Интерфаза Метафаза Courtesy of Charles Sawyers, UCLA.