Лабораторная диагностика и лечение ВИЧ Сегодня не

Лабораторная диагностика и лечение ВИЧ

Сегодня не существует единого теста, который бы позволял врачам ставить диагноз "СПИД", но создан целый ряд тестов для определения ВИЧ- инфекции. Стандартная диагностика, позволяющая обнаружить в организме наличие вируса, включает два этапа: установление собственно факта зараженности ВИЧ и определение стадии заболевания.

Подтвердить диагноз ВИЧинфекции можно с помощью различных лабораторных методов, которые позволяют выделить вирусы; выявить антитела к ВИЧ; обнаружить антигены ВИЧ.

Для выделения ВИЧ используют различные культуры лимфоцитов. Выделение вируса производится из крови, лимфы, пунктата лимфатических узлов, семенной жидкости, молока кормящей матери, слюны, мокроты, мочи, цервикалного отделяемого, кала. Чувствительность метода относительно невысока и он трудновыполним, поэтому метод изоляции ВИЧ применяется пока только в научно - исследовательских целях. Значительные преимущества имеет метод ДНК - зондов, основанный на получении клонированных участков вирусного генома, меченых радиоактивными маркерами или ферментными зондами. Он позволяет проводить молекулярно-биологическое выявление маркеров ВИЧ без дополнительного культивирования.

Для выявления антител к ВИЧ применяется несколько методов: иммуноферментный анализ; иммуноблотинг; иммунофлюоресценция; радиоиммунопреципитация; агглюцинация.

Самым простым, доступным и широко применяемым в практике является иммуноферментный анализ (ИФА) на выявление антител к вирусу СПИДа в крови больных. По сравнению с выделением вируса метод ИФА обладает значительно более высокой чувствительностью, однако менее специфичен из-за возможности получения ложноположительных и ложноотрицательных результатов.

Антитела к ВИЧ появляются у 90— 95% инфицированных в течение 3 месяцев после заражения, у 5— 9% — через 6 месяцев и у 0, 5 -1% - в более поздние сроки. С развитием заболевания количество антител может снижаться вплоть до полного исчезновения.

Забор крови производится из локтевой вены в чистую сухую пробирку в количестве 3— 5 мл. Материал не следует длительно хранить, так как наступивший гемолиз (разрушение эритроцитов) повлияет на результаты анализа. Поэтому после взятия крови желательно отделить сыворотку, которая может храниться в холодильнике до 7 дней.

Метод ИФА является скрининговым (проверочным). В случае положительного результата анализ в лаборатории проводится дважды (с той же сывороткой) и при получении хотя бы еще одного положительного результата сыворотка направляется для постановки подтверждающего теста.

Иммуноблотинг — тестирование на наличие антител к отдельным вирусным антигенам. Метод иммуноблотинга используется для подтверждения специфичности результата, полученного методом ИФА. Иммуноблотинг позволяет выявить в сыворотке крови инфицированных оболочечные и регуляторные белки ВИЧ. Однако и данный метод иногда дает ложноположительные реакции, например, при исследовании крови больных тропической малярией.

Метод иммунофлуоресценции относительно прост, в качестве антигенов в этой реакции используются различные клеточные линии инфицированных ВИЧ. Радиоиммунопреципитация — один из наиболее специфичных и чувствительных методов диагностики СПИДа, однако, для него требуются дорогостоящие радиоактивные материалы и оборудование. Кроме того, для постановки реакции необходимо культивировать инфицированные вирусом клетки. Метод агглюцинации является одним из наиболее простых, чувствительных и специфичных для определения антител к ВИЧ.

Обнаружение антигенов ВИЧ в исследуемом материале основано, главным образом, на тех же принципах, что и выявление антител. Однако существующие методы не позволяют регулярно обнаруживать антигены в материалах, полученных от больных, в связи с низким их содержанием.

В ряде лабораторий некоторых стран изучается диагностическая ценность новой реакции — энзимной амплификации генов. Эта реакция важна для; уточнения диагностики врожденного СПИДа, так как она позволяет выявлять клетки, пораженные вирусом, а не антитела.

В последние годы решающее значение для прогноза и тяжести ВИЧ - инфекции имеет определение «вирусной нагрузки» (viral load) — определение количества копий РНК ВИЧ в плазме методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Используется определение и других вирусологических маркеров.

Стоимость приговора ВИЧ- ифа-скрининг 100 грн, себестоимость 2 грн ВИЧ-иммуноблотинг 8000 грн, себестоимость 300 грн ВИЧ-ИФА 1000 грн, себестоимость 10 грн

Лечение ВИЧ

Лечение ВИЧ/СПИДа преследует комплексную цель: сократить количество вируса в организме (вирусную нагрузку) сдержать размножение (репликацию) вируса сохранить или восстановить иммунные функции предотвратить либо вылечить оппортунистические инфекции, возникающие на фоне иммунодефицита.

Этиотропная терапия, направленная на элиминацию (создание условий для гибели вирионов) или подавление ретровируса. Патогенетическая терапия, направленная на восстановление/стимулирование функций иммунной системы. Симптоматическая терапия, направленная на лечение основных клинических проявлений СПИДа (лечение оппортунистических инфекций).

После подтверждения диагноза ВИЧ устанавливают стадию болезни, определяют подходы к дальнейшему ведению больных. Показанием к назначению специфической терапии является стойкое снижение показателей иммунного статуса или наличие вторичных (или СПИД-ассоциированных) заболеваний.

Рано или поздно большинству ВИЧинфицированных понадобится лечение, но когда это произойдет, зависит от многих факторов. ВИЧ переходит в стадию СПИД с различной скоростью – у одних людей быстрее, у других – медленнее. Назначить лечение может только врач, ориентируясь на клинические проявления болезни у пациента, вирусную нагрузку и количество СD 4 лимфоцитов. Выбирая ту или иную комбинацию препаратов, врачу должно быть известно о болезнях, перенесенных пациентом в прошлом, о наличие хронических инфекций, аллергии, беременности и множестве других фактов.

Для своевременного назначения терапии необходимо, чтобы пациент регулярно проходил клинико-лабораторное обследование. Примерно треть ВИЧ-инфицированных остаются здоровыми на протяжении 10 лет без какого-либо лечения. Большинство пациентов в странах, где доступна терапия, начинают получать лечение через 4– 5 лет после инфицирования. У небольшого числа людей заболевание начинает прогрессировать гораздо быстрее и необходимость в лечении возникает намного раньше. Принято считать, что заболевание прогрессирует, если в процессе диспансерного наблюдения отмечается снижение количества CD 4 клеток до 300/мл. и ниже, а также стабильное увеличение вирусной нагрузки более 60 тыс. копий/мл. В этом случае больному рекомендуется начать лечение.

Антиретровирусная терапия (АРТ) На сегодняшний день наиболее перспективным методом лечения ВИЧинфекции и СПИДа представляется одновременное использование комбинации противовирусных препаратов, подавляющих репродукцию вируса, и стимуляторов иммунной системы, к которым прибегают с целью коррекции развивающегося иммунодефицита

Антиретровирусная терапия (АРТ) подразумевает использование медицинских препаратов, действующих на ферменты вируса и приостанавливающих размножение ВИЧ. Одновременный прием 3 -х или 4 -х антиретровирусных препаратов называют Высокоактивной антиретровирусной терапией (ВААРТ). В результате проведения ВААРТ удается уменьшить содержание вируса в крови (вирусной нагрузки) до неопределяемого уровня. Конечно, это не значит, что человек полностью избавился от этого вируса, поскольку ВИЧ может находиться не только в крови, но и в лимфатических узлах, а также других органа человека.

Если до начала лечения у пациента уже были симптомы болезни, свидетельствующие о недостаточности иммунной системы, то в результате лечения они могут исчезнуть, а новые не появятся. Необходимо помнить, что если ВИЧ-инфекция зашла уже очень далеко, т. е. количество CD 4 -лимфоцитов меньше 100 клеток в 1 мл крови, а особенно меньше 50, и имеются клинические симптомы СПИДа, то эффективность терапии может быть неполной. В этом случае добиться существенного увеличения количества CD 4 -лимфоцитов чрезвычайно сложно.

Приверженность лечению Поведение пациента, которое гарантирует неразрывный процесс приема лекарственных препаратов, соблюдение правил их приема и дозировки.

Приверженность терапии означает, что пациент: не пропускает и вовремя принимает лекарства; принимает их в предписанных врачом дозах; соблюдает рекомендации врача по приему (до, во время или после еды и т. п. ); соблюдает все рекомендации по диете.

Из результатов ряда исследований известно, что для достижения оптимального результата пациент должен принять не менее 90– 95% назначенных доз, а более низкий уровень приема препаратов чаще связан с неудачным вирусологическим результатом.

Можно идентифицировать следующие факторы, по которым заранее можно предсказать недостаточную приверженность лечению: плохо налаженные взаимоотношения между врачом и больным; активное употребление наркотиков и алкоголя; психические заболевания в активной фазе, в частности депрессия; самооценка больного плохо предсказывает вероятность приверженности, однако низкая самооценка имеет большое значение и к этому следует относиться серьезно; низкий уровень грамотности и неспособность разобраться в схеме назначенных лекарств; отсутствие надежного доступа к первичной медицинской помощи или к самому лекарственному препарату; насилие в домашних условиях и дискриминация; наличие побочных эффектов препаратов, страха или перенесенного опыта известных побочных эффектов при ВААРТ.

Консультирование пациента лечащим врачом считается важным моментом подготовки к началу приема ВААРТ. Весьма полезно также активное участие медицинской сестры, психолога, социального работникаконсультанта, подготовленными по вопросам антиретровирусной терапии (АРТ).

АНТИРЕТРОВИРУСНЫЕ ХИМИОПРЕПАРАТЫ Существует 3 класса АРВП: 1. Нуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы ВИЧ. 2. Ненуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы ВИЧ. 3. Ингибиторы протеазы ВИЧ.

Нуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы ВИЧ К данному классу АРВП относят: аналоги тимидина зидовудин, фосфазид, ставудин; аналог аденина диданозин; аналоги цитидина зальцитабин, ламивудин; аналог гуанина абакавир.

Механизм действия В основе структуры всех НИОТ лежит один из аналогов природного нуклеозида (тимидин, аденин, цитидин или гуанин), что обусловливает общее свойство метаболитов каждого из препаратов блокировать обратную транскриптазу ВИЧ и избирательно ингибировать репликацию вирусной ДНК. Под действием соответствующих ферментов препараты метаболизируются с образованием трифосфатов, которые и проявляют фармакологическую активность. Способность препаратов этой группы ингибировать обратную транскриптазу ВИЧ в сотни раз выше, чем способность подавлять ДНК-полимеразу человека. НИОТ активны в инфицированных ВИЧ Т-клетках и макрофагах, ингибируют ранние стадии жизненного цикла вируса.

Ненуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы ВИЧ К группе ННИОТ относятся невирапин и ифавиренц. Они ингибируют ранние стадии жизненного цикла вируса, поэтому активны в отношении остро инфицированных клеток.

Ингибиторы протеазы ВИЧ К ингибиторам протеазы ВИЧ относятся саквинавир, индинавир, ритонавир, нелфинавир и ампренавир.

Механизм действия Протеаза ВИЧ - фермент, необходимый для протеолитического расщепления полипротеиновых предшественников вируса на отдельные белки, входящие в состав ВИЧ. Расщепление вирусных полипротеинов крайне важно для созревания вируса, способного к инфицированию. ИП блокируют активный центр фермента и нарушают образование белков вирусного капсида. Препараты этой группы подавляют репликацию ВИЧ, в том числе при резистентности к ингибиторам обратной транскриптазы. В результате угнетения активности ВИЧ-протеазы формируются незрелые вирусные частицы, неспособные к инфицированию других клеток.

На сегодняшний день появление новых классов препаратов в основном нацелено на уменьшение побочных эффектов от приема терапии, поскольку продолжительность жизни ВИЧположительных людей принимающих терапию практически сравнялась с продолжительностью жизни вич отрицательного населения.

Важное значение придается поддержанию здоровья ВИЧположительного немедикаментозными средствами (правильное питание, здоровый сон, избегание сильных стрессов и длительного нахождения на солнце, здоровый образ жизни), а также регулярный (2 -4 раза в год) мониторинг состояния здоровья у врачейспециалистов по ВИЧ.

СПАСИБО ЗА ВНИМАНИЕ