Лаборатоная диагностика вирусных гепатитов. Токтасынова Ш 703 -ТКБ

Лаборатоная диагностика вирусных гепатитов. Токтасынова Ш 703 -ТКБ

Терминология • Гепатит – воспалительная патология печени вне зависимости от этиологии • Вирусный гепатит – воспалительная патология печени вирусной природы, связанная с репродукцией вируса

Вирусные гепатиты • Г епатит А ( HAV ) • Г епатит В ( HBV ) • Г епатит С ( HCV ) • Г епатит D ( HDV ) • Г епатит E ( HEV ) • Г епатит G ( HGV ) • Г епатит TT ( TTV ) • Г епатит SEN

ДНК -вирус • Г епатит В ( HBV ) • Г епатит TT ( TTV ) • Г епатит SEN • Г епатит А ( HAV ) • Г епатит С ( HCV ) • Г епатит D ( HDV ) • Г епатит E ( HEV ) • Г епатит G ( HGV ) 4 РНКРНК -вирус

Кровь • Г епатит В ( HBV ) • Г епатит С ( HCV ) • Г епатит D ( HDV ) • Г епатит G ( HGV ) • Г епатит TT ( TTV ) • Г епатит SEN • Г епатит А ( HAV ) • Г епатит E ( HEV ) 5 Вода, пища

6 Клиника HBV+HDV HAV, HEV HCV и др. ТЯЖЕЛОЕ ТЕЧЕНИЕ СРЕДНЕТЯЖЕЛОЕ ТЕЧЕНИЕ ЛЕГКОЕ ТЕЧЕНИЕ

Лабораторная диагностика • Гепатит ? • Гепатит вирусный активный ? 8 РНК Билирубин УЗИАЛТ Ig. G HBs. Ag ДНК Ig. M АСТ

I этап. Гепатит ? • Эпидемиологический анамнез • Клиника – астеновегетативн ый и мезенхимально-воспалительн ый синдромы • Биохимические исследования • Морфологическое и функциональное исследование печени (УЗИ, сканирование и др. )

I этап. Биохимические исследования • аланинаминотрансфераза (Ал. АТ) • аспартатаминотрансфераза (Ас. АТ) • лактатдегидрогеназа (ЛДГ) • ‑ глютамилтранспептидаза (ГГТ) • щелочная фосфатаза (ЩФ) • диспротеинемии (тимоловая проба) и др

Активность ферментов крови Фермент При гепатитах любой этиологии Гепатоспецифичность Ал. АТ увеличение нет Ас. АТ увеличение нет Щ Ф увеличение нет Фруктозо 1 -фосфатальдола за увеличение + Сорбитол дегидрогеназа увеличение +

Билирубин при желтушных формах вирусного гепатита Показатели Норма (мкмоль/л) При гепатита х Общий билирубин 1, 7 — 17, 1 Рост Прямой билирубин до 3, 4 Рост Непрямой билирубин 1, 7 — 12, 7 Рост Билирубин мочи и уробилин — + Стеркобилин кала + —

II этап. Вирусный гепатит А? • Сыворотка крови • Иммуноферментный метод (ИФА) • anti-HAV Ig. G

II этап. Вирусный гепатит В? • Сыворотка крови • ИФА • HB s. Ag ( c подтверждением) + • anti-HBc or Ig. G + • anti-H B e Ig. G

HBs. Ag не обнаруживается : • В серонегативный период заболевания (до 6 месяцев с момента инфицирования ) • В период ремиссии (фаза интеграции) • П ри одновременном инфицировании дельта-вирусом (гепатит D )

HBs. Ag не обнаруживается : • В связи с существовани ем вариантов H B s. Ag , неизвестных в настоящее время (Известно свыше 12 субтипов этого антигена и приблизительно столько же генотипов вируса ) • HBs. Ag не обладает абсолютной с пецифичностью

II этап. Вирусный гепатит C ? • Сыворотка крови • ИФА • anti-HCV Ig. G ( c крининг + подтверждение)

II этап. Вирусный гепатит D, E, G ? • Сыворотка крови • ИФА • anti-HDV суммарные • anti-HEV суммарные • anti-H G V суммарные

II этап. Вирусный гепатит TT, SEN ? • Плазма крови • Полимеразная цепная реакция (ПЦР) • ДНК вируса гепатита TT • ДНК вируса гепатита SEN

III этап. Активный гепатит А? • В ирусн ая РНК в плазме крови и / или испражнениях ( ПЦР ) или • Ag HAV в испражнениях (ИФА) или • anti-HAV Ig M в сыворотке крови (ИФА)

III этап. Активный гепатит B ? • В ирусн ая ДНК в плазме крови ( ПЦР ) или • HBs. Ag (c подтверждением) в сыворотке крови или • H B e. Ag в сыворотке крови (ИФА) или • anti-HBc or Ig M в сыворотке крови (ИФА) или • anti-HBe Ig M в сыворотке крови (ИФА)

III этап. Активный гепатит C ? • В ирусн ая РНК в плазме крови ( ПЦР ) или • anti-HCV Ig G к неструктурным белкам вируса ( NS 3 , NS 4 , NS 5 ) в сыворотке крови ( ИФА ) или • anti-H C V Ig M в сыворотке крови (ИФА)

23 • Скрининговые тест-системы • Подтверждающие тесты: иммуноблот ИФА • Диагностикумы, выявляющие активную репликацию вируса: ИФА (анти-ВГС- Ig. M) ПЦР (РНК-ВГС) core-Ag • Экспресс-метод

24 «ВГС-АГ / АТ-ИФА-БЕСТ» — (2010 г) • Двустадийный иммуноферментный тест в микропланшетном формате; • Антитела (АТ) к ВГС определяются с помощью непрямого ИФА; • Антиген (АГ) вируса — методом «сэндвич» ; • Обе методики объединены в единый протокол и выполняются в одной лунке микропланшета; • Образцы для исследования не требуют предварительной подготовки; • Правильность внесения образцов и реагентов оценивается с помощью цветовой кодировки (спектрофотометрическая верификация); • Продолжительность анализа — 2 часа 25 минут.

III этап. Активный гепатит D ? • В ирусн ая РНК в плазме крови ( ПЦР ) или • Ag HDV в сыворотке крови ( ИФА )

III этап. Активный гепатит E ? • В ирусн ая РНК в плазме крови ( ПЦР )

III этап. Активный гепатит G, TT, SEN ? • РНК вируса гепатита G в плазме крови ( ПЦР ) • ДНК вируса гепатита TT в плазме крови ( ПЦР ) • ДНК вируса гепатита SEN в плазме крови ( ПЦР )

Ускоренное обследование ( ИФА+ПЦР) Инфицированность? ( ИФА ) Активность? ( ПЦР ) Гепатит А Anti-HAV Ig. G РНК Гепатит B HBs. Ag Anti-HBe Ig. G Anti-HBcor Ig. G ДНК Гепатит C Anti-HCV Ig. G РНК Гепатит D Anti-HDV Ig. G РНК

Ускоренное обследование ( ИФА+ПЦР) Инфицированность? ( ИФА ) Активность? ( ПЦР ) Гепатит E суммарные Anti-HEV РНК Гепатит G суммарные Anti-HGV Р НК Гепатит TT Д НК Гепатит SEN Д НК

Ускоренное обследование ( ИФА ) Инфицированность? Активность? Гепатит А Anti-HAV Ig. G HAV Ag (в кале) Anti-HAV Ig. M Гепатит B Anti-HBcor Ig. G + Anti-HBe Ig. G HBs. Ag или HBe. Ag или Anti-HBcor Ig. M Гепатит C Anti-HCV Ig. G A nti-HCV Ig G к неструктурным белкам или Anti-HCV Ig. M

Ускоренное обследование ( ИФА ) Инфицированность? Активность? Гепатит D Суммарные Anti-HDV Ag Гепатит E Суммарные Anti-HEV Гепатит G Суммарные Anti-HGV Гепатит TT Гепатит SEN